赤胫散的化学成分研究

周志红，梁敬钰，阳利龙，李双杰，赵　昕，蒋志平，何周康*

(1.湖南省儿童医院，长沙　410007；2.中国药科大学，南京　210009)



赤胫散的化学成分研究

周志红1，梁敬钰2，阳利龙1，李双杰1，赵昕1，蒋志平1，何周康1*

(1.湖南省儿童医院，长沙410007；2.中国药科大学，南京210009)

摘要：目的研究赤胫散的化学成分。方法利用多种色谱方法对赤胫散进行系统的化学成分研究，应用波谱学技术和理化常数对照等方法鉴定其结构。结果从赤胫散干燥根分离鉴定12个化合物：没食子酸(1)；3,3′-二甲基鞣花酸(2)；3,3′,4′-三甲基鞣花酸(3)；3,3′-二甲基鞣花酸-4′-O-β-D-葡萄糖苷(4)；3-甲基鞣花酸-4′-O-α-L-吡喃鼠李糖苷(5)；3,3′-二甲基鞣花酸-4′-O-(6″-没食子酰基)-β-D-葡萄糖苷(6)；短叶苏木酚(7)；短叶苏木酚酸乙酯(8)；短叶苏木酚酸(9)；二十四烷酸(10)；β-谷甾醇(11)；β-胡萝卜苷(12)。结论化合物5, 7, 8, 9, 10和11为首次从该植物中分离得到。

关键词：赤胫散；酚酸；化学成分

赤胫散为蓼科蓼属植物缺腰叶蓼(PolygonumruncinatumBuch.-Ham. ex D. Don)或华缺腰叶蓼(PolygonumruncinatumBuch.-Ham. ex D. Don var. sinense Hemsl)的干燥根茎，别名花蝴蝶、花脸荞、散血莲、土三七、血当归、血见草等，根及全草入药；性寒，味苦、涩，无毒，归肝、心、胃、大肠经；主治痢疾、泄泻、吐血咯血、痔疮出血、赤白带下、毒蛇咬伤、劳伤腰痛及跌打损伤等，外用治乳腺炎、痈疖肿毒等，具有清热解毒、活血、舒筋、消肿之功效[1-3]。现代药理学研究表明，赤胫散的醇提物水溶液对G-志贺氏痢疾杆菌具有明显的抑制作用[4]，其醇提物具有较强的抗氧化活性[5]。文献报道赤胫散中主要含有酚酸及挥发油类成分[6-8]，其中没食子酸具有抗肿瘤、抗菌、抗氧化等功效[9]，鞣花酸类化合物具有抗肿瘤、抗氧化等作用[10]。为进一步研究赤胫散的药效物质基础，本实验对赤胫散乙醇提取物进行了系统研究，分离鉴定了12个化合物，分别为没食子酸(gallic acid, 1)；3,3′-二甲基鞣花酸(3,3′-di-O-methylellagic acid, 2)；3,3′,4′-三甲基鞣花酸(3,3′4′-tri-O-methylellagic acid, 3)；3,3′-二甲基鞣花酸-4′-O-β-D-葡萄糖苷(3,3′-di-O-methylellagic acid-4′-O-β-D-glucopyranoside, 4)；3-甲基鞣花酸-4′-O-α-L-吡喃鼠李糖苷(3-O-methylellagic acid-4′-O-α-L-rhamnopyranoside, 5)；3,3′-二甲基鞣花酸-4′-O-(6″-没食子酰基)-β-D-葡萄糖苷(3,3′-dimethylellagic acid-4′-O-(6″-galloyl)-β-D-glucoside,6)；短叶苏木酚(brevifolin, 7)；短叶苏木酚酸乙酯(ethyl brevifolin-carboxylate, 8)；短叶苏木酚酸(brevifolin-carboxylic acid, 9)；二十四烷酸(tetracosanoic acid, 10)；β-谷甾醇(β-sitosterol, 11)；β-胡萝卜苷(β-daucosterin, 12)。其中化合物5，7， 8， 9， 10和11为首次从该植物中分离得到。

