抗核抗体、抗—ds—DNA、抗—sm、抗核小体联合检测对SLE的诊断价值

许鸿昌

[摘要] 目的 评价分析联合检测抗核抗体（ANA）、抗双链DNA抗体（抗-ds-DNA）及抗-sm、抗核小体对系统性红斑狼疮（SLE）的诊断价值。 方法 选取2011年2月～2013年12月在我院门诊和住院的119例自身免疫疾病患者作为研究对象，其中67例患者为系统性红斑狼疮，作为SLE组，另52例患者为非系统性红斑狼疮，作为非SLE组；同时另选取50例健康体检者作为对照组。三组研究对象均分别进行ANA、抗ds-DNA、抗-sm、抗核小体检测，对其检测结果进行分析。 结果 ANA、抗-ds-DNA、抗-sm、抗核小体抗体在SLE组中的敏感性分别为83.5%、43.2%、52.2%、47.7%，明显高于非SLE组；敏感性由83.5% 提高到94.0%，差异有统计学意义（P<0.05）。结论 ANA、抗-ds-DNA及抗-sm、抗核小体抗体的联合检测在SLE诊断中有良好的互补作用，可明显提高敏感性，避免漏检；对SLE的早期诊断、疗效检测有显著的临床应用价值。

[关键词] 抗核抗体（ANA）；抗双链DNA抗体（抗ds-DNA）；抗-sm；抗核小体抗体；系统性红斑狼疮（SLE）

[中图分类号] R593.2 [文献标识码] B [文章编号] 1673-9701（2016）07-0091-03

[Abstract] Objective To evaluate and analyze the diagnostic value of antinuclear antibody（ANA）， anti-ds DNA， anti-sm， and anti-nucleosome combined detection in SLE. Methods 119 patients with autoimmune disease treated in our hospital from February 2011 to December 2013 were selected， of which 67 patients with SLE were divided into the SLE group， another 52 non-SLE patients were divided into the non-SLE group. 50 healthy volunteers were also enrolled as the control group. ANA， anti-ds DNA， anto-sm and anti-nucleosome detection were conducted on patients of three groups and the results were analyzed. Results The sensibility of ANA， anti-ds-DNA， anto-sm and anti-nucleosome antibody in the SLE group were 83.5%， 43.2%， 52.2%， and 47.7%， significantly higher than those in the non-SLE group（P<0.05）. The detection sensitivity was enhanced from 83.5% to 94.0% with significant difference （P<0.05）. Conclusion Combined detection of ANA， anti-ds-DNA， anto-sm and anti-nucleosome antibody shows favorable supplementary effect in diagnosis of SLE， which can significantly enhance the sensitivity of detection and avoid probability of missed detection， indicating remarkable clinical application value in early diagnosis and efficacy assessment of SLE.

[Key words] Antinuclear antibodies； Anti-ds-DNA； Anti-sm； Anti-nucleosome antibody； Systemic lupus erythematosus

系统性红斑狼疮（systemic lupus erythematosus，SLE）是风湿免疫科较为常见的一种疾病，也叫全身性红斑狼疮或红斑性狼疮，是一种慢性自身免疫性炎症结缔组织疾病，以多系统器官病变累及多脏器，且血清中常伴有多种自身抗体，由于抗体作用靶抗原的不同，患者血清中出现自身抗体如抗核抗体（ANA）、抗双链DNA抗体（抗-ds-DNA）、抗-sm、抗核小体抗体（AnuA）等，在SLE患者血清中可单独、或多个同时出现。这些抗体对SLE的诊断有很好的特异性，但敏感性各不相同，若单一检测会对SLE有漏检。有文献[1，2]报道用几种特异性抗体联合检测可提高SLE患者自身抗体的阳性率，但选择的抗体各有不同。本研究分析了67例SLE患者抗核抗体（ANA）、抗双链DNA抗体（抗-ds-DNA）、抗-sm、抗核小体抗体的检测结果，旨在探讨联合检测对系统性红斑狼疮SLE的诊断价值，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 临床资料

