动物源食品中同时检测磺胺类、沙星类药物残留量的方法——高效液相色谱法的研究

江诗韵

（惠州市农产品质量安全监督检测中心，广东惠州 516008）

动物源食品中同时检测磺胺类、沙星类药物残留量的方法
——高效液相色谱法的研究

江诗韵

（惠州市农产品质量安全监督检测中心，广东惠州 516008）

研究了高效液相色谱法紫外检测器同时测定动物源食品鸡肉中7种磺胺类药物和4种沙星类药物含量的方法，采用色谱柱为C18（atlantis），4.6mm×250mm×5µm，流动相为磷酸溶液—乙腈（85+15，v/v），紫外检测波长为270nm，流速 1.0mL/ min，进样量50µL，7种磺胺类药物和4种沙星类药物在0.1～0.4mg/L 范围内具有良好的线性关系，在添加浓度为0.08mg/kg、0.12 mg/kg、0.16 mg/kg 时，7种磺胺类药物和4种沙星类药物的回收率80%左右，RSD小于5%。本方法操作简单、快速、精密度高、线性范围宽，适用于鸡肉中7种磺胺类药物和4种沙星类药物的同时测定。

磺胺；沙星；检测；高效液相色谱法

“民以食为天，食以安为先”。近年来，食品质量安全事件常有发生，很多商家为了谋取最大利益，在饲养畜禽动物时滥用抗生素药物，易造成畜禽产品的严重污染，通过食物链可在人体内蓄积，导致人体过敏反应并产生抗药性等副作用[1]。

发展灵敏高、速度快、价格低的药物残留检测技术是保障食品安全的关键之一。随着时代的进步，科技水平也不断地提高，目前超高效液相色谱-串联质谱仪在同时检测多种类别药物残留方面具有重大贡献，但由于仪器过于昂贵，不能得到普及，而传统的仪器分析方法前处理过程复杂、效率低下，不能适用于大通量检测样本的分析。目前，磺胺类药物和沙星类药物的测定，多采用高效液相色谱法，气相色谱法，毛细管电泳法，薄层色谱法，酶联免疫法，液相色谱-串联质谱法等。本实验建立了高效液相色谱法同时测定动物源食品中磺胺类和沙星类药物残留的方法。该方法操作简单、快速、稳定、精密度高。

1 实验部分

1.1 主要仪器与装置

美国AgilentHPLC，1200 series（美国安捷伦科技）；匀浆机，1109812（上海维诚仪器有限公司）；电子天平，BS224感量为0.0001g（北京赛多利斯仪器系统有限公司）；SKR电子天平，42050804E感量为0.01g（厦门巨林仪器有限公司）；高速冷冻离心机，TGL-16M（湘仪离心机仪器有限公司）；涡旋振荡器，MS1 MiniShaker（德国IKA公司）；氮吹仪，LB-W（青岛路博恒业环保科技有限公司）。

1.2 主要试剂与材料

恩诺沙星/ENR、环丙沙星/CIP、沙拉沙星/SAR、达氟沙星/DAN、磺胺嘧啶/SD、磺胺间甲氧嘧啶/SMM、磺胺地索辛/SDM、磺胺二甲嘧啶/SM2、磺胺甲氧哒嗪/SMP、磺胺喹恶啉/SQ、磺胺甲噁唑/SMZ；乙腈（色谱纯）：德国Merck公司；乙酸（分析纯）：天津市富宇精细化工有限公司；磷酸（85%分析纯）：天津市福晨化学试剂厂；无水硫酸钠（分析纯）：天津市福晨化学试剂厂。

1.3 标准溶液的配制

标准储备液：准确称取11种药物标准物质，用甲醇溶解定容，配制成100µg/mL的标准储备液，于-20℃冰箱中保存，可使用6个月。

标准工作液：分别取适量的储备液，用流动相0.05%（V/V）磷酸溶液+乙腈（85+15，v/v）稀释制备成2.0µg/mL标准工作液，4℃冰箱中保存，可使用3个月。

