免疫组化检测子宫内膜腺癌促性腺激素释放激素受体表达的临床价值

吕松林南阳市第二人民医院核医学科，河南南阳　473000



免疫组化检测子宫内膜腺癌促性腺激素释放激素受体表达的临床价值

吕松林
南阳市第二人民医院核医学科，河南南阳473000

[摘要]目的研究免疫组化检测子宫内膜腺癌促性腺激素释放激素受体表达的临床价值。方法随机选择2014年1—12月来该院就诊的30例子宫内膜腺癌患者作为观察组，并选择同一时期来该院体检健康合格者40例作为对照组，采用免疫组化法检测促性腺激素释放激素受体在两组研究对象中的表达情况，分析其临床价值。结果对照组中促性腺激素释放激素阳性表达率为22.50%，显著低于观察组的43.33%，差异有统计学意义（P＜0.05）。对照组增生期GnRH-R mRNA阳性表达率与对照组分泌期阳性表达率比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。结论GnRH-R在子宫内膜腺癌细胞中显著增高，GnRH参与子宫内膜细胞癌变过程，对于诊断子宫内膜腺癌具有较高参考价值。

[关键词]子宫内膜腺癌；促性腺激素释放激素受体；免疫组化法

子宫内膜腺癌是女性生殖道三大恶性肿瘤之一，发病率高且有上升趋势[1]。促性腺激素释放激素（GnRH）是下丘脑分泌产生的神经激素，通过与相应受体结合调节垂体前叶促性腺激素释放。近年来有研究显示[2]，GnRH不仅与肝癌肿瘤的分化程度有关，促性腺激素释放激素受体（GnRH-R）与乳腺癌、卵巢上皮性癌等性激素依赖性恶性肿瘤组织也有高亲和力表达。该研究选择2014年1—12月到该院就诊或体检的70例研究对象，采用免疫组化法检测他们的GnRH-R阳性表达率，研究GnRH-R对于诊断子宫内膜腺癌的临床应用价值，现报道如下。

1　资料与方法

1.1一般资料

随机选择2014年1—12月来该院就诊的30例子宫内膜腺癌患者作为观察组，并选择同一时期来该院体检健康合格者40例作为对照组。观察组年龄39～67岁，平均（55.2±7.4）岁。对照组年龄37～69岁，平均（54.8±8.0）岁。所有研究对象均了解该研究内容且签署了知情同意书，两组研究对象在性别、年龄等基本病历资料上比较，差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。

1.2方法

严格无菌操作将标本采集后一部分放入液氮中保存，一部分用10%甲醛固定，石蜡包埋，5 um连续切片备用。其中正常子宫内膜组织中处于增生期的19例，分泌期21例。按Trizol一步法提取组织样品总RNA，按反转录试剂盒说明进行RT反应，将RT产物保存与-20℃备用。将洗净的子宫内膜标本剪成1 mm×1 mm×1 mm小块，加入3倍体积左右的胶原酶溶液，在37℃、5%CO2暖箱内消化30～60 min，将得到的细胞悬液移入离心管内，清洗后离心3次，取沉淀接种到培养瓶，加DMEM培养基,在37℃、5%CO2暖箱内培养，24 h后去悬浮，加入新培养基继续培养，2～3 d后换液，在显微镜下观察细胞形态。培养细胞传代于内置盖玻片的六孔板，待细胞贴壁达70%，终止培养，倒掉培养基，加入95%酒精固定，用免疫细胞化学法鉴定培养细胞，同时进行免疫细胞化学检测。免疫组化以出现棕黄色细颗粒状物质为阳性。

1.3观察指标

比较两组GnRH-R mRNA表达情况。

1.4统计方法

选用SPSS19.0统计学软件对研究数据进行分析和处理，计数资料采取率（%）表示，组间对比进行χ2检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2　结果

2.1两组GnRH-R mRNA表达情况比较

正常子宫内膜和子宫内膜癌组织中GnRH-R mRNA阳性表达物质均位于细胞质，细胞核均呈阴性。正常子宫内膜阳性表达率为22.50%[（5+4）/40]。见表1。

表1　两组GnRH-R mRNA表达情况比较[n（%）]

3　讨论

GnRH是下丘脑垂体性腺轴的重要信息分子，含10个氨基酸肽类激素，GnRH-R由氨基酸残基组成，含7个跨膜结构域，属G蛋白偶联受体[3-4]，GnRH与GnRHR结合，促进促性腺激素——卵泡刺激素（FSH）和黄体生成素（LH）合成与分泌，维持生殖系统功能稳定。

