ALA-PDT联合口服茶多酚对尖锐湿疣患者血清HIF-1α和VEGF水平的影响

刘广悦，李　艳，曹庆生，李志超

(1.河北省玉田县医院，河北唐山 064100；2.河北省玉田县中医医院，河北唐山 064100)



·临床研究·

ALA-PDT联合口服茶多酚对尖锐湿疣患者血清HIF-1α和VEGF水平的影响

刘广悦1，李艳1，曹庆生1，李志超2

(1.河北省玉田县医院，河北唐山 064100；2.河北省玉田县中医医院，河北唐山 064100)

摘要:目的观察5-氨基酮戊酸光动力疗法(ALA-PDT)联合茶多酚对尖锐湿疣(CA)的疗效及其对CA患者血清缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)和血管内皮生长因子(VEGF)水平的影响。方法选取2012年1月至2013年10月玉田县医院皮肤科收治的CA患者102例，将其分为3组：A组(单纯激光治疗组)、B组(单纯ALA-PDT治疗组)、C组(ALA-PDT联合茶多酚治疗组)。另选取32例健康人作为健康对照组。采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)于术前、术后3个月分别检测各组血清HIF-1α和VEGF水平，对比分析各组血清HIF-1α和VEGF水平的变化及意义。结果治疗前，A、B、C组血清HIF-1α和VEGF水平均高于健康对照组，差异有统计学意义(P<0.05)；而A、B、C组间血清HIF-1α和VEGF水平比较，差异无统计学意义(P>0.05)。与治疗前比较，治疗3个月后A、B、C组血清HIF-1α和VEGF水平均低于治疗前，差异有统计学意义(P<0.05)；且B、C组血清HIF-1α和VEGF水平低于A组，差异有统计学意义(P<0.05)；C组血清HIF-1α和VEGF水平低于B组，差异有统计学意义(P<0.05)。结论ALA-PDT联合茶多酚治愈CA并防止其复发的机制可能与降低HIF-1α和VEGF水平，减少新生血管生成有关。

关键词:尖锐湿疣；5-氨基酮戊酸光动力疗法；茶多酚；缺氧诱导因子-1α；血管内皮生长因子

尖锐湿疣(CA)是最常见的性传播疾病，一般由人乳头状瘤病毒引起，具有发病率高、易复发等特点，传统疗法如激光、电离子等，术后易复发、易引起疼痛。近年来，5-氨基酮戊酸光动力疗法(ALA-PDT)治疗CA的效果得到了肯定，其操作简单、效果好、复发率低。茶多酚作为一种绿茶的主要活性成分，不良反应少，不仅能增强机体抵抗力、调节机体免疫、降脂降糖、解毒，还能诱导肿瘤细胞凋亡，抗肿瘤新生血管生成，具有抗肿瘤的作用。因此，笔者尝试ALA-PDT联合茶多酚治疗CA，并观察ALA-PDT联合茶多酚对CA的疗效及对CA患者血清缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)和血管内皮生长因子(VEGF)水平的影响。

1资料与方法

1.1一般资料2012年1月至2013年10月玉田县医院皮肤科收治的CA患者102例，诊断标准参考原卫生部防疫司颁布的《性病防治手册》，其中男45例，女57例，中位年龄26岁，实验前均经患者同意并经过医院伦理委员会审查。将所有患者分为A组(单纯激光治疗组)，B组(单纯ALA-PDT治疗组)，C组(ALA-PDT联合茶多酚治疗组)，每组34例，各组间性别、年龄、皮损情况及病变程度差异均无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。另选32例健康人作为健康对照组。

1.2仪器与试剂5-氨基酮戊酸(ALA)购自上海复旦张江生物医药股份有限公司，-20 ℃避光保存，使用前根据皮损面积新鲜配制成20% ALA凝胶；酶联免疫吸附试验(ELISA)检测试剂盒购自晶美生物工程有限公司；茶多酚片购自浙江大学茶叶科技开发公司，杭西卫食字第[2005]0022号。光动力治疗仪型号LED-IB，波长(633±10)nm，输出功率20～100 mW/cm2，购自武汉亚格光电技术有限公司；二氧化碳(CO2)激光治疗仪型号901-C，购自广州市激光技术应用研究所有限公司；帝肯全自动酶免仪。

1.3方法

1.3.1治疗方法A组应用CO2激光将所见疣体全部汽化，外涂抗菌药物药膏预防感染。B组常规皮肤消毒、局部麻醉后用CO2激光将所见疣体全部汽化，CO2激光治疗深度达皮肤正常组织，范围距疣体根部0.5～0.7 cm；同时要避免损伤血管、神经等重要组织。术后要预防感染。待7～10 d创面愈合后，将盐酸氨基酮戊酸涂于原皮损和醋酸白试验阳性皮损及其周围0.5 cm以内的皮肤及黏膜上，3 h后用氦氖(He-Ne)激光照射，根据光斑面积计算所需时间，使照射总能量达100 mJ/cm2(约20～30 min)。局部外涂抗菌药物防止感染。每周治疗1次，连续用4周。C组除上述治疗外，患者术后开始口服茶多酚片，剂量为每片0.45 g，每次2片，每日3次，2个月为1个疗程。采用双抗体夹心ELISA法于术前、术后3个月分别检测各组血清HIF-1α和VEGF水平。

