XE-2100血细胞分析仪显微镜复检规则的建立与应用评价

宋军　王丽芳　何旭　高羽高　刘晓　汪冉

050000　石家庄市，河北医科大学第二医院检验科



·论著·

XE-2100血细胞分析仪显微镜复检规则的建立与应用评价

宋军王丽芳何旭高羽高刘晓汪冉

050000石家庄市，河北医科大学第二医院检验科

【摘要】目的建立适合本实验室Sysmex XE-2100全自动血细胞分析仪的复检规则，并进行验证评价。方法参照国际血液学标准化委员会(ICSH)推荐的41条血细胞复检规则和国内XE-2100血液分析仪复检标准制定协作组推荐的23条复检规则，制定适用于本实验室的复检规则，并在规则指导下通过对1 531份标本检测结果和显微镜复检结果进行数据分析，即收集仪器无报警信息和有报警信息的标本1 531例，进行涂片、瑞吉氏染色并显微镜检，分析仪器与镜检一致性、准确度、特异性。评价应用复检规则的假阴性率。结果阳性符合率为98.7%，阴性符合率为99.5%，敏感度为98.0%，特异度为99.7%，准确度为97.7%。假阴性率为2.0%。该规则的复检率为19.8%。结论建立的复检规则敏感度高、特异性强，假阴性率<5%，能有效地筛选异常标本，提高工作效率，为临床医生的诊断治疗提供有价值的信息。

【关键词】血细胞分析仪;复检规则;镜检

目前，全自动血细胞分析仪在医院中广泛应用，但血常规的仪器检测不能完全取代显微镜检测，只能作为临床中的筛选工具。国际血液学复检专家组推荐了41条自动CBC和DC复检规则，但在临床实际应用中复检率太高。各实验室需制定适合本实验室的显微镜复检规则，既保证血常规检测的准确性，又能提高检测速率。为此，根据本实验室的具体情况和XE-2100的性能特点及该仪器异常细胞报警的情况，参考国内外血常规复检规则[1-3]，制定适合本实验室的显微镜复检规则，并对血细胞分析仪提供的数据与显微镜镜检结果的一致性进行评估，评价制定的复检规则。

1材料与方法

1.1材料2015年4月5日～6月29日共收集1 531例标本，均来自我院住院患者，用美国BD公司生产的一次性使用真空采血管(抗凝剂为乙二胺四乙酸二钾，EDTA-K2)采集患者静脉血抗凝标本。每例标本在测定时应首先观察标本情况，标本如果出现凝集、溶血、黄疸、乳糜，必要时应重新采集。

1.2仪器XE-2100五分类血细胞分析仪及其原装配套试剂，由日本Sysmex公司提供。该仪器采用Sysmex公司提供的高、中2种配套e-CHECK质控品进行室内质控，并参加卫生部、河北省临床检验中心的室间质评活动。血涂片显微镜分析应用Olympus光学显微镜，血涂片用瑞氏-吉姆萨复合染液染色，染液按照《全国临床检验操作规程》[4]第3版的要求进行配制。

1.3实验方法每日开机后，首先用日本Sysmex公司提供的全血质控品进行室内质控检测，保证仪器在最佳检测状态。从每天的临床标本中随机抽取20～25份用EDTA-K2抗凝的新鲜静脉血2 ml，标本经XE-2100全自动血细胞分析仪检测后，2 h内进行推片，每份标本制备 2 张血涂片，并进行编号及瑞氏-姬姆萨染色。由 2 名具有细胞形态学经验的工作人员，按《全国临床检验操作规程操作》规定(第3版)，用双盲法，在油镜下将200个白细胞分类，同时观察各类细胞形态并进行白细胞、血小板数量的估计，取 2 人的平均值为最终结果。血涂片阳性判断标准参照全国血液学复检专家小组提出的 12 条血细胞自动计数复检标准执行[5]：(1)红细胞明显大小不等(细胞大小相差1倍以上)； 中空淡染(>1/2淡染区的红细胞>30%)；(2)巨大血小板>15%；(3)可见血小板聚集；(4)Dohle小体粒细胞>10%；(5)含中毒颗粒的中性粒细胞>10%；(6)空泡变性粒细胞>10%；(7)原始和幼稚细胞≥ 1%； (8)早幼粒细胞和中幼粒细胞≥ 1%；(9)晚幼粒细胞>2%；(10) 异型淋巴细胞>5%；(11)NRBC≥1%；(12)浆细胞≥1%。

1.4复检规则制定参照国际血液学实验室血细胞复检规则，针对本实验室情况，结合Sysmex XE-2100五分类血细胞分析仪的性能制定出的血涂片复检规则(对于血液病患者只适合于初次检验)。见表1。

1.5复检规则评价标准标本经XE-2100血细胞分析仪检查后，符合其中任一项复检规则即为复检规则

表1　自定复检规则

的阳性标本；血涂片镜检阳性标本即为人工镜检阳性标本。以人工镜检为金标准，真阳性为仪器及镜检结果均阳性；假阳性为仪器结果阳性, 镜检结果阴性；真阴性为仪器及镜检结果均阴性；假阴性为仪器结果阴性,镜检结果为阳性。计算真阳性、假阳性、真阴性、假阴性例数，进而分析仪器与镜检一致性、准确度、特异性。评价应用复检规则的假阴性率。假阴性率=假阴性例数/(真阳性例数+假阴性例数)×100%。

2结果

2.1仪器检测与显微镜镜检结果比较1 531份标本经XE-2100全自动血细胞分析仪检查后符合复检规则阳性标本303份，复检率为19.8%(303/1 531)。根据本室自定的复检规则复检后真阳性率为98.0%，假阳性率为0.33%，真阴性率为99.7%，假阴性率为2.0%。XE-2100全自动血细胞分析仪对异常的血液标符本检出能力的有关合率分别为，敏感度98.0%，特异度99.7%，准确度97.7%。见表2。

