羟基红花黄色素A对实验性脑缺血的保护作用

●桂彩云

羟基红花黄色素A对实验性脑缺血的保护作用

●桂彩云

据科植物红花的干燥花即为中药红花，具有活血化瘀的功效，属于该功效的代表性药物。红花包含的化学成分较多，具有复杂性特点，其中黄酮类、色素、脂肪酸、挥发油以及多炔等化合物已得到实验证实。有研究显示，水溶性的黄色素集中了其还不呕血化瘀的主要成分。本文通过动物实验，对羟基红花黄色素A对实验性脑缺血的保护作用进行了探索。

羟基红花黄色素A；实验性脑缺血；保护作用

羟基红花黄色素A（以下简称HSYA）、红花明苷A、红花明苷B和其他低含量成分是红花黄色素的主要化学成分，其中HSYA的含量最高，而且活性较高。为了探讨HSYA对实验性脑缺血的保护作用，本文建立了大鼠脑动脉阻塞性脑缺血模型，对HSTA对大鼠的行为评分和缺血面积产生的影响进行了观察研究，具体研究如下。

1 实验材料

1.1 实验药品和试剂

注射用和HSYA冻干粉针（山东省天然药物工程技术研究中心，20000525，10mg/支），使用生理盐水配置特定浓度的溶液，血塞通注射液（徐州莱恩药业有限公司，国药准字Z32020421），主要药理成分为三七总皂苷。

1.2 实验动物

雄性Aistar大鼠，体重控制在（320±33）克左右。

2 实验方法

2.1 模型建立和分组[1]

按照《药理实验方法学》中的规定和操作流程，对大鼠建立实验性脑缺血模型。然后将实验大鼠随机分为A组（假手术组）、B组（生理盐水组）、C组（1.5mg/kgHSYA组）、D组（3mg/kgHSYA组）、E组（6mg/kgHSYA组）、F组（0.2mg/kg尼莫地平组）和G组（36mg/kg血塞通组）等7个组别，每组10只大鼠。除A组外，其他6组在缺血0.5小时后，均采用对应药物和剂量行静脉给药，给药体积为1ml/kg。

2.2 行为评分和脑缺血面积检测

在大鼠缺血1天后，参照《药理实验方法学》对其神经功能行为进行评分，将其杀死后，取脑，然后采用TTC（红四氮唑）染色法，检测其脑缺血面积。具体操作为：将小脑、低位脑干和嗅球去掉后，用生理盐水冲洗干净，将其冠状切成5片。将大脑前极和视觉交叉连线的中点、视交叉、漏斗柄和后极之间作为切片位置。

使用3.4毫升蒸馏水、0.1毫升1mmol/L磷酸氢二钾和1.5毫升4%红四氮唑配置成5毫升染液，在37℃的环境中，将脑片放置其中，染色0.5小时，每隔5分钟翻动1次。染色后，正常组织呈红色，梗死组织呈白色，照相备用，然后用病理图像软件对5个脑片的梗死面积/脑片总面积进行计算。

2.3 数据分析

采用SPSS17.0软件对本组研究数据进行分析，计数资料用%表示，进行x2检验，计量资料用均数±标准差（x±s）表示，进行t检验。当P＜0.05时，表示差异具有统计学意义。

3 实验结果分析

3.1 HSYA对行为评分的影响

A～G7组大鼠的行为评分分别为0、10.15±0.95、9.26±1.24、7.19±0.61、5.78±1.12、4.83±1.47 和 7.54±0.86分。

和A组比较，B组大鼠经生理盐水给药后，开始出现明显的行为障碍。C组、D组和E组分别给与了不同剂量的HSYA，结果大鼠的行为评分明显低于B组，差异均有意义（P＜0.05），提示剂量存在依赖性。D组大鼠的行为评分和G组相比，组间差异不具有统计学意义（P＞0.05）。同时，E组和F组的大鼠行为评分也无明显差异（P＞0.05）。由此可知，不同剂量的HSYA静脉给药，对于改善脑缺血动物的行为障碍具有显著作用。[2]

3.2 HSYA对脑缺血面积的影响

A～G 组的脑缺血面积分别为 1.6±0.2、31±10、29±14、12±7、4.7±3.0、4.87±2.7 和 18±9。

由病理图像分析结果可知，在缺血1天后，大鼠的脑组织开始出现明显的缺血区域，而且该部分面积超过了全脑面积的30%。在缺血0.5小时后，采用HSYA进行治疗，结果发现，C组、D组和E组的缺血面积明显小于B组，而且和给药剂量具有密切联系。D组和G组比较，大鼠脑缺血的面积差异较小，不存在统计学意义（P＞0.05）。而且E组大鼠的脑缺血面积明显小于G组（P＜0.05），但和F组无明显差异（P＞0.05）。由此可知，HSYA对于抗脑缺血具有显著作用。

4 小结

由本次实验结果可知，在缺血1天后，大鼠的脑组织开始出现明显的缺血区域，而且该部分面积超过了全脑面积的30%。使用尼莫地平可以显著减轻脑缺血损伤，表示线法阻断大鼠大脑中动脉所致局灶性脑缺血模型是成功的。于脑缺血0.5小时后，HSYA静脉给药对大鼠局灶性脑缺血性损伤有明显的保护作用，而且6mg/kgHSYA给药的作用和尼莫地平作用相当。由此可知，红花有效单体成分HSYA在体内和体外均显示出具有抗脑缺血活性。[3]

（作者单位：解放军第184医院药械科）

[1]姜华. 羟基红花黄色素A对大鼠脑缺血-再灌注损伤的保护作用及机制[J]. 中药材,2013,03（14）:462-464.

[2]刘永刚,李芳君,汤芳. 羟基红花黄色素A对大鼠心肌细胞缺血再灌注损伤的保护作用[J]. 中药药理与临床,2015,01（18）:71-74.

[3]徐露,董志. 注射用羟基红花黄色素A对大鼠脑神经元线粒体的保护作用研究[J]. 中国药房,2012,23（10）:2127-2129.