选取2011年2月～2013年12月我院住院和门诊患者及健康体检者。SLE组包括67例系统性红斑狼疮（SLE）患者，男12例，女55例，年龄19～76岁，平均（50.5±15.8）岁。SLE诊断均符合2009 SLICC修改的ACR系统性红斑狼疮分类标准[3]。非SLE组：确诊的52例自身免疫性疾病，包括9例干燥综合征、6例多发性硬化症、15例类风湿性关节炎、2例强直性脊柱炎、5例系统性血管炎、12例混合性结缔组织病和3例皮肌炎，年龄17～75岁，平均（50.9±14.9）岁。诊断均符合各自相关诊断标准[4]。正常健康对照组50例，男12例，女38例；年龄19～78岁，平均（51.3±15.4）岁。

1.2 试剂

抗核抗体（间接免疫荧光）、抗-ds-DNA、抗-sm、抗核小体（免疫印迹法）检测试剂，均由欧盟（杭州）医学实验室有限公司提供。

1.3 仪器

Lak-601型荧光显微镜，EUROBLotMasterII全自动免疫分析仪，Canosan扫描仪。

1.4 实验方法

1.4.1 标本采集 清晨空腹采集静脉血3 mL，静置30 min后，3000 r/min速率离心10 min分离血清，对血清标本分别标号，保存于-20℃待检。

1.4.2 测试 对血清标号，抗核抗体采用间接免疫荧光法检测（抗核抗体ANA荧光强度≥1∶100为阳性，荧光强度≤1∶100为阴性）。抗-ds-DNA、抗-sm、抗核小体采用免疫印迹法检测，操作采用欧盟提供的EUROBLotMasterII全自动免疫分析仪，为避免人眼判读误差，采用Canosan扫描仪判读结果，以显色大于一个+为阳性。

1.4.3 敏感性及特异性 敏感性=真阳性/病例组=真阳性/（真阳性+假阴性）=SLE组试验阳性/（SLE试验阳性+试验阴性）；特异性=真阴性/健康对照组=真阴性/（真阴性+假阳性）=（非SLE组+健康对照组）试验阴性/（试验阴性+试验假阳性）。

1.5 统计学分析

计数资料采用χ2检验，P<0.05为差异有统计学意义，根据计算所得χ2值查χ2界值表，各组敏感率χ2检验中P<0.01，差异有高度统计学意义，而各组特异性χ2检验中P>0.05则差异无统计学意义。

2 结果

2.1 抗核抗体、抗-ds-DNA、抗-sm、抗核小体对疾病的检测意义

67例SLE患者抗核抗体、抗-ds-DNA、抗-sm、抗核小体抗体的敏感性分别为83.5%、43.2%、52.2%、47.7%，按照行列表χ2检验，将SLE患者组与非SLE组和健康对照组做统计学分析，χ2=10.60，P<0.01，差异有高度统计学意义，特异性分别为90.2%、98.0%、97.1%、98.0%，按照行列表χ2检验，将SLE患者组与非SLE组和健康对照组的特异性做统计学分析，χ2=2.77，P>0.05。见表1。

2.2 抗核抗体联合抗-ds-DNA、抗-sm、抗核小体检测敏感性比较

抗核抗体检测SLE的敏感性为83.5%，联合抗-ds-DNA、抗-sm、抗核小体检测，特异性无明显改变，敏感性明显高于单一检测，达94%，按照行列表χ2检验，将单独检测抗核抗体与各联合检测的敏感性做统计学分析，χ2=13.10，P<0.01，差异有高度统计学意义，后者的敏感性更高，见表2。

3 讨论

系统性红斑狼疮（systemic lupus erythematosus （SLE）是风湿免疫科较为常见的一种疾病，也称全身性红斑狼疮或红斑性狼疮；发病原因至今尚未明确，为临床上有较高发病率的风湿免疫科疾病，是一种慢性自身免疫性炎症结缔组织疾病，以多系统器官病变累及多脏器，并且血清中常伴有多种自身抗体出现的自身免疫性炎症性疾病，该病患者多为年轻女性，年龄在20～40岁之间，老年人群及儿童也可发病。患者多伴有皮疹、红斑、关节痛、关节炎等症状，不仅会给患者的健康造成影响，而且会对患者的心理健康造成一定程度上影响。由于临床症状多不典型，多通过实验室检测自身抗体来帮助诊断。目前诊断系统性红斑狼疮实验室指标主要有抗核抗体、抗-ds-DNA、抗-sm、抗核小体等。