1.4 色谱分析条件

色谱柱：Atlantis：C185µm 250mm×4.6mm；紫外检测波长：270nm；进样量：50µL；柱温：35℃；流速：1mL/min；梯度洗脱程序见表1。

表1 洗脱梯度

1.5 前处理方法

称取5.00g鸡肉样品于50mL带塞的离心管中，加入15mL 1%乙酸乙腈，进行匀浆机高速匀浆，另取10mL 1%乙酸乙腈于另外一个离心管中，进行清洗匀浆机刀头，将其倒入前一个离心管中，合并两次提取液，均匀混合，加入3～5g无水硫酸钠，4000r/min离心5min，取其上清液10mL于15mL的离心管中，用氮吹仪吹近干，加入2mL流动相0.05%（V/V）磷酸溶液+乙腈（85+15，v/v），溶解残渣，震荡混合，转入1.5mL离心管中，8000r/min离心5min，取其上清液过0.22µm的针筒滤膜于进样瓶中待用。

2 结果与讨论

2.1 检测器的选择

本实验单独采用紫外检测器，其中11个峰按先后顺序分别是：磺胺嘧啶、环丙沙星、磺胺二甲嘧啶、达氟沙星、磺胺甲氧嗪、恩诺沙星、磺胺间甲氧嘧啶、沙拉沙星、磺胺甲噁唑、磺胺地索辛、磺胺喹噁啉。

2.2 精密度试验

取7种磺胺混合标准溶液和4种沙星混合标准溶液，按标准样品测定法测供试品溶液，在上述色谱条件下连续进行4次测定。实验结果表明，在紫外谱图中峰面积的RSD＜5%。本法测定的精密度较好，实验结果见表2。

表2 7种磺胺类和4种沙星类药物的方法精密度

2.3 回收率和检出限

在阴性鸡肉样品中添加100～400µg/kg浓度范围内，磺胺类和沙星类药物回收率在80%左右，可以满足日常分析的要求，11种物质在本方法中的回收率和检出限见表3。

3 结论

本实验采用高效液相色谱—紫外检测器法测定鸡肉中的7种磺胺类药物和4种沙星类药物，选用1%乙酸乙腈提取样品，确定仪器的最佳工作条件为流动相：0.05%（v/v）磷酸溶液-乙腈（85+15，v/v）；流速：1.0mL/min；柱温：35℃；紫外检测波长：270nm；进样量：50µL。在此最佳条件下，7种磺胺类药物和4种沙星类药物的回收率80%左右，RSD小于5%，相关系数达到0.999。该方法操作简单、快速、精密度高、线性范围宽，适用于鸡肉中7种磺胺类药物和4种沙星类药物的同时测定。

表3 鸡肉种7种磺胺类和4种沙星类药物添加回收率与检出限

[1]熊春兰，郭平，占春瑞，等.高效液相色谱-串联质谱法同时测定水产品中类种兽药残留[J].分析测试学报，2013，32，（2）：193-198.

Meanwhile Detection Animal food source of SAs and Xa-cin Two Medications Residue-HPLC Research

Jiang Shi-yun

High performance liquid chromatography ultraviolet method for the determination of SAS and Xa-cin chicken content，Reversed-phase chromatography column C18（atlantis），4.6mm×250mm×5µm，Mobile phase for phosphoric acid fluid – acetonitrile（85+15，v/v），Ultraviolet detected wavelength is 270nm，flow rate 1.0ml/min，injection volume of 50µL.SAS and Xa-cin in the range of 0.1ppm～0.4ppm with a good linear relationship on the added 0.08mg/kg、0.12 mg/kg、0.16 mg/kg of SAS and Xa-cin Add a recovery rate of 80%，RSD is less than 5%，The method is simple，rapid，high precision，linear range for the determination of SAs and Xa-cin chicken content.

SAs；Xa-cin；Detection；HPLC

S859.84

B

1003–6490（2016）04–0197–02

2016–04–10

江诗韵（1989—），女，广东汕尾人，助理工程师，主要从事农产品质量安全方面工作。