唐秀锋 刘本祥 杨家贵 邬永忠 谭国良 颜忠 牟洪明
摘 要 为了解决室内培育大鲵在人工繁殖过程中雌雄发育不同步的关键问题,对大鲵的室内培育及人工繁殖技術做了初步研究,结果表明通过雄鲵提前2~3 d催产,采取勾卵器自泄殖孔牵引雌鲵卵带排卵能较好的解决雌雄大鲵发育不同步的问题,从而提高大鲵卵粒受精率。
关键词 大鲵;室内培育;人工繁殖;催产
中图分类号:S947.3 文献标志码:B DOI:10.19415/j.cnki.1673-890x.2016.16.024
知网出版网址:http://www.cnki.net/kcms/detail/50.1186.s.20160705.2344.027.html 网络出版时间:2016-7-5 23:44:00
大鲵(Andrias davidianus),俗称“娃娃鱼”,是国家二类保护动物,具有极高的经济价值及广泛的开发利用前景。近年来,全国已有多家单位进行了大鲵仿生态、原生态繁殖,取得一定效果[1],但大鲵繁殖过程中的雌雄发育不同步及受精率低的问题仍然较为突出[2],随着国家对人工繁殖的仔二代大鲵实施标识管理,将有利于大鲵的开发利用,为了更充分的开发利用大鲵的经济价值,对大鲵的室内培育及人工繁殖技术做了初步研究,采用不同的催产方法及人工排卵方式较好地解决了大鲵雌雄发育不同步的关键问题,取得较好的效果,为大鲵的规模化人工繁殖开辟了新的途径。
1 材料与方法
1.1 水源条件
大鲵亲本培育水源为地下水和地表水,地下水流量为12 m3/h,水温18~20℃,地表水为天然的地表水,水温8~35℃,地表水经砂石简单过滤,除去水中悬浮物。
1.2 大鲵培育池
大鲵培育池建在室内,面积200 m2,白天关闭窗帘遮光,每口培育池面积为1.2 m×1.6 m的长方形水泥池,池内有栖息洞,每池单独进、排水,池深0.7 m,水深可调,每口培育池放养1尾大鲵亲本。
1.3 亲本来源
大鲵亲本65尾(50♀∶15♂)是2006年从四川省引进的野生大鲵,体质健壮、体形较好、年龄均在6龄以上的亲本。
1.4 亲本培育
1.4.1 饵料投喂
大鲵亲本饵料全部投喂活饵料,以30~50 g活鲫鱼、鲤鱼种为主,每月补充1次泥鳅,每周加饵1次。各培育池的加饵量视各亲本生长发育情况而定,每池保持的饵料鱼数量:4—9月(产卵期间除外)为 15~20尾,10—12月为10~15尾,12—次年3月为3~5尾。全年投喂的饵料鱼总量中鲫鱼占70%,鲤鱼种20%,鳅鱼5%,其它饵料5%。
1.4.2 水质管理
水深10~20 cm,每周彻底换水2~3次,换水时要将池底粪便和其他污物清理干净,常年微流水培育。
1.4.3 水温调控
配有3 kW的空调2台,5—9月水温升至23℃以上,转为地下水,开起空调,将水温控制在20~22℃。在10—次年4月,水温在23℃以下时,培育室开窗通风,保持室内空气清新,空调停用,加大进水量,以自然水温的地表水培育亲本。
1.5 大鲵催产技术
1.5.1 大鲵亲本的雌雄鉴别
繁殖季节雌性大鲵的腹部稍膨大,泄殖孔周围无明显的圆形吸盘状突起;雄鲵泄殖孔周围有明显的圆形吸盘状突起,突起越明显,一般发育较好。
1.5.2 催产药物及剂量
用类似物(LRH-A2)、绒毛膜(HCG)作催产药物,能达到较好的催产效果。催产药物选用宁波激素厂生产的LRH-A2、HCG。雌雄亲本均采用一针注射,药物剂量雌雄亲本相同。催产药物及剂量为每kg重量LRH-A2 3~8 μg+HCG 500~1000国际单位。
1.5.3 催产方法及时间
大鲵亲本在培育池原池内进行催产,催产前捞尽饵料鱼,水温控制在20~22℃,催产时间为8月上中旬,雌雄配比为(5~8)∶1,雄性亲本比雌鲵提前65~72 h催产。
