超声龈下刮治同步奥硝唑冲洗治疗牙周炎对牙周组织中骨保护素表达影响的研究

叶鸿

【摘要】 目的：探讨超声龈下刮治同步奥硝唑冲洗对慢性牙周炎患者的治疗效果及对龈沟液（GCF）中骨保护素（OPG）水平的影响。方法：选取2011年4月-2013年10月在本院诊治的136例慢性牙周炎患者，按照随机数字表法将其分为同步治疗组和对照组，每组各68例。同步组采用超声龈下刮治同步奥硝唑冲洗进行治疗，对照组仅行超声龈下刮治治疗。两组患者分别在治疗前、治疗后4周测量茵斑指数（PI）、探诊出血（BOP）、探诊深度（PD）及附着丧失（AL）等牙周指标和GCF中OPG水平，并进行对比。结果：治疗后4周，两组患者的PI、BOP、PD及AL等牙周指标均明显低于治疗前，OPG明显高于治疗前，RANKL和RANKL/OPG均明显低于治疗前，且同步治疗组以上各指标均明显优于对照组，差异均有统计学意义（P<0.05）。结论：超声龈下刮治同步奥硝唑冲洗及超声龈下刮治均能改善慢性牙周炎患者的牙周状况，使GCF中OPG增加，超声龈下刮治同步奥硝唑冲洗的治疗效果更明显。

【关键词】 超声龈下刮治； 甲硝唑； 牙周炎； 龈沟液； 骨保护素

【Abstract】 Objective：To investigate the effect of ultrasonic subgingival scaling and synchronization flushing with Ornidazole in the treatment of chronic periodontitis and it on the influence of osteoprotegerin（OPG） levels in the gingival crevicular fluid（GCF）.Method：136 cases of chronic periodontitis admitted to our hospital from April 2011 to October 2013 were selected and they were divided into the synchronization treatment group and of the control group according to the random number table method，68 cases in each group.The synchronization treatment group was treated with ultrasonic subgingival scaling and synchronization flushing with Ornidazole.The control group was only treated with ultrasonic subgingival scaling.The plaque index（PI），bleeding on probing（BOP），probing depth（PD），attachment loss（AL） and levels of OPG in GCF before treatment，4 weeks after treatment were detected and compared between the two groups.Result：4 weeks after treatment，the periodontal indexes of PI，BOP，PD and AL in the two groups were significantly lower than before treatment，the OPG levels in GCF of the two groups were significantly higher than before treatment，RANKL and RANKL/OPG of the two groups were significantly lower than before treatment，and all above indexes of the synchronization treatment group were significantly better than those of the control group，the differences were statistically significant（P<0.05）.Conclusion：Ultrasonic subgingival scaling and synchronization flushing with Ornidazole and only ultrasonic subgingival scaling all can improve the periodontal status in the patients with chronic periodontitis，increase the level of OPG in GCF.But the effect of ultrasonic subgingival scaling and synchronization flushing with Ornidazole is more obvious.

【Key words】 Ultrasonic subgingival scaling； Ornidazole； Periodontitis； Gingival crevicular fluid；Osteoprotegerin

First-authors address：The Peoples Hospital of Huaiyang County，Huaiyang 466700，China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2016.05.016

