咳喘止泻膏的质量标准研究

薛利华

西安市中医医院(西安710021)



咳喘止泻膏的质量标准研究

薛利华

西安市中医医院(西安710021)

摘要目的：建立咳喘止泻膏的质量控制标准。方法：采用薄层色谱对该制剂中丁香、吴茱萸两种主药加以鉴别，采用HPLC法对该制剂中桂皮醛的含量进行测定。结果：丁香、吴茱萸薄层色谱斑点清晰，分离度较好。HPLC法测定结果桂皮醛在0.042～0.21μg范围内，峰面积与进样量线性关系良好(r=0.9995), 平均回收率为97.88%， RSD为2.05%。结论:质量控制方法专属性强,重现性好,灵敏度高可作为咳喘止泻膏的质量控制标准。

主题词药品质量控制，中药@咳喘止泻膏

咳喘止泻膏原名三焦膏，是我院多位专家共同研究的协议处方，由我院研制的纯中药院内制剂。主要由肉桂、丁香、吴茱萸等组成，经外用穴位帖敷，具有温阳祛寒的功效。经过多年来的临床使用，发现其对肺寒咳嗽效果显著，同时对中阳不振的泄泻、肾阳衰弱的遗尿也有很好的疗效。近年来，随着穴位帖敷的兴起，该制剂的临床使用有向呼吸科、耳鼻喉科、眼科、脾胃病科等扩大的趋势，用药量也不断增大，为确保患者用药剂量准确、安全、有效，需要更有效的控制咳喘止泻膏的质量，探讨我院软膏剂的质量标准，特对该制剂中两种主药丁香、吴茱萸进行薄层色谱鉴别，对君药桂皮进行含量测定的研究，现报道如下。

1仪器与试药1.1仪 器LC-20AT恒流泵；SPD-20A紫外检测器；SIL-20A自动进样；CTO-10ASVP校温箱(日本岛津)；预制硅胶G板(青岛海洋化工生产)；FA2104(上海民桥精密科学仪器有限公司)。

1.2试药肉桂、丁香、吴茱萸等药材(购自西安盛兴饮片厂)；桂皮醛对照品( 110710-201016) 、丁香、吴茱萸对照药材从中国食品药品检定研究院购买；甲醇为色谱纯，水为纯水，其余实验试剂为分析纯。咳喘止泻膏( 批号：20150624，20150716，20150807) 及相应药材阴性样品软膏由本实验室自制。

2方法与结果2.1薄层色谱鉴别2.1.1丁香薄层鉴别[1]：称取本软膏三批各10g，分别加硅藻土适量使分散，加乙醚30mL，振摇数分钟，用棉质纤维滤纸过滤，滤液加热蒸干，残渣加入1mL乙醚，待完全溶解为供试品溶液。取不含丁香的处方药材按咳喘止泻膏的制备工艺制成阴性样品软膏。取丁香对照药材1g及阴性软膏10g照前法分别制成对照药材溶液及阴性对照品溶液。照薄层色谱法(药典通则0502)试验，前述五种溶液分别吸取5μL，依次在薄层板上点样，展开剂为石油醚(60～90℃)-乙酸乙酯(9∶1)，展开，取出，晾干，喷洒5%香草醛硫酸溶液少许，105℃加热直到斑点显示清晰。三批供试品显示的色谱斑点和对照药材色谱位置相应、颜色相同。见图1。

2.1.2吴茱萸薄层鉴别[1]：称取本软膏三批各10g，分别加硅藻土适量使分散，加30mL无水乙醇，超声震荡30min处理，棉质纤维滤纸滤过，滤液加热蒸干，残渣加1mL无水乙醇使溶解，待完全溶解作为供试品溶液。取不含吴茱萸的处方药材按咳喘止泻膏的制备工艺制成阴性样品软膏。取吴茱萸对照药材1g及阴性软膏10g照前法分别制成对照药材溶液及阴性对照品溶液。照薄层色谱法(药典通则0502)试验，前述五种溶液分别吸取6μL，依次在薄层板上点样，展开剂为环己烷-乙酸乙酯-甲醇-三乙胺(19∶5∶1∶1)，展开，取出，晾干，紫外光(365nm)下检视。三批供试品色谱显示的荧光斑点与对照药材色谱位置相应、颜色相同。见图1。

2.2含量测定[1]2.2.1色谱条件和系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-水(35∶75)为流动相；检测波长为290nm；柱温30℃。

2.2.2对照品溶液的制备:取减压干燥的桂皮醛对照品，精密称定5.25mg，置50mL容量瓶，加甲醇溶解并稀释至50mL刻度，摇匀，移液管移取2mL，置25mL量瓶中，用甲醇稀释至25mL刻度，摇匀，即得。对照品溶液浓度为8.4μg/mL。

