郭秀丽,徐衬英,田红成,李红,付雪姣
(河南省睢县林业局,河南 睢县 476900)
园林花卉快繁技术
郭秀丽,徐衬英,田红成,李红,付雪姣
(河南省睢县林业局,河南 睢县 476900)
园林花卉的快速繁殖又叫试管繁殖,是指用组织培养方法快速无性繁殖花卉的一种新技术,本文简要的介绍了园林花卉的快速繁殖具体措施和技术。
园林花卉;快速繁殖;技术
植物组织培养是指将植物的离体生活组织部分(器官、组织和细胞)在适宜的人工培养基上进行无菌培养,使其增殖(产生愈伤组织)并逐步分化出器官(芽和根)和形成小植株的方法。它是建立在植物细胞具有全能性的理论基础上,即植物体的每一个生活细胞都携带着一套完整的基因组并且具有产生完整植株的能力。
(一)严格无菌
植物组织培养的整个操作过程和培养过程都要求在严格无菌的条件下进行,避免微生物(主要是细菌和真菌)的污染。因此,操作过程要在接种室或超净工作台上进行;选用的植物材料要进行表面消毒;配制的培养基要进行高压蒸汽灭菌和无菌过滤。
(二)温度
1.培养温度。培养物生长的最适温度大致上和该植物原来生长所需最适温度相同。
2.不同的温度处理。
低温处理:一些植物如唐菖蒲、百合等的试管苗、小鳞茎,在盆栽前低温处理(2℃)4-6周,可大大提高移栽成活率。
高温处理:高温处理不仅可以获得无病毒植株,而且对一些植物的器官发生也有影响。如葡萄的茎尖分生组织培养在35℃下3个月可以产生无病毒苗;菊芋块茎在35℃下培养能促进生根。
(三)光照
1.光强。少数植物器官发生在无光条件下,但其进一步的生长发育和大多数植物的器官发生必须有光。茎尖的起始生长及试管苗的继代增殖以1 000-3 000lx光强适宜;生根成苗以及小植株的生长以3 000-10 000lx为宜。
2.光质。光质对愈伤组织诱导,培养组织的增殖,以及器官的分化都有明显的影响。如百合珠芽在红光下生长的愈伤组织比蓝光和白光下生长快;唐菖蒲子球块在蓝光下培养比在红光下培养出现的芽早,幼苗生长旺盛,根系粗壮。
3.光照时间。最常用的光周期是16小时的光照、8小时的黑暗。但是,有些植物对光周期反应很敏感。如有人将对短日照敏感的葡萄品种的茎段进行培养,发现在短日照下形成根,而在长日照下只产生愈伤组织;长日植物-双色金光菊的茎尖,在日照超过12小时的条件下会形成花蕾。可见,通过光照时间的控制,可控制芽的分化方向。
(四)培养基的PH值和渗透压
1.PH值。培养基的PH值因培养植物的种类而异。大多数花卉都要求在PH5.6~5.8的条件下进行组织培养。有些植物,如喜酸性的杜鹃花、兰花以PH5为宜。
2.渗透压。培养基的渗透压在试管繁殖中并不太强调。然而,对于花药与原生质体的培养来说,却是成败的关键。合适的渗透压可提高花药中花粉愈伤组织的诱导率,保持原生质体呈正常的球形与进一步的细胞分裂,不因吸水过多而破碎,也不因失水太多而萎缩。固体培养常用2%~5%的蔗糖维持。
(五)气体的影响
组织培养中的外植体呼吸需要氧气。因此,在固体培养时,培养物必须置于固体培养基表面,避免沉入培养基中;在液体培养时,通过用振荡的方法解决供氧问题。
培养基是组织培养成功的重要因素之一,它为外植体细胞的增殖、器官的分化与幼苗的生长提供了营养物质和生长调节物质。另外还起着维持一定的渗透压和酸碱度的作用。培养基有液体和固体两种。固体培养基中加有0.7%~1%的琼脂。花卉试管繁殖常采用的是固体培养基。
(一)培养材料的选择
为了获得无病毒植株,最好选用茎尖、生长点、形成层等作为外植体。此外,还可选用叶片、鳞片、根茎、茎段、花瓣、子房、珠心、子叶、下胚轴等。
(二)材料表面无菌
先用肥皂水洗涤材料,然后用自来水冲洗,再放入70%的酒精中约30秒钟,后取出在0.1%的升汞中浸泡5~10分钟或在10%的漂白粉上清液中浸泡10~15分钟,最后用蒸馏水冲洗3次。
(三)接种
从灭过菌的芽中剥取茎尖或生长点,或将根茎、幼茎、下胚轴等切成0.5~1cm长的切段,或将叶片、花瓣、子叶等切成0.5~1cm2的切块。在无菌室内或超净工作台上接种培养基上。
(四)培养
1.初次培养。外植体在组织培养的初期,首先是产生愈伤组织,再分化出芽,或直接产生芽,形成带根植株。在初次培养所用的激素中,细胞分裂素以6-苄基腺嘌呤(BA)效果最好,生长素以加萘乙酸(NAA)效果好。在BA和NAA配合使用时,外植体往往会脱分化或腋芽萌动而增殖。
2.芽的增殖。此阶段的培养目的是繁殖大量有效的芽和苗。在芽增殖的培养基中,细胞分裂素是不可缺少的。
3.生根培养。其培养基目的是使第一和第二阶段培养的苗发生不定根,并使苗继续长大,从而长成完整的小植株。
(五)炼苗与移栽
1.炼苗。为保证移栽后成活,使试管苗适应从异样型转变为自养型的过程,因此需要炼苗。其步骤:把培养物放置在移栽环境中3~10天,使其适应新的光、温、湿条件。在移栽前一天打开瓶塞,第二天再移苗。
2.移栽。
苗的取出:先在瓶中注入清水,用镊子轻轻地将培养基块搅碎,将苗取出。然后用清水漂去粘附在根部的培养基,这样可避免根部受伤以及因培养基带人土中而引起的腐烂。
种植:先将生根苗移栽到洗净灭菌的河沙中进行沙培。初期应注意保持移栽苗环境中有较高的湿度和较稳定的气温(20-22℃)。沙培2~3周之后则可移栽到装有土壤的花盆或木箱中培养成栽培用苗。
(编辑:刘国华)
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1673-9019(2016)08-0030-02
2016-03-22
郭秀丽(1979-),女,河南睢县人,工程师,主要从事园林绿化技术推广工作。