猪的人工采精和精液保存

孙秀峰，孙成状

(1.山东省费县城北畜牧兽医工作站 273400；2.山东省费县上冶畜牧兽医工作站 273400)



猪的人工采精和精液保存

孙秀峰1，孙成状2

(1.山东省费县城北畜牧兽医工作站 273400；2.山东省费县上冶畜牧兽医工作站 273400)

猪采精通常采用手握法。采精频率依公猪而定，一般每2～3天或每4～5天采集1次。采精时废弃最初射出部分液体，精子浓集部分收集后去凝胶。公猪射出的富精子部分通常在100～150 mL，在对精子的密度、活力、形态进行评估后进行稀释。

1　液态精液

猪的输精99%采用液态精液。由于猪的精子对低温特别敏感，因此几乎所有的猪精液是采用室温稀释液。精液在室温下保存时，必须要抑制精子的活动，以保证精子能保持足够长的活力。

20世纪60年代至70年代用于室温保存的稀释液基本都是依利诺伊变温稀释液(IVT)，近来已逐渐被Guelph稀释液、BTS稀稀释夜(贝滋维尔溶解液)和Zorlesco等稀释液所取代。Guelph稀释液比IVT稀释液配制简单，但稀释后精子活力保持时间与IVT液相当。更为复杂配方的稀释液，如Zorlesco稀释液，可使精子在12 d内保持受精能力，但试验表明有效期可能比此要短。美国使用最为广泛的是BTS稀释液。

通常建议的输精精子数不得低于1×109个，如果在采集当天未使用，则需加大精子数量。研究认为，精液多保存1 d，精子数应增加1×109个。因此，商业人工授精中心的常规一次输精剂量所含的精子数为2.5×109。如果采精时无法准确确定精子的密度，或是用于当地猪群，推荐稀释比例为1∶4～1∶7，每头份输精剂量所含精子数大约为(2～4.5)×109个。输入精液的容积很重要，较大容积的精液量可以刺激子宫运动，保证有足量的精子能到达受精部位，而容积太小则达不到预期效果。建议的输精量为70～100 mL(通常为80 mL)。输精前精液通常盛放在塑料管(杯、瓶)中，15 ℃以上保存。在商品猪进行人工授精时，可将不同公猪的精液混合使用，这样可以消除不同公猪精液对稀释的不良反应，改进输精效果。

2　冷冻保存

猪精液冷冻保存的效果不好，解冻后精子复苏率不高，个体之间差异较大，解冻后精子受精能力低于液态精液。冷冻精液解冻后两次输精，母猪受胎率最高可达到70%，而使用液态精液输精后80%～90%的母猪受胎。冷冻精液每胎产仔数也低于液态精液。因此，采用冻精人工授精的猪仅占1%，主要用于国际贸易。

限制猪冷冻精液应用的因素主要有两个。第一，猪精子对冷休克极为敏感。卵黄和脱脂奶对大多数其他动物的精液具有良好的抗冷休克保护作用，但对猪精子则几乎没有任何作用。第二，虽然甘油可能是猪精子最好的冷冻保护剂，但其对猪精子的毒性作用又比对其他动物强。因此，使用冻精输精后要获得中等程度的受胎率，也需要非常高的精子浓度，一般每次输精剂量要达到(5～6)×109个。因此制备冻精时，每次射出的精液仅可供5头母猪使用。由于稀释比例很低，因此只能用于以提高猪的遗传品质为目的的国际贸易和遗传资源保存。

为了提高猪精液冷冻效果，人们进行了大量的

研究，虽然早期的研究进展缓慢，但解冻后精子的活力和稳定性有所提高，而且在许多方面都有明显的进展。

(1)稀释液的改进当稀释液中添加清洁剂Orvas Es Paste(OEP)时，由于其能将脂肪球分解，因此有利于卵磷脂与细胞膜之间的相互作用，从而明显提高了卵黄的保护效应。在冷冻和解冻过程中，添加抗氧化剂，如维生素E、谷胱甘肽或超氧化物歧化酶可以阻止脂质发生过氧化。

(2)控制冷冻过程温度的控制是精液冷冻成功的关键。以往在冷冻猪精液时通常采用冷冻大容量细管(5～6 mL)，冷冻和解冻过程中温度不好控制，尤其是细管中心的温度更难控制。如果将精液分装在0.5 mL细管中(含2×109个精子)，解冻后再稀释到适宜的容积，对冷冻温度的控制要容易些，这样的精液量也适宜解冻后输精。有一种“扁平袋冷冻系统”，可将含5×109个精子的5 mL扁平塑料袋(内装有稀释液)进行冷冻，但必须保证受冷均匀、有效。

(3)公猪的选择可根据精子对冷冻的反应选择公猪，选择的公猪精液如果能很好地耐受冷冻，则精液在冷冻解冻后质量稳定，很少有射出的精液在冷冻后不能生存。有人建议应根据精液的耐冻性对公猪进行优劣评定。在牛人工授精的早期，曾进行过类似的选择，并以此有效淘汰了精液不耐冻的公牛(至少在奶牛上有效)。

(4)输精近来的研究发现，解冻后存活的精子并非没有发生变化。在雌性生殖道内，部分精子发生类似获能的反应变化，使精子在雌性生殖道内存活的时间缩短。选择适宜的输精位置和时间，有助于提高冷冻精液的受胎率和窝产仔数。

3　传染病的控制

用于采精的公猪应进行血清学检查，确保它们没有携带生殖传染病和其他有可能危害畜群健康的疾病。精液中添加抗生素可以消除非特异性和致病性细菌。控制疾病传播最有效的方法是检疫每月进场的猪群。在此期间，对观察到有疾病临床症状的公猪及时进行血清学检查。

2016-04-25

S828.3文献标识码：B

1005-2739(2016)05-0030-02