抗核抗体靶抗原分布于整个细胞，包括细胞核、细胞骨架、细胞浆、细胞分裂期，是指细胞内所有的抗原成分抗体的总称。抗核抗体检测在诊断SLE有较高的敏感性（90.2%）。在干燥综合征、多发性硬化症、类风湿关节炎、混合性结缔组织病等多种自身免疫病中均可出现阳性反应，少数正常人也有弱阳性反应。表1显示特异性较差，本研究中混合性结缔组织病4例、类风湿性关节炎3例、干燥综合征2例、健康对照组1例、均有阳性反应，不能作为单独诊断SLE的标准，抗核抗体只能作为自身免疫性疾病的过筛实验[5，6]。抗核小体抗体（anti-nucleosome antibody，AnuA），是真核细胞的亚单位，在SLE中辅助T淋巴细胞识别自身抗原，产生特异性自身抗体，是多种自身抗体产生的根源。有报道，AnuA和抗-ds-DNA与SLE的疾病活动性相关，特别是与狼疮肾损伤有密切相关，可以作为病情观察的指标[7]，本研究AnuA抗体在67例SLE中敏感性为47.7%，特异性为98.0%，与文献[7，8]报道结果基本一致。

抗-sm抗体对SLE有辅助诊断意义，但与疾病的活动无关，有报道抗-sm抗体是SLE的标志性抗体之一[9]。对SLE较高的特异性，活动期或非活动期抗-sm均可呈现阳性反应，有报道抗-sm抗体阳性是发生狼疮性肾炎的特异性指标之一[10]。本研究抗-sm阳性率为52.2%，但在健康组没有一例阳性反应特异性为100%，与疾病对照组特异性97.1%，是诊断SLE的理想指标。

抗-ds-DNA对靶抗原的识别位点是双螺旋脱氧核糖核酸骨架上，对SLE具有高度的特异性[11]，并与临床表现密切相关。是目前公认诊断SLE的标志性抗体之一[12]。且有报道：抗-ds-DNA抗体滴度与SLE的活动性呈正相关[13]，定期监测抗-ds-DNA抗体，有助于观察SLE患者肾损伤的程度，可作为狼疮肾病情的观察指标[14]。

抗核抗体、抗-ds-DNA、抗-sm、抗核小体检测在自身免疫性疾病中有重要的价值，本文试验显示抗核抗体（ANA）可见于多种自身免疫病，在SLE患者血清中，ANA在SLE中的敏感性为83.5%，抗-ds-DNA中的敏感性为43.2%，抗-sm抗体在SLE中的敏感性为52.2%、抗核小体在SLE中的敏感性为47.7%。在SLE诊断中敏感性ANA≥抗-sm≥抗核小体≥抗-ds-DNA抗体，特异性抗-ds-DNA≥抗核小体抗体≥抗-sm≥ANA。有时ANA阴性而抗-ds-DNA、抗-sm、抗核小体则会有阳性出现，而与抗-ds-DNA、抗-sm、抗核小体联合检测，单独检测则会出现漏检和误检，同时还可对SLE患者进行有效的病情监测，以减少并发症[15]。若ANA、抗-ds-DNA及抗-sm、抗核小体抗体联合检测，敏感性可达94.0%。联合检测特异性比较，无明显差异（P>0.05），而单一抗体检测敏感性比较，有显著差异（P<0.01）。

综上所述，SLE患者血清中可同时出现多种自身抗体，在患者血清中可单独或同时出现，若只检测一种则会出现漏诊或误诊，若联合检测ANA、抗-ds-DNA及抗-sm、抗核小体抗体，可明显提高SLE诊断的敏感性，降低漏检率，且上述检测方法联合检测可发挥良好的互补作用，对提高SLE的早期诊断、疗效监测有良好的应用价值。

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（收稿日期：2015-12-17）