1仪器与材料

1.1仪器ZF-20C暗箱式紫外分析仪(杭州大卫科教仪器有限公司)；HP-100型质谱仪(LC/MSD System, ESI Mode)；Brucker ACF-300, 500 型核磁共振波谱仪(瑞士Brucker公司)；X-4型双目镜显微熔点测定仪(北京泰克仪器有限公司)。

1.2材料薄层色谱硅胶GF254柱色谱硅胶(青岛海洋化工厂)；葡聚糖凝胶Sephadex LH-20(Pharmacia 公司)；聚酰胺(浙江省台州市路桥四甲生化塑料厂)；所用试剂均为分析纯(南京化学试剂厂)；实验药材产于福建，经中国药科大学濮社班副教授鉴定为赤胫散，为蓼科植物华缺腰叶蓼Polygonum runcinatum Buch.-Ham. ex D. Don var. sinense Hemsl的干燥根茎。

2提取分离

取赤胫散的干燥根1.25 kg，粉碎，用体积分数为80%的乙醇浸泡24 h后回流提取4次(每次4 h)，合并提取液，回收溶剂至无醇味；依次用等体积的二氯甲烷、乙酸乙酯和正丁醇萃取4次，回收溶剂，得相应浸膏。二氯甲烷浸膏(5 g)过正相硅胶柱，采用二氯甲烷/甲醇洗脱，流份再过Sephadex LH-20凝胶柱，得到：化合物2(16 mg),3(10 mg),10(3 mg),11(8 mg),12(21 mg)；乙酸乙酯浸膏(20 g)使用大孔吸附树脂D101进行粗分，用乙醇-水梯度洗脱，流份进一步通过硅胶、聚酰胺、Sephadex LH-20凝胶柱色谱及重结晶等方法，得到：化合物1(4 mg),4(23 mg),5(8 mg),6(3 mg),7(9 mg),8(12 mg),9(10 mg)。

3结构鉴定

化合物1无色透明针状晶体(甲醇)。ESI-MSm/z: 168.8 [M-H]-,124.8[168.8-CO2]-;1H-NMR (500 MHz,DMSO-d6)δ: 12.17 (1H,brs,COOH),9.13 (3H,brs,3,4,5-OH),6.92 (2H,s,H-2,6)。其数据与文献[11]报道的没食子酸基本一致，故鉴定该化合物为没食子酸 (gallic acid)。

化合物2黄色针晶 (DMSO)。ESI-MSm/z: 329.0[M-H]-,313.9[329.0-CH3]-;1H-NMR (300 MHz,DMSO-d6)δ: 10.73 (2H,s,4,4′-OH),7.52 (2H,s,H-5,5′),4.04 (6H,s,3,3′-OCH3);13C-NMR (75 MHz,DMSO-d6)δ: 158.4 (2C,C-7,7′),152.2 (2C,C-4,4′),141.2 (2C,C-2,2′),140.2 (2C,C-3,3′),112.1 (2C,C-6,6′),111.6 (2C,C-1,1′),111.4 (2C,C-5,5′),60.9 (2C,3,3′-OCH3)。其数据与文献[12]报道的3,3′-二甲基鞣花酸基本一致，故鉴定该化合物为3,3′-二甲基鞣花酸(3,3′-di-O-methylellagic acid)。

化合物3黄白色固体(甲醇)。ESI-MSm/z: 343.0 [M-H]-,327.9[343.0-CH3]-;1H-NMR (300 MHz,DMSO-d6)δ:10.77 (1H,s,4′-OH),7.64 (1H,s,H-5′),7.54 (1H,s,H-5),4.06 (3H,s,3′-OCH3)；4.05 (3H,s,3-OCH3)；4.00 (3H,s,4′-OCH3); 13C-NMR (75 MHz,DMSO-d6)δ: 158.5 (C-7′),158.3 (C-7),153.8 (C-4′),152.7 (C-4),147.6 (C-2′),140.9 (C-2),140.8 (C-3′),140.2 (C-3),113.4 (C-6′),112.5 (C-1′),111.9 (C-6),111.7 (C-5),111.2 (C-1),107.5 (C-5′),61.2 (3′-OCH3),60.9 (3-OCH3),56.7 (4′-OCH3)。其数据与文献[13]报道的3,3′,4′-三甲基鞣花酸基本一致，故鉴定该化合物为3,3′,4′-三甲基鞣花酸(3,3′4′-tri-O-methylellagic acid)。