2.2符合复检规则的标本显微镜复查分析在303份符合复检规则的标本中，血小板计数减少复检阳性率最高52.1%，其次为白细胞计数异常复检阳性率为 41.6%。见表3。

表2　1 531份标本仪器检测结果与血涂片显微镜镜检结果比较　例

表3　303份符合复检规则的标本显微镜复查分析

3讨论

血细胞分析仪应用至今，分析过程已完全自动化，但由于细胞形态的多变性，仪器仍然不能完全识别，在形态学检查时还只能作为一种筛查手段， 正因如此国内外许多组织机构都反复强调复检的重要性[6-8]。但同时复检规则的制定又要考虑临床标本量，不能过度增大工作人员的工作量，这就对仪器复检规则制定的合理性提出较高要求。复检规则的制定需基于如下原则：(1)复检尽可能包含仪器的所有参数及形态学特征。(2)保证筛选质量，病理细胞不漏检的同时尽量降低复检率。(3)假阴性作为重要指标，要求具有诊断意义的参数不能出现假阴性，其他参数的假阴性率不大于5．0%(国际血液学复审协作组的规定)[9]。(4)在假阴性率低的前提下降低假阳性率。

本研究结果表明，Sysmex XE-2100 全自动血细胞分析仪虽然能对异常血液标本进行报警，但是存在一定的假阴性和假阳性。本科室制定的复检规则，通过对1 531份标本的分析比对，假阴性率为2.0%，符合国际血液学复审组专家组规定。复检率为19.8%，符合中国血细胞复检协作组规定复检率[9]，略低于其他文献报道[10-12]，这就保证了工作人员的工作量适中。进一步分析可见，在触发复检规则的各种异常提示中，血小板计数减少阳性率最高(52.1%)。分析原因可能是血液中如果存在巨大血小板造成假性降低，或者由于部分患者血液因为应用EDTA-K2抗凝剂造成的血小板假性凝聚等都会造成血小板计数减少，因此血涂片复检对于血小板显得尤为重要。

本结果显示，本室制定的复检规则在保证一定复检率的基础上，假阴性率低及假阳性率均较低，符合国家相关规定，可以应用于临床。考虑到本科室门诊及病房血液分析仪机型不同，我们也采用门诊标本在相应机型上检测后应用本规则验证复检率及假阴性率，均符合相应规定(数据未显示)。

规则的制定并非一劳永逸，为保证血液分析结果的准确性[13-15]，随着日常标本检测量的增多，必然要动态进行规则的调整和优化，以便为临床提供真实、客观的检验报告。

参考文献

1中华医学会检验分会全国血液学复检专家小组，中华检验医学杂志编辑委员会．全国血液学复检专家小组工作会议纪要暨血细胞自动计数复检标准释义.中华检验医学杂志，2007，30: 380-382．

2张丽霞，陆琳，刘健，等． LH750 血液分析仪白细胞分类结果异常的分析．检验医学与临床，2012，9: 2401-2402．

3Yue J,Cong Y,Wang C,et al.Application and development of review criteria on Sysmex XT-2100 in Chinese at a large third-grade class-A hospital. Clin Lab,2013,59:789-794.

4叶应妩，王山，申子瑜，等主编． 全国临床检验操作规程.第3版．南京: 东南大学出版社，2006.132-137．

5中华医学会检验分会全国血液学复检专家小组，中华检验医学杂志编辑委员会. 全国血液学复检专家小组工作会议纪要暨血细胞自动计数复检标准释义. 中华检验医学杂志,2007,30: 380-382.

6Bames PW， McFadden SL， Machin SL， et al． The international consensus group for hematology review： suggested criteria for action following automated CBC and WBC differential analysis. Lab Hematol,2005,11: 83-90．

7Roussel M,Bruce DH, Fest T.Toward a reference method for leukocyte differential counts in blood:comparison of three flow cytometric candidate methods.Cytometry Part,2012,81:973-982.

8丛玉隆．血细胞分析仪形态学分析技术与镜检筛选．中华检验医学杂志，2014,37: 5-8.

9丛玉隆，王昌富，乐家新． 血细胞自动化分析后血涂片复审标准制定的原则与步骤.中华检验医学杂志，2008，31: 729-732．

10番云华，郭翀，李轶勋. 全自动血液分析仪复检规则应用探讨. 国际检验医学杂志,2015,36: 1562-1564.

11陈亚芳，毛颖华. 血细胞分析复检规则的建立及其应用. 国际检验医学杂志,2015,36: 1297-1298.

12董美云，马彩燕，洪亚明，等.Beckman-Coulter LH750 全自动血细胞分析仪显微镜复检规则的制定及分析. 中国卫生检验杂志,2015,25: 691-693.

13洪骏，张薇，戴雯，等．Sysmex HST302全自动血液分析仪复检规则的建立．临床检验杂志，2012,30: 564-566.

14朱建未，朱芳．血液分析仪复检规则的建立和临床应用. 山东医药，2012,52: 105-106.

15王月芳，江咏梅，张鸽，等．妇儿专科医院血液分析复检规则的建立及验证．检验医学,2013,28:296-300.

(收稿日期：2015-12-18)

【中图分类号】R 115

【文献标识码】A

【文章编号】1002-7386(2016)09-1372-03

通讯作者：王丽芳,050000石家庄市，河北医科大学第二医院检验科;

doi:10.3969/j.issn.1002-7386.2016.09.029

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