不同日龄新西兰白兔血液学特性研究

恽时锋， 董 敏， 赵志刚， 陈 莉， 刘 彪， 田小芸（南京军区南京总医院比较医学科，全军实验动物科普与伦理教育基地，全国科普教育基地，南京 210002）

不同日龄新西兰白兔血液学特性研究

恽时锋， 董 敏， 赵志刚， 陈 莉， 刘 彪， 田小芸
（南京军区南京总医院比较医学科，全军实验动物科普与伦理教育基地，
全国科普教育基地，南京 210002）

目的 探讨不同日龄封闭群新西兰白兔的血液学特性。方法 采集不同年龄、不同性别新西兰白兔的血液样品，应用全自动血细胞仪测定160只新西兰白兔的血液学指标。结果 各年龄段新西兰白兔血液学指标性别间无显著差异（P＞0.05），不同年龄段之间除单核细胞总数差异不显著（P＞0.05），其它指标有显著差异（P＜0.05）。结论 本院培育自繁的实验型封闭群新西兰白兔生物学特性较稳定，个体间差异较小，初步建立了不同日龄新西兰白兔血液生理指标正常值，为新西兰白兔的广泛使用提供基础数据。

新西兰白兔； 各年龄段； 血液学特性

新西兰白兔作为实验动物广泛应用于临床医学、免疫学及微生物学研究，然而在常见的动脉粥样硬化性心血管疾病研究中，家兔使用量却相对少，主要原因是血液生理生化指标参数匮乏，无从参考，使实验难度增大［1］。实验动物血液生理常规值是生物医学研究的基础指标，是临床医疗和科学研究的重要依据［2］。本实验对新西兰白兔进行基础数据的测定，探讨不同日龄、不同性别新西兰白兔的血液学特性，为建立新西兰白兔的日常检验标准奠定基础，为广泛使用新西兰白兔作为实验动物进行科学研究提供基础数据。

1 材料与方法

1.1 实验动物

普通级封闭群新西兰白兔160只，由南京军区南京总医院比较医学科培育自繁 ［SCXK（军）2012-0014］，其中幼年、育成、成年及老年兔各40只，雌雄各半，幼年兔体质量0.4～1.0 kg（1～2月龄），育成青年兔体质量1.1～2.0 kg（2～4月龄），成年兔体质量2.0～3.0 kg（4～6月龄），老年兔体质量3.0～4.4 kg（24月龄及以上）。

1.2 饲养管理及环境

实验兔饲养于自动冲洗式不锈钢笼中，饲喂南京爱立默科技有限公司生产的家兔颗粒料，定时给食，饮水。饲养室内温度维持在16～28 ℃，相对湿度72%～85%，光照明暗各12 h［SYXK（军）2012-0046］。

1.3 血样采集

实验兔在清晨空腹自然清醒状态下，妥善保定， 自耳中央动脉常规剪毛消毒后，采血2 mL，置于肝素钠抗凝管中，分别测定白细胞总数（WBC）、淋巴细胞（LYM）百分率、单核细胞（MO）百分率、中性粒细胞（GR）百分率、红细胞计数（RBC）、血红蛋白（HGB）、红细胞比积（HCT）、平均红细胞体积（MCV）、平均血红蛋白含量（MCH）、平均血红蛋白浓度（MCHC）、红细胞宽度（RDW）、血小板计数（PLT）、血小板比积（PCT）、平均血小板体积（MPV）、血小板宽度（PDW）等血液学常规项目。

1.4 检测仪器

coulter stks全自动血细胞分析仪，由Beckman coulter公司（美国）生产。

1.5 数据统计

用SPSS10.0统计软件对不同性别、不同日龄段数据进行统计分析。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 性别间比较

所测的15项血液学性状中，所有指标在同一年龄段内雌、雄兔间无显著差异（P＞0.05）（表1）。

2.2 年龄段间比较

除单核细胞（MO）百分率在不同年龄段无显著差异外（P＞0.05），其余各项目不同年龄阶段间均存在显著差异（P＜0.05）（表1）。

3 讨论

新西兰白兔具有毛色纯白、皮肤光泽、体格健壮、繁殖力强、生长迅速、性情温和及容易管理等特点，已被培育成质量稳定的实验型封闭群动物［2，3］。除广泛应用于皮肤反应实验、药剂的热源实验、致畸实验、毒性实验和胰岛素检定外，亦常用于妊娠诊断、人工受胎实验、计划生育研究和制造诊断血清等［4］。因此，新西兰白兔的血液学指标对生物医学研究非常有价值，同时也是动物正常生理状态的判定及人类疾病研究中探讨发病机理，选择动物的重要指标和依据，但目前在相关报道中未见有对其正常值进行过详尽具体的描述，因此建立健康新西兰白兔血液学指标正常参考值对于生物医学研究具有重要的应用价值［5-7］。

