针刺治疗肝郁脾虚型运动性疲劳的实验研究

许金叶　冯毅翀

[摘要] 目的 研究针刺治疗对肝郁脾虚型运动性疲劳的影响。 方法 本次研究对象为当地某医科大学实验动物中心2012年5月～2015年5月期间饲养的60只SPF级SD雄性大鼠，并随机分成对照组（20只）、疲劳组（20只）以及疲劳加针刺组（20只）。除了对照组外，疲劳组和疲劳加针刺组大鼠均进行疲劳模型建立，另外予以疲劳加针刺组大鼠针刺治疗。 结果 疲劳加针刺组大鼠的死亡率显著低于疲劳组大鼠，实验前后体重变化值显著小于疲劳组（P<0.05）；在血浆T浓度方面比较，疲劳加针刺组大鼠的血浆T浓度水平显著高于疲劳组（P<0.05）；在血浆LH水平方面比较，疲劳加针刺组大鼠的血浆LH水平显著高于对照组和疲劳组（P<0.05）；在睾丸超微结构方面比较，疲劳加针刺组大鼠与对照组大鼠无明显差异，但是疲劳组大鼠睾丸超微结构出现间质细胞数量少，线粒体及内质网溶解等现象；在腺垂体FA细胞构方面比较，三组大鼠无明显差异。 结论 针刺治疗可以有效改善下丘脑-垂体-性腺轴功能，调节性激素水平，缓解疲劳症状，降低因过度疲劳而引起的死亡。

[关键词] 运动性疲劳；肝郁脾虚；针刺治疗；影响

[中图分类号] R259 [文献标识码] A [文章编号] 2095-0616（2016）09-24-04

[Abstract] Objective To study the effect of exercise Fatigue on hepatic stagnation and spleen deficiency type with Acupuncture treatment. Methods 60 SPF SD male rats from May 2012 to May 2015 were feeded at a local Medical Laboratory Animal Center， and were randomly divided into control group （20 rats）， fatigue group （20 rats） and fatigue plus acupuncture group（20 rats）. In addition to the control group， the fatigue and fatigue plus acupuncture group rats were fatigue model， in addition， the rats in fatigue plus acupuncture group were treated with acupuncture. Results The death rate of fatigue plus acupuncture group was significantly lower than that of fatigue group， the weight changes before and after the experiment of fatigue plus acupuncture group was significantly less than that of fatigue group （P<0.05）. Compared with fatigue and acupuncture group， the T plasma levels were significantly higher than fatigue group（P<0.05）. Compared with fatigue and acupuncture group， the terms of plasma LH levels， LH levels in rats' plasma were significantly higher than control group and fatigue group（P<0.05）. In the testis ultrastructure， there was no significant difference between fatigue plus acupuncture group and control group， but there was testicular leydig cell ultrastructure small number of mitochondria and endoplasmic reticulum dissolution phenomena. In pituitary cells FA configuration aspects， there was no significant difference of three groups. Conclusion The acupuncture treatment can effectively improve the hypothalamic-pituitary-gonadal axis function， regulate hormone levels， relieve fatigue， reduce deaths caused by fatigue.

[Key words] Exercise fatigue； Hepatic stagnation and spleen deficiency； Acupuncture treatment； Impact

运动性疲劳是指由于运动造成肌肉最大收缩或最大输出功率短暂性下降的生理现象[1]，严重时可影响患者正常工作和劳动，降低生活质量。本文为了研究针刺治疗肝郁脾虚型运动性疲劳的临床疗效，对2012年5月～2015年5月期间饲养的60只SPF级SD雄性大鼠进行研究，详细报道内容如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

本次研究对象为当地某医科大学实验动物中心2012年5月～2015年5月期间饲养的60只SPF级SD雄性大鼠，并随机分成对照组（20只）、疲劳组（20只）以及疲劳加针刺组（20只），均在同一环境条件下分笼饲养，体重范围在250～300g，平均（270±10）g；平均月龄为（3.3±0.2）个月。