化合物4白色固体(甲醇)。ESI-MS m/z: 491.1 [M-H]-,476.0 [491.1-CH3]-,327.9[491，1-C6O5H11]-,312.9 [491.1-C6O5H11-CH3]-; 1H-NMR (300 MHz,DMSO-d6)δ: 10.78 (1H,s,4-OH),7.81 (1H,s,H-5′),7.51 (1H,s,H-5),5.14 (1H,brs,H-1″),4.09 (3H,s,3′-OCH3),4.05 (3H,s,3-OCH3);13C-NMR (75 MHz,DMSO-d6)δ: 158.4 (C-7′),158.3 (C-7),152.8 (C-4′),151.6 (C-4),141.81 (C-2′),141.6 (C-2),140.9 (C-3′),140.2 (C-3),114.1 (C-6 ′),112.7 (C-1′),111.9 (C-6),111.9 (C-5),111.6 (C-5′),111.1 (C-1),101.4 (C-1″),77.3 (C-3″),76.5 (C-5″),73.3 (C-2″),69.5 (C-4″),61.7 (3′-OCH3),61.0 (3-OCH3),60.6 (C-6″)。其数据与文献[14]报道的3,3′-二甲基鞣花酸-4′-O-β-D-葡萄糖苷基本一致，故鉴定该化合物为3,3′-二甲基鞣花酸-4′-O-β-D-葡萄糖苷(3,3′-di-O-methylellagic acid-4′-O-β-D-glucopyranoside )。

化合物5白色固体(甲醇)。ESI-MSm/z: 460.9[M-H]-,447.0[460.9-CH3]-,314.8[460.9-C6O4H10]-,299.8[460.9-C6O4H10-CH3]-;1H-NMR (300 MHz,DMSO-d6)δ: 11.10 (1H,s,3′-OH),10.78 (1H,s,4-OH),7.75 (1H,s,H-5′),7.54(1H,s,H-5),4.04 (3H,s,3-OCH3),5.48 (1H,brs,H-1″),4.00 (1H,brs,H-2″),3.84 (1H,m,H-3″),3.32 (1H,m,H-4″),3.54 (1H,m,H-5″),1.13 (3H,d,J=7.5 Hz,H-6″);13C-NMR (75 MHz,DMSO-d6)δ: 158.7(C-7′),158.7(C-7),152.7(C-4),146.4 (C-4′),141.8(C-3′),140.1 (C-3),140.1(C-2′),136.2(C-2),113.0(C-6′),111.6 (C-1′),111.6 (C-5′),111.4 (C-1),111.3 (C-5),107.1 (C-6),100.1(C-1″),71.7(C-4″),70.0(C-3″),69.9 (C-2″),69.8(C-5″),60.9(3-OCH3),17.8 (C-6″)。其数据与文献[11]报道的3-甲基鞣花酸-4′-O-α-L-吡喃鼠李糖苷基本一致，故鉴定该化合物为3-甲基鞣花酸-4′-O-α-L-吡喃鼠李糖苷(3-O-methylellagic acid-4′-O-α-L-rhamnopyranoside)。