1.6 大鲵精液检查
雄鲵催产96 h后每天采集精液观察精子活动情况,确定精液质量较好的大鲵备用。
1.7 大鲵的排卵
方法1:卵带自行排出。2008—2009年在雌亲本注射催产药物后,定时巡池,观察到雌亲本有卵带排出,就及时将卵带拉出来。
方法2:勾卵器辅助勾卵。2010—2013年,在雌鲵催产后96~120 h,无卵带排出的雌鲵用勾卵器辅助将卵带及时勾出。排卵工具为勾卵器及排卵布袋,勾卵器为长20~25 cm、前段为勾子状光滑铜丝,排卵布袋是两张浴巾在侧面用2个拉链缝制而成。
1.8 人工受精
每尾雌鲵亲本排卵完毕,将已检查准备好的精液1~2 mL注入盛卵的容器里,同时加入适量的0.6%的生理盐水,充分搅匀,然后静置3~5 min,即完成人工授精。
1.9 受精卵的孵化
大鲵卵受精后,将受精卵放入避光的孵化车间孵化池进行微流水、控温孵化,水温通过冷水机调节,孵化期间水温控制在17~19℃,24~30 h后受精卵出现二分期可计算受精率,平时每天将未受精卵和胚胎停止发育的坏死卵及时清除,翻动受精卵1~2次。
2 结果与分析
2.1 大鲵亲本室内培育结果
通过空调、地下水和地表水的合理转换,大鲵室内培育池的水温变化在8~23℃,完全能满足大鲵亲本发育对水温的要求。同时,采用地下水与地表水相结合的方式培育大鲵亲本,在大鲵的非原产地能更好地满足大鲵亲本发育对水质的要求。
2.2 催产结果
2.2.1 大鲵精子活力的观察
雄鲵在催产96 h开始每天都观察1次精子的活动情况,发育不好的雄鲵精子在96~216 h镜检基本不动,发育较好的雄鲵精子活力情况有一定的规律。从表1可知,雄鲵的精子活力最好的时间是在催产后168~192 h,1尾好的雄鲵可以配10~20尾雌鲵。
试验观察表明,水温18~20℃雌鲵的最佳效应时间在96~120 h,与雄鲵精子活力最好的时间168~192 h存在差异,这就是大鲵在发育过程中雌雄发育不同的问题,如果采用一般鱼类的催产方法,雌雄大鲵的卵带与精液的最佳效应时间就不一致,从而导致无法获得高的受精率。
2.2.2 雌鲵排卵结果
水温在20~22℃,雌鲵在催产后48~200 h内都有卵带自行排出,多年观察表明,在96~120 h间排出的卵粒受精效果好,提前自行排出的卵粒质量较差,受精能力低,而延迟排出的卵粒成深黄色,无光泽,卵粒过熟,受精率低下。2008—2009年采取卵带自行排出后排卵,雌鲵催产率分别达到63%、66%,受精率分别为28%、35%;2010—2013年,采取在效应时间96~120 h内用勾卵器辅助排卵,催产率在80%以上,受精率在70%以上,明显比卵带自行排出的催产率和受精率都高,具体情况见表2。
3 结论
3.1 雄鲵提前2~3 d催产
水温18~20℃,雄鲵精子活力好的时间为催产后168~192 h,而雌鲵卵带的最佳效应时间为催产后96~120 h,通过雄鲵提前2~3 d催产,能解决雌雄大鲵发育不同步的问题,从而提高受精率。
3.2 勾卵器辅助勾卵是大鲵较好的排卵方式
人工饲养的大鲵由于饵料丰富,活动量小,亲鲵体型较肥,即使是到了效应时间,多数雌鲵都无法自行排出卵带,从而导致催产率和受精率低下。雌性大鲵卵粒的最佳受精时间在催产后96~120 h,根据大鲵卵粒间有卵带相连的特殊性,采取勾卵器自泄殖孔牵引卵带排卵,在最佳排卵时间将卵粒一次性全部排出,进行人工授精,可以在卵粒的最佳效应时间内很好的解决雌鲵卵粒无法及时排出的问题,大大提高了亲本的产卵数量和卵粒的受精率。
参考文献:
[1]李成.几种大鲵繁育模式的比较[J].当代水产, 2013(12):78-79.
[2]李新民.全人工条件下大鲵繁殖生物学初报[J].河北渔业,2007(2):43-45.
(责任编辑:敬廷桃)