毛细管电泳法检测糖化血红蛋白与常见干扰因素的相关性分析

陈建标+江利爱+张玲+罗洁

【摘要】目的：分析毛细管电泳法检测糖化血红蛋白（HbA1c）与常见干扰因素的相关性。方法：选取19例地中海贫血、52例肾功能衰竭、50例服用阿司匹林超过1个月及23例经基因确认为非地中海贫血而血红蛋白毛细管电泳结果为异常峰的受试者为研究对象。采用毛细管蛋白电泳法，离子交换层析法、免疫比浊法测定四组患者HbA1c，采用日本7600-110分析仪检测空腹血糖（FPG）、餐后2h血糖（2hPG），并进行比较。结果：四组患者FPG、2hPG比较，差异无统计学意义（P>0.05）。毛细管电泳法检测地中海贫血及服用阿司匹林超过1个月的患者HbAlc水平结果均明显高于离子交换层析法及免疫比浊法，差异具有统计学意义（P<0.05）；肾功能衰竭组HbAlc三种检测方法比较，差异无统计学意义（P>0.05）；对于经基因确认为非地中海贫血，且血红蛋白毛细管电泳结果为异常峰的正常对照组患者，离子交换层析法及免疫比浊法均正常，与毛细管电泳法差异具有统计学意义（P<0.05）。结论：毛细管电泳法检测HbA1c结果受地中海贫血、服用药物等多种因素影响，临床使用应排除干扰因素提高准确度。

【关键词】糖化血红蛋白；毛细管电泳法；干扰因素

【中图分类号】R331 【文献标志码】 A 【文章编号】1007-8517（2016）08-0058-02

2型糖尿病是一组以血糖水平增高为特征的代谢疾病，患者长期血糖升高不仅影响其生活质量，还会诱发糖尿病肾病等并发症发生，威胁患者生命安全。糖化血红蛋白 A1c（HbA1c）是评价糖尿病血糖控制水平的首选指标，目前，市场上供实验室选用的测定HbA1c的方法至少有30余种，其中毛细管电泳法根据糖化血红蛋白与非糖化血红蛋白所带电荷不同进行分离，一直用于国际临床化学与检验医学联合会发布的一级参考方法[1-2]。但是任何引起血红蛋白数量与质量变化的因素都可干扰 HbA1c 测定，对检测结果产生影响[3]，本研究通过分析毛细管电泳法检测糖化血红蛋白与常见干扰因素的相关性，旨在为其应用提供依据。现报道如下。

1资料与方法

1.1一般资料地中海贫血组：我院2014年1月至2015年12月门诊及住院地中海贫血患者19例，其中男12例，女7例，年龄20～58岁，平均年龄（39.1±4.26）岁，α型10例，β型9例，均符合地中海贫血诊断标准[4]。肾功能衰竭组：肾功能衰竭患者52例，其中男性39例，女性23例，年龄23～64岁，平均年龄（40.5±3.84）岁。阿司匹林组：服用阿司匹林超过1个月的患者50例，其中男性31例，女性19例，年龄18～59岁，平均年龄（40.1±3.97）岁。正常对照组：经基因确认为非地中海贫血，且血红蛋白毛细管电泳结果为异常峰的受试者23例，其中男性14例，女性9例，年龄19～57岁，平均年龄（39.6±3.58）岁。四组一般资料比较，差异无统计学意义（P>0.05）。

1.2方法所有研究对象入组后，于清晨采取空腹肘静脉血3ml。凝血60min（20～25℃）后，离心（4000r/min）取血清，-80℃存储待测。采用法国Sebia CaPilarys毛细管蛋白电泳分析仪，DS-5糖化血红蛋白电泳检测仪（离子交换层析法），Becman Au5400全自动生化仪（免疫比浊法）测定4组HbA1c。HbAlc试剂盒及校准品、质控品均为原装配套。采用日本日立医疗器械有限公司生产的7600-110分析仪检测空腹血糖（FPG）、餐后2h血糖（2hPG）。

1.3统计学处理应用SPSS17.0对实验数据进行处理。正态计量资料采用（均数±标准差）表示，采用ANOVA方差分或者S-N-K检验；计数资料用[例（%）]表示，采用χ 检验或者秩和检验；以P<0.05为差异其有统计学意义。

2结果

2.1四组血糖指标比较四组的FPG、2hPG比较，差异无统计学意义（P>0.05），见表1。

2.2不同方法检测四组血清HbAlc比较毛细管电泳法检测地中海贫血及服用阿司匹林超过1个月的患者HbAlc水平结果均明显高于离子交换层析法及免疫比浊法，差异具有统计学意义（P<0.05）；肾功能衰竭组患者HbAlc三种检测方法比较，差异无统计学意义（P>0.05）；对于经基因确认为非地中海贫血，且血红蛋白毛细管电泳结果为异常峰的正常对照组，离子交换层析法及免疫比浊法均正常，与毛细管电泳法差异具有统计学意义（P<0.05），见表2。

3讨论

2型糖尿病是临床上的常见病和多发病，近年来随着生活水平的提高以及饮食结构的改变，其发病率呈现上升趋势，同时其诱发的急慢性并发症严重影响患者的身心健康和生活质量，且致残、致死率较高[4-5]。HbA1c是红细胞中血红蛋白与葡萄糖的结合产物，与糖尿病慢性并发症的发生和发展密切相关，已被用于糖尿病诊断及病情评估[6]。

目前，HbA1c的常规检测方法有两大类，一类是基于糖化与非糖化血红蛋白所带电荷不同建立的毛细管电泳法及离子交换层析法，另一类是基于糖化与非糖化血红蛋白的结构差异建立的免疫比浊法及亲和层析法等，其中毛细管电泳由于高效率、运行成本低、高选择性等特点被用于HbA1c的检测。但是文献报道[7-8]，毛细管电泳法检测HbA1c容易受多种因素影响，如药物、血红蛋白病等。本研究中毛细管电泳法检测地中海贫血及服用阿司匹林超过1个月的患者HbAlc水平结果均明显高于离子交换层析法及免疫比浊法，差异具有统计学意义（P<0.05），提示地中海贫血、长期服用阿司匹林对毛细管电泳检测HbAlc存在干扰。研究表明，肾功能衰竭患者无论采用何种方法都无法克服干扰因素，本研究中，三种检测方法检测HbAlc比较，差异无统计学意义（P>0.05），进一步证实了文献报道[9]，因此，不宜采用HbA1c来反映体内平均血糖水平，应采用其他指标对血糖进行检测。此外，对于经基因确认为非地中海贫血，且血红蛋白毛细管电泳结果为异常峰的正常对照组，离子交换层析法及免疫比浊法均正常，与毛细管电泳法差异具有统计学意义（P<0.05），提示除了药物及地中海贫血对毛细管电泳检测HbAlc存在干扰外，还存在一些其他因素，如高脂血症、族群及妊娠等[10]，因此建议毛细管电泳与其他技术联合检测HbAlc。

参考文献

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[10]李娅，宋宇，段勇.糖化血红蛋白检测的局限性[J].中华检验医学杂志，2012，35（6）：501-504.

（收稿日期：2016.02.24）