该研究中，正常子宫内膜增生期GnRH-R mRNA阳性表达率与正常子宫内膜分泌期阳性表达率比较，差异无统计学意义（P＞0.05），这与肖楠[5]等人的研究结果一致，我们认为这可能是因为子宫内膜组织中的GnRH-R参与了除激素调节以外的其他作用所致，而与子宫内膜的周期性变化无直接关系。另外正常子宫内膜增生期和分泌期阳性表达率分别高达26.32%和19.05%，差异无统计学意义（P＞0.05），这提示我们正常子宫内膜组织中GnRH-R mRNA阳性表达率较高，这个数据略高于以往文献报道水平[6-7]，这可能是因该研究样本量少的缘故。此外，该研究中正常子宫内膜组织GnRH-R mRNA阳性表达率显著低于子宫内膜腺癌组织GnRH-R mRNA阳性表达率，差异有统计学意义（P＜0.05）。这表明子宫内膜细胞癌变可使细胞表面GnRHR显著增加，GnRH和GnRH-R了参与子宫内膜腺癌的凋亡过程，GnRH-R对于诊断子宫内膜腺癌具有较高的参考价值。但也有文献报道正常子宫内膜组织与子宫内膜腺癌组织中GnRH-R的阳性表达率比较，差异无统计学意义(P＞0.05)[8]，这可能是由于正常子宫内膜组织中GnRH-R具有雌激素功能，与GnRH结合后，引起子宫内膜增生所致，另外也不排除统计学结果偏差的原因。

综上，GnRH和GnRH-R参与了子宫内膜腺癌的病变过程，GnRH-R在子宫内膜腺癌细胞中阳性表达率显著增高，可作为临床诊断子宫内膜癌的重要参考依据。

[参考文献]

[1]马永涛,冯思良,王晨宏,等.促性腺激素释放激素类似物-紫杉醇靶向抗肿瘤缀合物的合成及评价[J].高等学校化学学报,2014,10(9):1896-1900.

[2]李明珠,赵丽君,魏丽惠,等.促性腺激素释放激素及其类似物在女性生殖道肿瘤中的研究进展[J].现代妇产科进展, 2015,2(6):472-474.

[3]赵琳,范新,汤晓晖,等.促性腺激素释放激素拮抗剂在诱导HEC-1A子宫内膜癌细胞株生长抑制中MAPK的活性[J].中华临床医师杂志:电子版,2011,5(5):1366-1370.

[4]吕莉.子宫内膜腺癌诊断中免疫组化技术的应用分析[J].中国医药指南,2015,12(17):179-179.

[5]肖楠,赵华,殷莉,等.GnRHR-Ⅱ在人类子宫内膜的表达[J].华中科技大学学报:医学版,2015,44(3):306-309.

[6]谢凤云,谢梅青.GnRH受体在人类子宫内膜的表达及意义[J].海南医学,2012,23(7):114-116.

[7]汪丽萍,乔娟,李海叶,等.16例早期子宫内膜癌患者保留生育功能的疗效观察[J].临床肿瘤学杂志,2014,13(2):164-167.

[8]高江曼,于洋,乔杰,等.促性腺激素释放激素在女性生殖系统的分布与作用[J].生殖与避孕,2013,33(5):338-342,359.

Clinical Value of Immunohistochemical in Detecting Expression of Gonadotropin Releasing Hormone Receptors in Endometrial Adenocarcinoma

LV Song-lin
Nuclear medicine Department, Nanyang Second People's Hospital, Nanyang, Henan Province, 473000 China

[Abstract]Objective To research the clinical value of immunohistochemical in detecting expression of gonadotropin releasing hormone receptors in endometrial adenocarcinoma. Methods 30 cases of patients with endometrial adenocarcinoma treated in our hospital from January 2014 to December 2014 were regarded as the observation group, 40 cases of healthy examined people treated in our hospital at the same period were regarded as the control group, the expression and clinical value of immunohistochemical in detecting gonadotropin releasing hormone receptors in endometrial adenocarcinoma were analyzed. Results The positive expression rate in the control group was obviously lower than that in the observation group (22.50% vs 43.33%) the difference was statistically significant（P＜0.05）, in the control group, the difference in the positive expression rate between the proliferative phase GnRH-R mRNA and the progestational phase was not statistically significant（P＞0.05）. Conclusion GnRH-R was obviously improved in endometrial adenocarcinoma cells, and GnRH is involved in the carcinogenesis of endometrial cells and is of higher reference value to the diagnosis of endometrial adenocarcinoma.

[Key words]Endometrial adenocarcinoma; Gonadotropin releasing hormone receptors; Immunohistochemical

收稿日期：（2015-10-16）

[作者简介]吕松林（1981.8-），男，河南南阳人，本科，主管检验师，研究方向：临床检验专业，免疫、内分泌激素、肿瘤等。

DOI：10.16662/j.cnki.1674-0742.2016.02.084

[中图分类号]R5

[文献标识码]A

[文章编号]1674-0742（2016）01（b）－0084-02