化合物6黄色粉末 (DMSO)。ESI-MSm/z: 643.0 [M-H]-;1H-NMR (300 MHz,DMSO-d6)δ: 7.54 (1H,s,H-5),7.81 (1H,s,H-5′),5.29 (1H,d,J=6.0 Hz,H-1″),3.41 (1H,brs,H-2″),3.41 (1H,brs,H-3″),3.41(1H,brs,H-4″),3.81 (1H,d,J=4.1 Hz,H-5″),4.47 (1H,d,J=10.2 Hz,H-6a″),4.28 (1H,dd,J=12.0,4.8 Hz,H-6b″),6.87 (2H,s,H-2‴,6‴),4.06 (6H,s,3,3′-OCH3); 13C-NMR (75 MHz,DMSO-d6)δ: 112.0 (C-1),141.7(C-2),140.2(C-3),152.8(C-4),111.6 (C-5),111.1(C-6),158.3 (C-7),112.7 (C-1′),141.0 (C-2′),141.9 (C-3′),151.2 (C-4′),112.1 (C-5′),114.3(C-6′),158.4 (C-7′),101.2(C-1″),73.3 (C-2″),76.1(C-3″),69.5(C-4″),73.9(C-5″),63.0(C-6″),119.2(C-1‴),108.6(C-2‴,6‴),145.3 (C-3‴,5‴),138.4 (C-4‴),165.7(C-7‴),61.0 (3-OCH3),61.6(3′-OCH3)。其数据与文献[7]报道的3,3′-二甲基鞣花酸-4′-O-(6″-没食子酰基)-β-D-葡萄糖苷基本一致，故鉴定该化合物为3,3′-二甲基鞣花酸-4′-O-(6″-没食子酰基)-β-D-葡萄糖苷(3,3′-dimethylellagic acid-4′-O-(6″-galloyl)-β-D-glucoside)。

化合物7黄色针状固体(甲醇)。ESI-MSm/z: 246.8[M-H]-，1H-NMR (500 MHz,DMSO-d6)δ: 9.80 (3H,brs,4,5,6-OH),7.28(1H,s,H-7),3.48 (2H,m,H-10),2.50(2H,m,H-9);13C-NMR(125 MHz,DMSO-d6)δ: 195.5(C-11),160.5(C-8),149.3(C-2),145.0(C-4),144.2(C-6),141.3(C-5),140.1(C-3a),115.5(C-3),113.2(C-7a),108.0(C-7),33.0(C-10),23.8(C-9)。其数据与文献[15]报道的短叶苏木酚基本一致，故鉴定该化合物为短叶苏木酚(brevifolin)。

化合物8黄色粉末(甲醇)。ESI-MSm/z:318.9 [M-H]-;1H-NMR(300 MHz,DMSO-d6)δ:10.14(3H,brs,4,5,6-OH),7.30(1H,s,H-7),4.40(1H,dd,J=7.7 Hz,2.0 Hz,H-9),2.98 (1H,dd,J=18.7 Hz,7.9 Hz,H-10),2.44 (1H,dd,J=18.7 Hz,2.0 Hz,H-10),4.08 (2H,q,J=8.0 Hz,H-2′),1.17 (3H,t,J=8.0 Hz,H-3′);13C-NMR (75 MHz,DMSO-d6)δ: 193.0 (C-11),160.1(C-8),149.6 ( C-6),145.8(C-2),143.6(C-4),140.2(C-5),138.5 (C-3),114.9(C-3a),113.0(C-7a),108.0(C-7),40.7 (C-9),37.0 (C-10),172.0 (C-1′),60.6 (C-2′),13.9 (C-3′)。其数据与文献[16]报道的短叶苏木酚酸乙酯基本一致，故鉴定该化合物为短叶苏木酚酸乙酯(ethyl brevifolin-carboxylate)。