1.2 方法

建立疲劳模型：除了对照组大鼠外，疲劳组和疲劳加针刺组大鼠均参与长期运动训练，首先将大鼠在跑台上进行适应性训练[2]，适应性训练时间至少7d，根据相关研究选择合适的运动强度和运动负荷，跑台的坡度设置为10%，按照每分钟35m的速度进行训练（85%～90%VO2max），规定运动时间为1h，每日一次。在运动训练中，如果出现有大鼠无法持续跑速，可采取电刺激促进其追赶[3]。如果仍然无效时，则终止本次运动训练，并记录运动时间。疲劳组和疲劳加针刺组大鼠总训练时间均定位35d。

针刺治疗：在运动训练之前，予以疲劳加针刺组大鼠针刺治疗，选取杭州丹顿医疗器械有限公司生产的SXDZ-100型针刺手法治疗仪，选择大鼠的肾俞穴（关元穴）作为目标针刺穴位，针刺时间至少20min，5次/周，针刺结束后继续疲劳训练。

性激素水平测定：仪器选择国产F-2011型γ-计数器，试剂盒均由天津九鼎医学生物工程公司提供。在对照组、疲劳组、疲劳加针刺组大鼠结束35d运动训练后，分别断头采集2mL血液标本，然后采用双抗体放免分析法进行性激素水平测定，包块血浆T水平和血浆LH水平。

性腺超微结构观察：对照组、疲劳组、疲劳加针刺组大鼠处死后，每组任意选取3只大鼠的腺垂体和睾丸组织进行制片，然后采取透视电镜观察大鼠性腺超微结构。

1.3 观察指标

观察对照组、疲劳组、疲劳加针刺组大鼠的一般情况以及性腺超微结构情况，统计死亡率、平均训练时间、实验前后体重变化差值、血浆T水平、血浆LH水平。

1.4 统计学处理

本研究中所有数据采用医学统计学软件SPSS21.0版处理，计量资料用（）的形式表示，进行t检验；计数资料用%表示，进行χ2检验。三组大鼠血浆T值及FH值为计量资料，组间对比使用方差分析，若P<0.05，则为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 对照组、疲劳组、疲劳加针刺组大鼠的日常情况比较

对照组大鼠未经训练，表现为体重增加，体毛光亮、几乎无脱落，喜欢运动、大便正常；疲劳组大鼠经过训练后，表现为体型明显消瘦、拱背、体毛无光泽并脱落、喜扎堆、不好动、大便稀等，疲劳加针刺组大鼠体重略有减轻，体毛、大便等均较正常。

2.2 对照组、疲劳组、疲劳加针刺组大鼠的一般情况比较

疲劳加针刺组的死亡率显著低于疲劳组，实验前后体重差值显著小于疲劳组，训练时间则与疲劳组无明显差异，三组大鼠一般情况对比如表1所示。

2.3 对照组、疲劳组、疲劳加针刺组大鼠的激素水平比较

疲劳加针刺组的血浆T水平显著低于对照组，并显著高于疲劳组；血浆LH水平显著高于对照组和疲劳组，具体结果如表2所示。

2.4 对比分析对照组、疲劳组、疲劳加针刺组大鼠的性腺组织或器官的超微结构

2.4.1 比较对照组、疲劳组、疲劳加针刺组大鼠的睾丸组织超微结构 对照组：存在大量的间质细胞、线粒体形态正常、胞浆反应也很正常，绝大多数碱性分泌颗粒存在于大量滑面内质网内部。

