呋喃它酮代谢物时间分辨荧光免疫分析法的建立与应用
2016-05-14 07:07邓丽华戴尽波徐振林杨金易王弘肖治理雷红涛孙远明沈玉栋
分析化学 2016年8期
邓丽华 戴尽波 徐振林 杨金易 王弘 肖治理 雷红涛 孙远明 沈玉栋
摘 要 建立了Eu3+标记的间接竞争时间分辨荧光免疫分析法 （Indirect competitive time-resolved fluoroimmunoassay ， ic-TRFIA） 用于鱼肉样品中呋喃它酮代谢物AMOZ的检测。通过单因素实验考察了包被抗原浓度、抗体稀释倍数、竞争反应时间等参数对方法灵敏度的影响。结果表明，ic-TRFIA的最佳反应条件为：包被抗原浓度为0.25 μg/mL，抗体稀释5×104倍，最佳竞争时间为50 min。在优化的条件下，方法的检出限（LOD， IC10）为0.01 ng/mL，半抑制浓度（IC50）为0.26 ng/mL，线性范围（IC20～IC80）为0.025～2.83 ng/mL，对鱼样中AMOZ回收率在78.0%～86.0%之间，各样品变异系数均小于15%，与HPLC-MS/MS对比检测结果显示相关性良好。本方法灵敏度高、特异性好，能够满足实际样品的检测需求。
关键词 呋喃它酮代谢物AMOZ；时间分辨荧光免疫分析；铕标二抗