牙周炎发病率高，对患者健康的影响大，其治疗方法和发病原因一直以来都是学者们研究的重点。关于牙周炎的起因以及疾病进展机制的研究已经有了较大的进展，但目前为止还没有得出一致的结论[1]。目前广泛被人们认可的机制是前骨细胞分化为骨细胞的过程被核因子KB受体活化子配体（receptor activator for NFkB ligand，RANKL）及核因子kB受体活化子配体受体（receptor activator for NF-kB，RANK）抑制，同时破骨细胞的形成被激活，破骨细胞对骨质的吸收和破坏导致牙齿的骨质被逐渐吸收[2-4]。研究证实，骨保护素（osteoprotegerin，OPG）能够与核因子kB受体活化子配体进行特异性的结合，通过与核因子kB受体活化子配体受体结合促破骨细胞分化，抑制核因子kB受体活化子配体的促进骨质吸收的作用，减少破骨细胞对骨质的吸收[5-7]。慢性牙周炎患者的龈沟液（gingival crevicular fluid，GCF）中OPG明显异常[8]。为了研究龈下刮治同步奥硝唑冲洗对慢性牙周炎患者龈沟液中OPG水平的影响，本研究选取68例患者行龈下刮治同步奥硝唑冲洗治疗，并与仅行龈下刮治的68例患者进行对比分析，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2011年4月-2013年10月在本院诊治的慢性牙周炎患者。纳入标准：（1）确诊为慢性牙周炎中度或重度，每个象限内≥1颗牙探诊出血（bleeding on probing，BOP）（+），探诊深度（probing depth，PD）≥5 mm；（2）≥20岁；（3）患者全身健康状况良好，无严重高血压、心脏病、糖尿病等合并症，女性处于非孕期及哺乳期；（4）未服用过可引起牙龈增生的药物；（5）患者至少1个月内未服用过非甾体类抗炎药或抗生素，半年内未进行过任何牙周治疗。本研究入组患者136例，

其中男57例，女79例；年龄21～71岁，平均（42.57±12.83）岁。将所有患者按照随机数字表法分为同步治疗组和对照组，每组各68例。同步治疗组68例患者中，男29例，女39例；年龄22～71岁，平均（43.36+15.33）岁；对照组68例患者中，男30例，女38例；年龄20～69岁，平均（42.11+13.34）岁。两组患者在性别、年龄等方面比较差异均无统计学意义（P>0.05），具有可比性。

1.2 治疗方法 在治疗前，需要准确、细致地评定牙周支持组织的破坏情况以及全口牙龈的炎症范围和程度。牙周袋较深患者的龈下刮治需要在局麻下进行。龈下刮治需在超声下进行确保将牙石彻底刮除，直到牙齿根面光滑为止。在超声龈下刮治的同时，同步治疗组给予甲硝唑冲洗，刮治结束后需用探针再次进行根面探查，确保根面已光滑坚硬、龈下牙石已经去净。同步治疗组使用甲硝唑冲洗牙周袋，对照组使用双氧水冲洗牙周袋。冲洗完毕后用碘甘油涂布。

1.3 牙周观察指标 两组患者均选取相同部位的牙齿进行观察，同步治疗组受试牙选取BOP（+）、PD>5 mm的牙位。每颗受试牙进行6个位点的探诊，每个位置都按照标准的探诊方法进行探诊，以探诊最深位置的深度数据作为牙周探诊深度数据。所有患者的牙周检查均由高年资副主任以上医生进行，并记录数据。于全口龈上洁治完成后14 d进行牙周检查，并记录数据。对两组患者治疗前的PD、BOP、附着丧失（attachment loss，AL）和菌斑指数（plaque index，PI）进行评估，然后进行龈下刮治同步奥硝唑冲洗及龈下刮治治疗。于治疗1个月后入院复查，同样由高年资副主任以上医生进行牙周指标检查并做记录。

1.4 GCF中OPG水平的测量 分别在治疗前及治疗后4周收集GCF。收集方法为：在进行收集前将拟采集部位的龈上菌斑刮除干净，牙面上贴棉卷进行隔离，并用气枪将棉卷吹干。取牙周试纸分别插入测试牙的远颊、近颊、远舌、近舌等方位的龈沟中进行测试，置入时间为30 s，收集4条试纸被GCF浸湿的部分放入离心管，试管口用锡纸密封后，放置于-20 ℃冰箱中。采用美国R&D公司生产的放射免疫试剂盒进行酶联免疫吸附试验测定GCF中的OPG水平。

1.5 统计学处理 采用SPSS 17.0软件对所得数据进行统计分析，计量资料用（x±s）表示，比较采用t检验，以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组治疗前后牙周指标比较 治疗4周后，两组患者的牙周指标均明显低于治疗前，且同步治疗组的各项牙周指标均明显优于对照组，差异均有统计学意义（P<0.05），见表1。

2.2 两组患者GCF中OPG比较 治疗后4周，两组患者GCF中OPG均明显高于治疗前，RANKL和RANKL/OPG均明显低于治疗前，且同步治疗组以上各指标均明显优于对照组，差异均有统计学意义（P<0.05），见表2。