动物血液学指标是反映动物健康与否的重要指标， 是临床医疗和科学研究的重要依据， 是评价封闭群动物遗传标准的一项重要指标。其参数受较多因素影响，如饲养环境、年龄、性别、动物级别、品系、采血时间、测试方法、检测仪器甚至测定技术熟练程度等，其数值也随之变化［8，9］。本研究选用了健康封闭群新西兰白兔160只，其中幼龄、育成、成年及老龄兔各40只，实验兔在空腹非麻醉状态下经耳中央动脉采血，用全自动血细胞分析仪进行血液学指标检测。结果表明，在各年龄段实验型封闭群新西兰白兔血液学指标性别间无显著差异（P＞0.05），说明性别对实验型封闭群新西兰白兔的血液学指标没有显著的影响，这与张晓玉、杨锋等［10，11］的结果基本一致； 不同年龄段新西兰白兔间的比较结果显示，除MO百分率无显著差异外（P＞0.05），其余各项血液学指标均存在显著差异（P＜0.05）， 说明年龄因素对实验动物血液学指标的影响十分显著。血液学指标是机体各组织、器官功能和状态的反映［12］， 血液学指标的显著差异说明随着年龄增长， 不同年龄新西兰白兔的生理、代谢及机体防御等方面都有显著变化，因此在不同实验研究中因根据实际需要选择不同年龄段新西兰白兔。

张晓玉等［10］测定了70～80日龄SPF新西兰兔血液学指标，李增强等［12］进行了SPF级与普通级成年新西兰兔血液学指标比较分析， 闫峰等［1］测定了成年新西兰兔部分血液学参数， 上述研究均未涉及不同年龄段新西兰白兔的血液学参数比较分析。本实验研究表明本院培育自繁的实验型封闭群新西兰白兔生物学特性较稳定，个体间差异较小，初步建立了不同年龄段新西兰白兔血液生理指标正常值，为新西兰白兔的广泛使用提供基础数据，也为科技人员进行实验型新西兰白兔动物模型的选择提供参考。

［1］ 闫峰， 吉训明， 田欣， 等. 新西兰兔血气和部分血液生理生化参数的测定［J］. 实验动物科学， 2010， 27（2）:55-57.

［2］ 詹纯列， 肖育华， 李新春， 等. 普通级、SPF级SD、Wistar大鼠血液生化参考值的建立的测定与比较［J］. 中国比较医学杂志， 2004， 14（2）:94-96.

［3］ 恽时锋， 张立波， 董敏， 等. 不同品种实验兔血液流变学特性［J］. 中国比较医学杂志， 2010， 20（10）:41-43.

［4］ 恽时锋， 张立波， 董敏， 等. 新西兰白兔血液流变学特性动态变化［J］. 实验动物与比较医学， 2010， 30（5）:379-380.

［5］ 秦川. 医学实验动物学［M］. 北京: 人民卫生出版社， 2008: 92-95.

［6］ 王冬平， 李慕， 尚世臣， 等. 不同日龄SPF级KM小鼠血液生理生化正常指标的探讨［J］. 实验动物科学， 2008， 25（4）: 5-8.

［7］ Mizoguchi Y， Matsuoka T， Mizuguchi H， et al. Changes in blood parameters in New Zealand White rabbits during pregnancy［J］. Lab Anim， 2010， 44（1）:33-39.

［8］ 恽时锋， 方天， 董敏， 等. 新西兰兔脑电的生物学特性［J］. 中国比较医学杂志， 2014， 24（6）:40-45.

［9］ 郑敏， 翁迪成， 刘芳， 等. 高温高湿环境对家兔血液流变特性与生化指标的影响［J］. 中南大学学报: 自然科学版， 2012，43（7）:2883-2888.

［10］ 张晓玉， 张修彦， 詹纯列. SPF级新西兰兔脏器参数、血液指标、心率、劲动脉血压、心室压的测定与比较［J］.中国比较医学杂志， 2015， 25（8）:37-43.

［11］ 杨锋， 艾应先， 谢晓娟， 等. 屏障系统大耳白、新西兰兔血液学指标测定分析［J］. 实验动物科学， 2012， 29（6）:26-29.

［12］ 李增强， 孙淑华， 孟金萍， 等. SPF级与普通级新西兰兔血液学参数的比较［J］. 中国比较医学杂志， 2008， 18（4）:51-55.

Experimental Study on Hematological Parameters of New Zealand White Rabbits at Different Ages

YUN Shi-feng， DONG Min， ZHAO Zhi-gang， CHEN Li， LIU Biao， TIAN Xiao-yun
（Department of Comparative Medicine， Nanjing General Hospital of Nanjing Military Command，Army Education Base of Science and Ethics of Experimental Animal，National Science Education Base， Nanjing 210002， China）

Objective To investigate the hematological parameters of outbred colony New Zealand white rabbits at different ages. Methods Blood samples from 160 New Zealand white rabbits （Female， 80 and male， 80） in different age groups were analyzed with automatic blood cell analyzer. Result There was no statically significant difference between the blood samples of different age experimental closed colony New Zealand white rabbits in different sex sets （P＞0.05）. Significant differences （P＜0.05）of hematological indexes except monocyte （P＞0.05） were observed among New Zealand white rabbits in different age groups. Conclusion The outbred colony New Zealand white rabbits had stable biological characteristics and less difference among individuals. In this study， the biological hematologic parameters database for New Zealand white rabbits at different ages was established， which will be used as basic reference for New Zealand white rabbits experiment.

New Zealand white rabbits； Different ages； Hematological parameters

Q95-33

A

1674-5817（2016）01-0037-04

10.3969/j.issn.1674-5817.2016.01.007

2015-06-30

恽时锋（1965- ）， 男， 教授， 从事实验动物管理工作。E-mail: yunshifeng1@163.com