化合物9黄色粉末(甲醇)。ESI-MSm/z:290.9[M-H]-,246.8[M-COO]-;1H-NMR(300 MHz,DMSO-d6)δ: 10.83 (1H,s,4-OH),10.05 (2H,s,5,6-OH),7.30(1H,s,H-7),4.36 (1H,dd,J=7.6,1.6 Hz,H-9),2.99(1H,dd,J=18.7,7.9 Hz,H-10),2.43(1H,dd,J=18.7,1.6 Hz,H-10),12.47(1H,brs,9-COOH);13C-NMR (75 MHz,DMSO-d6)δ: 193.0(C-11),160.2(C-8),149.5(C-6),145.7(C-2),143.8(C-4),140.2 (C-5),139.0(C-3),115.1(C-3a),113.0(C-7a),108.0(C-7),48.6(C-9),37.4(C-10),173.4(9-COOH)。其数据与文献[15]报道的短叶苏木酚酸基本一致，故鉴定该化合物为短叶苏木酚酸(brevifolin-carboxylic acid)。

化合物10白色固体(甲醇)。ESI-MSm/z:367.3[M-H]-;1H-NMR(300 MHz,DMSO-d6)δ:11.90(1H,s,H-1),2.18(2H,t,J=8.5 Hz,H-2),1.48(2H,m,H-23),1.23(40H,s,H-3～22),0.85(3H,t,J=8.5 Hz,H-24)。其数据与文献[17]报道的二十四烷酸基本一致，故鉴定该化合物为二十四烷酸(tetracosanoic acid)。

化合物11白色片状结晶(二氯甲烷)，Liebermann-Burchard反应阳性，Molish反应阴性，提示该化合物为三萜或甾体类。其与β-谷甾醇对照品对照，3种溶剂系统展开，10 g·L-1香草醛浓硫酸溶液105 ℃喷雾显色，在同Rf值处有同样紫色斑点。且其与β-谷甾醇对照品混合后熔点不下降。故鉴定该化合物为β-谷甾醇 (β-sitosterol)。

化合物12白色絮状固体(二氯甲烷/甲醇)，无暗斑、无荧光、有碘斑， Liebermann-Burchard反应阳性，Molish反应阳性，提示化合物为三萜或甾体皂苷。其与β-胡萝卜苷对照品对照，3种溶剂系统展开，10 g·L-1香草醛浓硫酸溶液105 ℃喷雾显色，在同Rf值处有同样紫色斑点。且其与β-胡萝卜苷对照品混合后熔点不下降。故鉴定该化合物为β-胡萝卜苷 (β-daucosterin)。

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Chemical constituents fromPolygonumruncinatumBuch.-Ham. var. sinense Hemsl

ZHOU Zhihong1, LIANG Jingyu2, YANG Lilong1, LI Shuangjie1, ZHAO Xin1, JIANG Zhiping1, HE Zhoukang1*

(1.Hu′nan Children′s Hospital, Changsha 410007, China；2.China Pharmaceutical University, Nanjing 210009, China)

Abstract:ObjectiveTo study the chemical constituents of Polygonum runcinatum Buch.-Ham. var. sinense Hemsl. MethodsThe chemical constituents of the extract from the roots of Polygonum runcinatum were investigated by various chromatographic techniques, all structures were established by spectroscopic methods and comparison with previously reported data. Results12 compounds were obtained and identified, including: gallic acid (1), 3,3′-di-O-methylellagic acid (2), 3,3′4′-tri-O-methylellagic acid(3), 3,3′-di-O-meth-ylellagic acid-4′-O-β-D-glucopyranoside(4), 3-O-methylellagic acid-4′-O-α-L-rham-nopyranoside(5),3,3′-dimethylellagicacid-4′-O-(6″-galloyl)-β-D-glucoside (6), bre-vifolin (7), ethyl brevifolin-carboxylate(8),brevifolin-carboxylic acid (9),tetr-acosanoic acid (10), β-sitosterol (11), and β-daucosterin (12). ConclusionCompounds 5, 7, 8, 9, 10 and 11 were obtained from this plant for the first time.

Key words:hematite；phenolic acids；chemical constituents

(收稿日期：2015-07-11)

中图分类号：R284

文献标志码：A

文章编号：1004-2407(2016)03-0235-05

doi:10.3969/j.issn.1004-2407.2016.03.005

*通信作者：何周康，男，副主任药师

作者简介：周志红，女，硕士研究生