刘金武,刘 添,王子金,郭春燕,李 洁,黄春霞*(长沙医学院,湖南 长沙 410219)
南刘寄奴不同部位黄酮含量测定的分析研究
刘金武,刘 添,王子金,郭春燕,李 洁,黄春霞*
(长沙医学院,湖南 长沙 410219)
目的对南刘寄奴的茎、叶、花不同部位中的总黄酮进行含量测定。方法采用分光光度法,以芦丁为标准品对照,测定不同部位的南刘寄奴的黄酮含量。结果测得刘寄奴不同部位黄酮含量次序为:花(黄酮量229.75 mg/g;含量9.79%)>叶(黄酮量114.14 mg/g;含量6.85%)>茎(黄酮量90.17 mg/g;含量4.50%)。结论南刘寄奴中以花的黄酮含量最高,要用价值最大,其次为叶和茎。
南刘寄奴;分光光度法;黄酮;含量测定
刘寄奴为植物奇蒿的干燥部分,收录于《中国药典》2005年版附录中,别名六月霜、白花尾、千粒米、苦连婆等,为菊科蒿属(Artemisia L)植物。刘寄奴味辛微苦,性温,有破淤止痛之功[1]。刘寄奴化学成分研究文献已有报道,主要成分为黄酮、愈创木内脂类倍半萜内酯及其二聚体类和香豆素类等[2]。临床上用于溃疡性结肠炎、慢性盆腔炎治疗、冠心病、心绞痛等。现代药理学研究发现其具有抗血小板聚集、抗氧化、抑制亚硝化反应、阵痛、保肝等作用[3]。但对其各部位的定量研究分析尚未见报道,为合理开发和利用刘寄奴,为中药的开发利用提供依据,本文对南刘寄奴的茎、叶、花部位中的总黄酮进行了提取并对其含量进行测定。报道如下
1.1 仪器
采用UV-2401PC紫外可见分光光度计(日本岛津)。
1.2 试药
刘寄奴由药材市场购买,芦丁对照品(中国药品生物制品检定所提供);5%亚硝酸钠及5%硝酸铝试液(自制);4%氢氧化钠试液(自制);其余实验所用试剂均为分析纯。
2.1 样品制备
刘寄奴洗净晾干,把茎、叶、花摘取分开,放入60℃恒温干燥箱中烘10~12 h。用微型植物粉碎机将干燥后的刘寄奴粉碎,磨碎后的刘寄奴粉末放入40目筛中进行筛选,筛选后的刘寄奴粉末分别装入3个棕色试剂瓶中备用。
2.2 标准品溶液的制备
分别取芦丁标准液0、1、2、4、6、8、10 mL于7个50 mL的容量瓶中,加入5 %NaNO2溶液1.5 mL摇匀,静置6 min后,加入10%的Al(NO3)3溶液1.5 mL摇匀,放置6 min后加入1 mol/L的NaOH溶液10 mL摇匀,颜色加深,最后用30%乙醇定容,放置15~20min后在波长为510 nm处测定其吸光度,参比为空白试剂[4]。以芦丁标准品质量浓度C(mg/mL)为横坐标、吸光度A为纵坐标,建立芦丁校准曲线,并用最小二乘法作线性回归方程,得到的线性回归方程为:y=0.1089x-0.1314;R2=0.9912。见图1。
图1 芦丁对照品标准曲线示意图
2.3 样品测定
用电子分析天平从3个棕色试剂瓶中分别称取2.00 g刘寄奴的茎、叶、花不同部位干燥粉末,置索氏提取器中,加乙醚300 mL加热回流至提取液无色,放冷后弃取乙醚液,加85%浓度的乙醇各200 mL,加热回流至提取液无色,放冷后过滤于200 mL量瓶中定容[5]。各吸5 mL提取液置50 mL量瓶中,加50%乙醇稀释到刻度。再各取2 mL置25量瓶中,按标准曲线下操作,测定总黄酮的含量。见表1。
表1 刘寄奴样品黄酮含量测定结果
黄酮类化合物参与了钙离子的转移、磷酸和花生四烯酸的代谢、蛋白质的磷酸化、自由基的清除、氧化还原作用、抗氧化活力的增强、螯合作用和基因的表达。自然界中最常见的是黄酮醇和黄酮,天然来源的黄酮分子量小,人体能够迅速吸收,能透过血脑屏障和进入脂肪组织,有消除疲劳、保护心血管、防动脉硬化、疏通微循环、扩张毛细血管、活化大脑及其他脏器细胞以及抗脂肪氧化和抗衰老等功能。
用分光光度法测定刘寄奴中的总黄酮含量,以芦丁为对照品,方法简便可靠。根据测定结果,刘寄奴各部黄酮含量中花的含量最高,叶次之,茎的含量最低。证实花的药价值最大,建议刘寄奴宜花期时节采收,在药材收购时应引起注意,临床用药时也应该甄别不同部位刘寄奴的药物浓度不同,根据各部位黄酮含量来调整剂量。
[1] 张 琳,李宝国,等.南刘寄奴黄酮类成分的研究[J].中国药学杂志,2010,45(2):104-107.
[2] Zan K,Chen X Q,Tu P F,A new 1,10-secoguaianolide from the aerial parts of Artemisia anomala[J].Chin J Nat Med,2012,10(5): 358-362.
[3] 年 华,郑汉臣,等.刘寄奴黄酮类成分研究[J].中国中药杂志,2010,35(14):18-27.
[4] 胡 帅,张 骋,等.不同黄秋葵花中总黄酮的提取和含量测定[J].激光生物学报,2013,22(4):375-378.
[5] 吴巧凤,缪才刚.六月霜不同采收时期及各部位的总黄酮考察[J].中国现代应用药学,2001,18(2):100-101.
本文编辑:吴宏艳
Study on the determination of favonoids in different parts of Nan Liu slave
LIU Jin-wu, LIU Tian, WANG Zi-jin, GUO Chun-yan, LI jie, HUANG You-xia
(Changsha Medical University,Hunan Changsha 410219,China)
R282.71;R927
B
ISSN.2095-6681.2016.25.025.02
黄春霞,女,硕士,副教授
长沙医学院2015年大学生研究性学习和创新性实验计划项目长医教[2015]-15号—90