3 讨论

慢性牙周炎会导致牙齿的骨质破坏，其发生机制相对复杂，有研究显示，慢性牙周炎导致骨质破坏的原因可能跟牙周炎免疫细胞分泌的细胞因子有关，慢性牙周炎免疫细胞可分泌肿瘤坏死因子（tumor necrosis factor，TNF）、自介素-1（interleukin-1，IL-1）、IL-6、IL-17和肝细胞生长因子等多种细胞因子，使牙周炎患者GCF中的以上细胞因子增多，正是牙周组织中这些细胞因子的异常表达造成了牙槽骨吸收和破坏[9]。

RANKL是一种跨膜蛋白，主要作用是促进破骨细胞的产生，其主要在肺组织、胸腺组织和淋巴结组织中大量表达[10]。其对破骨细胞的调节作用是通过与其受体RANK结合完成的，它们通过调节破骨细胞来调节骨骼的新陈代谢[11]。研究显示，RANKL的激活抗体和重组体都能够与细胞膜上RANK的胞外部分结合从而激活RANK，进而促进破骨细胞的生成。研究显示，敲除小鼠的RANKL或RANK基因会导致小鼠出现严重的牙齿萌出障碍和骨硬化病，原因是RANKL或RANK基因的缺失导致小鼠破骨细胞生成障碍，造成小鼠骨骼的代谢发生障碍。由此可知RANKL和RANK是破骨细胞形成中必不可少的[12]。此外，研究还显示，牙周炎导致牙周炎性细胞因子增加，牙周炎性细胞因子的增加会造成RANKL表达的明显上调，使破骨细胞活性增加，破骨细胞促进骨质的吸收，最终出现骨吸收明显增加[13]。近期发现的OPG是TNF受体超家族成员，高表达于成年人的甲状腺、气管、肾上腺、脑、肺、淋巴结、肝、肾、睾丸、胸腺、脾、卵巢、小肠、前列腺、骨髓中[14]。研究显示，OPG能够与RANKL结合，竞争性地阻断RANK与RANKL的结合，阻断其促进破骨细胞形成的过程，从而使骨质的破坏和吸收减少。遗传学研究显示，敲除小鼠的OPG基因会导致破骨细胞的活性和数量的明显增加，最终表现出骨质疏松症的症状[15]。说明OPG在抑制破骨细胞活性方面有着重大的作用。本研究显示，患者GCF中RANKL/OPG的比值越大骨质破坏吸收越严重。主要原因为当患者发生牙周炎时，龈沟内的炎症细胞明显增加，炎性反应增强，细胞分泌的炎性细胞因子明显增加，明显增加的炎性细胞因子导致RANKL的表达明显上升，导致破骨细胞生成增加，破骨细胞导致牙周骨质的破坏和吸收[16]。

本研究通过对牙周炎患者采取不同的治疗手段，来探讨不同治疗方法对牙周炎的治疗效果及对牙周组织中骨保护素的影响。结果发现，通过对牙周炎的机械治疗可以改善牙周炎患者的茵斑指数（PI）、探诊出血（BOP）、探诊深度（PD）及附着丧失（AL）等牙周指标，同时可以使牙周组织中骨保护素升高。以上差异均有统计学意义（P<0.05）。其中采用超声龈下刮治同步奥硝唑冲洗组患者的治疗效果明显优于仅行超声龈下刮治组患者。其原因为超声龈下刮治同步奥硝唑冲洗能够在有效破坏致病菌滋生环境的同时直接杀死致病菌，使龈下的致病菌大大地减少，致病菌对牙周组织的刺激减小，牙周的炎性反应明显减轻，牙周组织分泌的炎性细胞因子明显减少，这也导致了在进行龈下刮治同步奥硝唑冲洗术后，GCF中OPG的量增加，RANKL/OPG的比值降低。

综上所述，超声龈下刮治同步奥硝唑冲洗不仅能够有效地改善慢性牙周炎患者的牙周状况，而且可以使GCF中的OPG的量增加，有效地保护牙周的骨质。

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（收稿日期：2015-08-12） （本文编辑：欧丽）