疲劳组：存在少量的间质细胞，线粒体形态异常，胞浆反应异常减弱，具有高电子密度的分泌颗粒，存在少量的滑面内质网和溶解现象。

疲劳加针刺组：与对照组比较，大量滑面内质网以及碱性分泌颗粒数量偏少，其余超微组织结构基本相似。详见图1和图2。

2.4.2 比较三组大鼠腺垂体LH细胞超微结构 对照组：大鼠腺垂体中促黄体生成素细胞浆内含有高电子密度的球状分泌颗粒，线粒体和内质网等结构分布正常。

疲劳组：与对照组大鼠的垂体LH细胞超微结构大致相似，只有LH细胞的细胞核偏大。

疲劳加针刺组：与另外两组相比较，细胞浆内排列大量密集的分泌颗粒。

详见图3和图4。

3 讨论

疲劳在中医中属于“虚劳”“虚损”范畴，清·尤怡《金匮翼》“虚劳，一日虚损。盖积劳成虚，积虚成弱，积弱成损也。虚者，空虚之谓。损者，破散之谓。”同时清·林佩琴《类证治裁·虚劳篇》中又指出虚劳有五种表现[4]，包括肺劳伤气、脾劳损食、心劳损神、肝劳损血、肾劳损精。中医理论认为[5]，导致疲劳的因素主要为先天禀赋不足、饮食不节、情志内伤、过度劳累等，从而导致机体脏腑亏虚、气血失调、阴阳失衡。肝郁脾虚型运动性疲劳的病位以肝、脾、肾为主[6]，并常见虚证和实证相伴，虚证主要病因为脾肾亏虚，实证主要病因为肝郁血瘀。

中医理论认为，导致疲劳的因素主要为先天禀赋不足、饮食不节、情志内伤、过度劳累等，从而导致机体脏腑亏虚、气血失调、阴阳失衡[7]。肝郁脾虚型运动性疲劳的病位以肝、脾、肾为主，并常见虚证和实证相伴，虚证主要病因为脾肾亏虚，实证主要病因为肝郁血瘀[8]。

针刺是中医学治疗各种疾病的常用方法，是形神兼治的完美融合[9]。针刺通过刺激可以直接调节患者的精气神[10]。针刺通过刺激可以直接调节患者的精气神。中医狭义上的“神”是指人的精神、意识和思维活动包括七情六欲[11]，五志和中医基础的魂、魄、意、志、思、虑、智等。治“神”贯穿于针刺调理以及治疗，有利于提高临床治疗效果，是针刺治疗的精髓所在[12]。头痛、肌肉关节痛、注意力不集中、记忆力下降、睡眠障碍和抑郁等均为运动性疲劳的常见临床表现[13]，治“神”可以有效缓解患者的临床症状。针刺百会、关元、足三里具有调节五腑六脏气机和补益人体正气的功效[14]。针刺神庭可以调控患者的神经系统紊乱，缓解记忆力衰退；针刺印堂可以治神，推动督脉气血的运行[15]。此外，还可以调和阴阳。针刺神阙穴具有温补元阳、健运脾胃、复苏固脱的功效。合谷是气血聚集的重要穴位，针刺合谷穴则具有宣泄气中之热、升清降浊、疏风散表、调理气血的功效，并可以推动头部的气血运行。脑部是元神之首，针刺合谷穴可以起到治“神”的效果[16]。神门为心神之门，心经体内的气血物质由此交于心经体表经脉。因此，针刺神门穴可以安定患者的心神[17]，缓解其失眠症状，还可以调节自律神经，补益心气。针刺气海可以生发阳气，益气助阳、调经固经[18]。

大量运动实践表明，长时间大量运动训练后可以导致下丘脑-垂体-性腺轴功能减退[19]，以致于机体内相应的性激素水平出现异常。此次研究结果显示，疲劳加针刺组大鼠的死亡率显著低于疲劳组大鼠，实验前后体重变化值显著小于疲劳组（P<0.05），由此说明，针刺治疗可以缓解疲劳，降低由于过度疲劳而死亡的发生率。

本研究中，在血浆T浓度方面比较，疲劳加针刺组大鼠的血浆T浓度水平显著高于疲劳组（P<0.05）；在血浆LH水平方面比较，疲劳加针刺组大鼠的血浆LH水平显著高于对照组和疲劳组（P<0.05）；在睾丸超微结构方面比较，疲劳加针刺组大鼠与对照组大鼠无明显差异，但是疲劳组大鼠睾丸超微结构出现间质细胞数量少，线粒体及内质网溶解等现象；在腺垂体FA 细胞构方面比较，三组大鼠无明显差异。通过上述讨论和对研究结果的分析，可以得出结论：长时间大量运动后引发疲劳，同时机体的睾丸组织也将受到牵连，出现损伤现象以及血浆T细胞水平发生明显的降低；针刺治疗可以有效改善下丘脑-垂体-性腺轴功能[20-21]，调节性激素水平，缓解疲劳症状，降低因过度疲劳而引起的死亡。

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（收稿日期：2016-01-07）