灵芝杂交菌株栽培比较试验

王庆武　兰玉菲　李秀梅　唐丽娜

摘要：对13个灵芝杂交菌株进行栽培试验，综合比较菌株菌丝生长速度、生物学效率、子实体形态特征、多糖和三萜含量等指标。结果表明，菌株4947、4930、4895适用于药用菌栽培；菌株4911菌盖最大（12.47 cm），菌盖较厚，子实体色泽好，可用于制作盆景。

关键词：灵芝；杂交菌株；生物学效率；子实体形态特征；多糖和三萜含量

中图分类号：S567.3⁺10.37 文献标识号：A 文章编号：1001—4942（2016）03—0070—03

灵芝（Ganoderma lingzhi）是我国中药和传统食疗宝库中的珍品，具有广泛的药理活性，具有抗肿瘤、降低血糖和血压、消炎、利尿、益胃、提高机体免疫力等多种功效，市场反应较好。随着灵芝新药用功效的不断发现及其保健作用的突出，灵芝的需求量大幅增加。但随着灵芝产业的不断发展，其在生产相关研究方面的问题也层出不穷，例如：目前的主栽品种经过不断栽培使用容易发生退化，进而出现严重的减产、品质下降现象；人们越来越期望主栽品种能同时集多个优势性状之和，最大化地利用现有资源；另外，种问和品种问的不同、培育环境和条件的改变可能引起药用成分在产量表达上的差异。为了解决制约灵芝产业发展的育种瓶颈问题，笔者通过原生质体单核杂交育种技术，成功获得13个杂交新菌株，并对获得的杂交菌株进行栽培综合评价，以期筛选出具有明显杂交优势的新品种，丰富灵芝栽培种质资源，提升灵芝栽培品质。

1材料与方法

1.1供试菌株

泰安市农业科学研究院选育的13个原生质体单核杂交新菌株，对照为自主选育的国家认定品种泰山赤灵芝1号。

1.2培养基配方

棉籽壳38%、木屑30%、玉米芯20%、麦麸10%、石灰1%、石膏1%，含水量60%～65%，pH值6.0。

1.3原料处理

原料要求无霉变、洁净。玉米芯暴晒后粉碎至大小0.5～1.0 cm。按照配方称取原料。玉米芯较硬，提前2 d预湿，使其吸水软化，预湿时加入石灰和石膏，玉米芯加水量为2.0 kg/kg干料。

1.4栽培方法

熟料栽培，采用规格为18 cm×39 cm×0.004 cm的聚丙烯栽培袋。机械装袋，每袋装干料0.571kg，保证每栽培袋装料量一致；常压蒸汽灭菌，100℃下保持12 h，再闷12 h；无菌条件下各品种、各栽培袋接种量一致。菇棚内自然温度出芝，发菌管理和出芝管理参照“灵芝定向出芝栽培技术规程”地方标准（DB3709/T 118-2014）和文献[7、8]。出菇期只给水，不使用任何农药和添加剂。

1.5试验设计

根据单因素随机区组试验原则，每个菌株设3个重复，每个重复50袋。试验安排在同一菇棚内，不同菌株随机排列，设保护行。同一重复内的同一管理措施必须在同一天内完成，各重复的栽培管理条件与方法等均应相同。

1.6有效成分的测定

参照文献[9]，采用苯酚一硫酸法测定灵芝子实体多糖和三萜含量。

1.7评价项目

全程跟踪调查记录每个菌株每个重复的菌丝生长、出菇、产量等情况，检测子实体有效成分含量，进行统计分析，综合评价。

2结果与分析

2.1不同灵芝菌株菌丝生长比较

菌丝日长速、长势、污染率等统计分析结果（表1）表明，不同灵芝菌株间菌丝日生长速度有显著差异。菌株4909菌丝日生长速度最快，达0.85 cm，显著高于菌株4947、4872、4911、4918、4914和CK，但六者间差异不显著；除菌株4918和4907菌丝长势较好外，其他菌株菌丝均浓密、健壮，长势好；菌株4936污染率最低，仅为0.04%，表明其抗杂性强，其他菌株抗杂性均较强，但污染率也可能与接种时的人为因素有关。

2.2不同灵芝菌株生物学效率比较

菌株干芝生物学效率统计分析结果（表2）表明，不同灵芝菌株间生物学效率有显著差异。菌株4914生物学效率最高，达10.34%，其次是菌株4947、CK、4930和4918，五者问差异不显著；其它菌株均低于CK，且差异显著。菌株4893、4907、4918、4947出芝污染率为0，菌株4911、4914次之，表明其抗杂性强，其他菌株出芝污染率与CK相当或略高。

2.3不同灵芝菌株子实体形态特征及多糖、三萜含量比较

菌株子实体形态特征统计分析及多糖、三萜含量检测结果（表3）表明，菌株子实体在菌盖大小、厚度，菌柄长度、直径，色泽，多糖、三萜含量等方面有显著差异。菌株4911菌盖最大，为12.47cm，菌株4909次之，二者差异不显著，但显著高于CK；除菌株4872和4921外，其他菌株菌盖大小均与CK差异不显著。菌株4909菌盖最厚，为1.95 cm，菌株4911次之，二者差异不显著，但显著高于CK；除菌株4921外，其他菌株菌盖厚度均与CK差异不显著。菌株4872菌柄最长，为4.74em，菌株4921、4894、CK次之，四者差异不显著，其他菌株菌柄长度均与CK差异显著。菌株4911菌柄直径最大，为2.82 cm，菌株4918、CK、4909、4893、49 14、4895、4930、4907、4894次之，十者差异不显著，其他菌株菌柄直径均与CK差异显著。菌株菌盖背面黄褐至红褐色，腹面浅黄至深黄色，均与CK差异不显著。菌株4894多糖含量最高，为1.74%，明显高于CK；菌株4914多糖含量略低于CK，其他菌株多糖含量均高于CK。菌株4895三萜含量最高，为1.16%，菌株4909、4921次之，三者明显高于CK；菌株4894三萜含量明显低于CK，其他菌株三萜含量与CK相当或略低。

3结论与讨论

本试验表明，菌株4947干芝生物学效率高（10.18%），子实体多糖含量较高（1.42%），三萜含量（0.93%）略高于CK，可用于药用菌栽培；菌株4930干芝生物学效率（9.48%）与CK相当，子实体多糖含量较高（1.28%），三萜含量（0.97%）略高于CK，也可用于药用菌栽培；菌株4895干芝生物学效率（8.77%）略低于CK，但子实体多糖（1.23%）和三萜（1.16%）含量明显高于CK，综合子实体多糖和三萜含量均高于CK，也可用于药用菌栽培；菌株4911菌盖最大（12.47 cm），菌盖较厚（1.69 cm），背面黄褐色，腹面黄色，可用于制作盆景。其他菌株可作为种质资源保存。