2.2.3制备供试品溶液：取本软膏约1g，置入锥形瓶中精密称定，加入精密量取的100mL甲醇溶液，称重，超声处理30min，放冷，再称重，用甲醇溶液补足减失的重量，振摇3min，滤过，再用0.45μm微孔滤膜滤过，即得。

2.2.4制备阴性对照液：取不含肉桂的处方药材按咳喘止泻膏制备工艺及2.2.3中方法制成阴性对照品溶液。

2.2.5专属性考察：将浓度为8.4μg/mL桂皮醛对照品溶液、本软膏供试品溶液和无肉桂阴性对照溶液，分别精密吸取20 μL注入液相仪测定。结果本软膏供试品溶液中的桂皮醛与其他峰分离良好，与桂皮醛对照品溶液在相同的保留时间有相应的色谱峰，无肉桂阴性对照溶液在相同的保留时间处无色谱峰出现。表明测定的专属性好，阴性无干扰。

2.2.6线性关系考察：精密吸取浓度为8.4μg/mL桂皮醛对照品溶液5、10、15、20、25μl，依次注入液相仪测定，以峰面积为Y轴，桂皮醛进样量为X轴，进行线性回归。方程Y= 19.24X -9 ( r = 0. 9995)。表明桂皮醛在0. 042 ～0.21μg范围内。

2.2.7精密度试验：取浓度为8.4μg//mL的桂皮醛对照品溶液，设定进样量为20μL/次，连续进样6次，注入液相仪，测定峰面积，RSD计算结果为0.78 %，精密度良好。

2.2.8 重复性试验：取咳喘止泻膏(批号20150624)依2.2.3方法平行备样5份，测定得桂皮醛平均含量为0.86 mg/g，RSD为1.02%。结果表明本法重复性良好。

2.2.9 稳定性试验：取重复性试验项下样品一份，分别于0，1，2，4，8，12 h 进样，测定桂皮醛的峰面积，计算含量，结果桂皮醛含量RSD 1.21%，表明样品在12 h 内基本稳定。

2.2.10 加样回收率试验：精密称取批号为20150624的咳喘止泻膏(含量为0.86 mg/g)五份置锥形瓶，每份约0.5g，分别精密吸取加入4 mL浓度为105μg/mL桂皮醛对照品溶液，按2.2.3方法制得供试品溶液，进样测量并计算，桂皮醛的平均回收率为97.88%，RSD=2.05%，表明该法加样回收率符合规定。结果见表1。

2.2.11样品含量测定：取三批不同批号的供试软膏，依2.2.3项下方法制备，在本试验色谱条件下测定，结果为：0.86 mg/g(20150624)；0.83 mg/g(20150716)；0.89 mg/g(20150807)。

3讨论咳喘止泻膏是我院的外用软膏剂之一，采用穴位贴敷。近年来，随着穴位帖敷的兴起，用药量呈现不断增大的趋势，对药品的质量也提出更高的要求，而外用软膏剂作为传统外用剂型，由于组方、基质、工艺、用途等方面的原因，其原有质量控制较为简单，一般按照药典只进行色泽、均匀度、气味等性状、稳定性及微生物限度的检测[1]。质量标准不完善，有待进一步研究。

本实验采用薄层鉴别对本制剂中臣药丁香、吴茱萸进行定性鉴别，结果薄层色谱斑点清晰、方法专属性强、操作简便易实施，且阴性无干扰。用高效液相法对本制剂中君药桂枝定量测定桂皮醛，专属性强，重现性好，结果稳定。本试验参照《中国药典》和有关文献[2-4]对咳喘止泻膏进行研究，所建立的方法准确性好，可以作为咳喘止泻膏的质量标准。同时采用对君药定量，臣药定性的方法为我院外用软膏剂质量标准进一步完善提供思路。

参考文献

[1] 国家药典委员会.中华人民共和国药典[S].北京：中国医药科技出版社,2015.

[2] 张丽珍，周之荣.高效液相色谱法测定四味清口含片中桂皮醛和橙皮苷的含量[J].医药导报,2014,33(12)：1627-1630.

[3] 安瑜，张新新，梁晋如，等. HPLC法测定瑞克卫瑞消毒液中桂皮醛的含量[J].陕西中医，2013,34(2)：230-232.

[4] 鲍佳妮，翟铁宏，张振秋，等.HPLC 测定桂枝、茯苓药对提取物中6 个成分含量 [J]．辽宁中医杂志,2015,42(4)：826-829.

(收稿2016-02-22；修回2016-03-22)

【中图分类号】R286

【文献标识码】A

doi:10.3969/j.issn.1000-7369.2016.06.046