猪蓝耳病的症状及ELISA诊断

尚月军

（青海省乡镇企业技术推广站，青海 西宁 810008）

猪蓝耳病的症状及ELISA诊断

尚月军

（青海省乡镇企业技术推广站，青海 西宁 810008）

猪蓝耳病，即猪繁殖与呼吸综合征（Porcine reproductive and respiratory syndrome，PRRS），是由猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）感染所致，传播方式为接触传染，对我国乃至全球养猪业造成了严重的经济损失。自1987年首次在美国发现至今，仅在美国每年造成的直接经济损失估计可达6.64亿美元。我国1996年首次出现PRRS相关报道，陆续也出现大规模暴发，并造成较大损失。因此，早期识别病症尽早诊断并采取措施，是控制蓝耳病发病，减少损失的有力措施。本文就PRRS临床症状、解剖及病理特征、ELISA检测方法做一介绍。

1　临床症状

妊娠母猪、仔猪是PRRS高发群体，其发病因地域、季节、群体不同有很大差异。待产母猪主要表现为精神沉郁、食欲减退并伴有发热现象，出现轻度呼吸窘迫，妊娠晚期出现早产、流产、死胎等症状。仔猪表现为皮肤苍白或黄疸，继续发展皮肤变为青紫色，出现呼吸困难，有时呈腹式呼吸，体温升高，食欲减退，消瘦，咳嗽等病症，其耳朵为蓝紫色，疾病持续发展会出现腹泻，最终死亡。根据临床症状诊断PRRS指标包括：（1）流产、早产率在80%以上；（2）死胎率在20%以上；（3）新生仔猪1周内死亡率在25%以上。

2　解剖及病理诊断

PRRSV感染猪群病理学特征主要为：皮肤发黄；胸腔、腹腔积水；肺部出现弥漫性间质肺炎，伴少量纤维素渗出，触感硬实，肺泡间隔增厚，肺泡腔内有坏死细胞碎片；心内膜充血，心冠脂肪有浸润现象；肾脏肿大，有灰白色斑点，部分伴有针尖状出血点；肝脏出现空泡样病变；鼻孔、气管、喉头等有泡沫；淋巴结肿大、多汁；肠内容物稀薄，有充血现象。

3　ELISA诊断

酶联免疫吸附试验（Enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）是PRRS的常用免疫学检测方法之一，其特异性可高达99.9%，敏感性可高达98.8%。目前常用ELISA检测试剂盒主要原理为将特定的抗原包被于微孔板，加入待测样本血清，抗原可捕获血清中抗猪蓝耳病病毒抗体，随后使用辣根过氧化物酶标记的二抗捕获抗猪蓝耳病病毒抗体，最后显色鉴定阳性样本。

用于包被的抗原主要有两类，分别是核衣壳蛋白（N蛋白）和膜蛋白（GP5、M蛋白）。前者主要用于早期自然或人工感染PRRSV的免疫学诊断，不适于免疫后已携带抗体的猪群；后者可用于疫苗免疫后猪群保护性抗体的检测以及仔猪母源抗体检测。N蛋白在PRRSV中含量高，最高能占到病毒总蛋白的40%。此外其具有多个抗原表位，免疫原性强，因此试剂盒中选择N蛋白作为ELISA检测的包被抗原。病毒感染早期机体主要针对N蛋白产生免疫应答，分泌非中和性抗体。尽管N蛋白抗体产生最早，但其持续时间很短，仅有2个月左右，且与机体抗病毒感染能力无关。M蛋白和GP5蛋白诱导机体产生抗体时间较N蛋白晚，M蛋白保守性较高，属非糖基化蛋白，GP5为囊膜糖蛋白，两种蛋白均含有主要中和表位，可刺激机体分泌中和抗体。虽然其出现时间较N蛋白晚，但维持时间久，在体内可持续存在4～5个月，为机体提供抗病毒能力。因此，在PRRSV检测中应根据需要选择适宜的ELISA种类，例如疫情监测，早期感染的诊断宜采取N蛋白包被的ELISA检测试剂盒，而用于疫苗免疫效果及猪群抗体变化情况的检测宜选用膜蛋白包被的ELISA检测试剂盒。

ELISA方便、快捷，特异性及敏感度较高，适合定性分析，但其用于定量分析准确性较差，且受环境及人工操作影响较大，如饲料、水源等抗体污染也会导致假阳性产生，从而干扰检测结果。

4　小　结

在PRRS疫情来临时，控制PRRS的有效方法是早发现，早隔离，并采取积极的治疗手段。因此常规监测、临床症状观察及疾病诊断是基层兽医工作者需掌握的必要知识及手段。虽然诊断技术、剖检及病理特征、临床特征检查等已较为成熟，但其检测率仍不能达到100%，对高致病性PRRSV，还需兽医工作者在实际中积累更加丰富的临床经验，提高管理和监控水平，预防疫情的发生并能在疫情发生时快速应对。此外，不断引入新的检测和治疗手段也是预防和控制疾病的必要工作。

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10.3969/J.ISSN.1671-6027.2016.09.073

尚月军（1984～），本科，助理兽医师，主要从事青海省乡镇企业技术推广工作