1.3.2治愈标准3个月后复查，无复发疣体、醋酸白试验阴性为痊愈。

2结果

2.1各组治愈率及复发率A组治愈率为70.59%(24/34)，复发率为29.41%(10/34)；B组治愈率为85.29%(29/34)，复发率为14.70%(5/34)；C组治愈率为97.06%(33/34)，复发率为2.94%(1/34)。C组的治愈率明显高于A组，复发率低于A组，差异有统计学意义(χ2值分别为8.78、8.78，P<0.05)。C组与B组的治愈率和复发率比较，差异均无统计学意义(χ2值分别为2.92、2.92，P>0.05)。

2.2治疗前、后各组血清HIF-1α和VEGF水平比较治疗前，A、B、C组血清HIF-1α水平高于健康对照组，差异均有统计学意义(t值分别为23.18、18.44、18.89，P<0.05)；VEGF水平亦高于健康对照组(t值分别为14.37、16.04、11.94，P<0.05)。A、B、C组间血清HIF-1α和VEGF水平比较，差异均无统计学意义(A组与B组比较，t值分别为0.09和1.51；A组与C组比较，t值分别为0.08和1.40；B组与C组比较，t值分别为0.16和0.12，P>0.05)。与治疗前比较，治疗3个月后A、B、C组血清HIF-1α水平均降低，差异有统计学意义(t值分别为29.65、9.21、12.12，P<0.05)；VEGF水平也降低，差异有统计学意义(t值分别为2.85、4.40、9.09，P<0.05)。治疗3个月后B组和C组血清HIF-1α和VEGF水平低于A组，差异均有统计学意义(B组与A组比较，t值分别为6.21、2.56；C组与A组比较，t值分别为10.17、9.69，P<0.05)；C组血清HIF-1α和VEGF水平低于B组，差异有统计学意义(t值分别为5.68、8.76，P<0.05)。见表1。

表1　　治疗前、后各组血清TNF-α和VEGF水平比较

*：P<0.05，与健康对照组比较；#：P<0.05，与治疗前比较；△：P<0.05，与治疗后A组比较；▲：P<0.05，与治疗后B组比较。

3讨论

CA一般由人乳头状瘤病毒引起，CA的发生、发展和复发与各种细胞因子密切相关。发生CA时，白细胞介素(IL)平衡失调，影响机体内环境稳定，导致免疫功能紊乱，如干扰素-γ(IFN-γ)、IL-2、IL-12等细胞因子分泌减少，IL-4、IL-5、IL-10等细胞因子分泌增加[1-3]。相关研究表明，作为HIF-1α重要的调控因子，VEGF在CA组织中的表达明显高于健康对照组，提示VEGF的高表达促进了CA的发生和发展，与CA的过度增殖及新生血管的形成有着密切的关系[4-9]。ALA-PDT治疗作为一种非创伤性方法，具有选择性好、患者痛苦小、不良反应少等优势，同时对CA的复发也有一定的预防作用，其作用机制就是光动力变化过程中产生大量活性氧，这些活性氧能通过直接杀伤作用、损伤血管效应、抗病毒免疫效应达到治疗CA的目的[10-11]。由于CA易复发，很多学者都主张联合疗法，以降低CA的复发率。茶多酚作为一种绿茶的主要活性成分，不良反应少，不仅能增强机体抵抗力、调节机体免疫、降脂、降糖、解毒，还能诱导肿瘤细胞凋亡，抗肿瘤新生血管生成，具有抗肿瘤的作用。有研究表明，茶多酚可通过升高IL-12水平，增强机体免疫功能，同时通过抑制VEGF和刺激T细胞毒性来防治皮肤癌[12]。因此，笔者尝试ALA-PDT联合口服茶多酚治疗CA，分析疗效及其对CA患者血清HIF-1α和VEGF水平的影响。

本研究结果显示，治疗前CA患者血清HIF-1α和VEGF水平明显高于健康对照组，提示二者在CA的发生、发展中可能发挥着重要作用。CA的瘤体迅速增长，进而导致瘤组织缺氧。在低氧条件下，HIF-1α水平升高，使瘤细胞对缺氧产生适应性调节，维持瘤体的生长。其作用机制是通过促进VEGF的分泌，促进血管内皮细胞的增生和抑制其凋亡，增加毛细血管通透性而促进血管生成，促进CA的发生与发展。治疗后，各组患者血清HIF-1α和VEGF水平均有不同程度的变化，尤以ALA-PDT联合茶多酚治疗组明显，血清HIF-1α和VEGF水平最接近正常水平且复发率低，提示茶多酚通过降低血清HIF-1α和VEGF水平，抑制内皮细胞增生和血管生成，进而抑制瘤体的发生、发展。单纯ALA-PDT疗法和单纯激光治疗组患者HIF-1α和VEGF水平虽有变化，但仍明显高于正常水平，可能与去除疣体后未复发和ALA-PDT本身有激发机体抗病毒免疫效应有关。研究结果表明，HIF-1α和VEGF在CA的发生、发展中可能发挥着重要作用，HIF-1α和VEGF水平的升高，可促进瘤体的发生与发展。

综上所述，ALA-PDT联合茶多酚治疗CA效果明显，复发率低，且无明显不良反应，其作用机制为茶多酚可以降低HIF-1α和VEGF的分泌，减少内皮细胞过度增生及新生血管生成，进而抑制瘤体的发生与发展，但具体作用机制有待进一步研究。

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(收稿日期：2015-10-16)

DOI:10.3969/j.issn.1673-4130.2016.05.045

文献标识码：A

文章编号：1673-4130(2016)05-0677-03