高透明度脱色鱿鱼皮胶原的制备工艺研究

廖妙飞,付万冬,*,杨会成,张伟杰,郑 斌,钟明杰

(1.浙江省海洋开发研究院,浙江舟山 316021;2.兰州理工大学生命科学与工程学院,甘肃兰州 730050)

高透明度脱色鱿鱼皮胶原的制备工艺研究

廖妙飞1,付万冬1,*,杨会成1,张伟杰2,郑 斌1,钟明杰1

(1.浙江省海洋开发研究院,浙江舟山 316021;2.兰州理工大学生命科学与工程学院,甘肃兰州 730050)

为了提高鱿鱼皮胶原蛋白的透明度和应用价值,本文利用双氧水对鱿鱼皮胶原蛋白进行脱色工艺优化研究。酶解提取得到的鱿鱼皮胶原蛋白通过单因素实验和正交实验,以胶原蛋白回收率和胶原蛋白脱色率为指标,确定了最佳胶原蛋白回收和脱色工艺条件为双氧水浓度0.6%,pH8,温度55 ℃,脱色时间7 h。在最佳的蛋白回收和脱色工艺条件下,胶原蛋白的脱色率和蛋白回收率分别为78.76%和88.29%。因此,本研究所得胶原蛋白回收和脱色效果较好,具有潜在的应用前景

鱿鱼皮,胶原,H2O2溶液,脱色率,蛋白提取率

胶原蛋白(Collagen)是一种纤维蛋白,约占动物体内所有蛋白质的30%,其分子组成特征是若干个Gly-X-Y序列重复和由三条多肽链构成的独特三螺旋结构,至今,已发现27种类型的胶原[1-2]。胶原蛋白及其降解产物因具有良好的物理性能和生物学特性,在化工、食品、医学、生物材料以及农业等领域有着广泛的应用[3-4]。

陆地哺乳动物如牛、猪皮等得到了较好的利用,而水产加工废弃物利用较少。目前全世界胶原的年产量超过24×104t,但生产这些胶原的原料基本上是牛、猪皮及哺乳动物的骨。由于近年来发生了BSE、口蹄疫以及猪链球菌病等危机,寻找牛、猪皮以外的胶原蛋白原料成为当务之急,而水产加工废弃物尤其是鱼皮是理想和现实的替代原料[5-6]。来源于水产动物的胶原蛋白明显优于牛、猪皮陆地哺乳动物的胶原蛋白的特性,比如低抗原性、低过敏性、易酶解被机体消化吸收等,此外,国内外大量研究还报道水产胶原蛋白水解液具有抗氧化、降血压、调血脂、提高免疫力等生理活性[7-10]。因此,从水产加工废弃物中提取胶原蛋白并利用先进的现代生物技术,开发胶原多肽,生产具有各种生理功能的活性肽,既能促进水产加工废弃物的综合利用,降低水产加工的成本,对水产业的发展提供更加广阔的前景[11-15]。鱿鱼(Squid)属海洋头足类,无脊椎软体动物,富含蛋白质、脂肪、矿物质及维生素等多种营养成分营养成分,是我国一种非常重要的水产品加工原料。我国鱿鱼的大规模捕捞和加工始于上世纪九十年代,目前,我国的鱿鱼加工总量达20万吨左右,鱿鱼加工副产物占体重的20%左右,包括内脏、皮、鳍部和墨囊等,其中,鱿鱼皮占副产物的10%左右,其含有约80%的胶原蛋白[16-18]。目前,鱿鱼皮提取的胶原蛋白制品存在的主要问题之一是胶原蛋白产品颜色太深,限制其应用价值[19-21]。胶原蛋白提取物的脱色方法有活性炭法、双氧水法和树脂脱色法。活性炭脱色产品颜色较重,且脱色后溶液中的活性炭残渣难于完全除去;树脂脱色效果最好,脱色工艺简单,但树脂价格较高,一次性投资较大,且需再生使用,生产周期较长,适合少量样品的脱色,不适合工业化大生产;双氧水脱色操作简便,脱色效果较好,产品颜色较浅,但对胶原蛋白具有较强的氧化作用,在使用时一定要控制好条件。有报道关于水产胶原脱色脱腥工艺的研究,也取得一些研究成果[22-24]。双氧水脱色具有脱色效率高、操作简单、快捷的特点。为此,本文以废弃物鱿鱼皮为原料提取鱿鱼皮胶原蛋白,利用双氧水溶液对胶原蛋白进行脱色优选,以期找到适合工业化生产的最佳脱色工艺,为扩大鱿鱼皮胶原蛋白的应用范围,提高鱿鱼加工的经济效益,鱿鱼的综合开发提供新途径。

1 材料与方法

1.1 材料与仪器

本研究的鱿鱼皮 取自浙江兴业集团有限公司;双氧水、对二甲基氨基苯甲醛、氯胺T、柠檬酸、高氯酸、NaOH、正丁醇、盐酸、L-羟脯氨酸、无水乙醇、浓硫酸和考马斯亮蓝G250等 均购自国药集团化学试剂有限公司;蛋白酶(胃蛋白酶(10万U/g)、胰蛋白酶(10万U/g)、中性蛋白酶(10万U/g)和酸性蛋白酶(10万U/g)) 购自诺维信(中国)生物技术有限公司。

DHG-9075A型电热恒温鼓风干燥箱 上海精宏实验设备有限公司;JJ-1精密增力电动搅拌器 国华电器有限公司;KDN-08C定氮仪 上海新嘉电子有限公司;数显恒温水浴锅HH-4 上海博讯实业有限公司;JJ-2组织捣碎匀浆机 金坛市精达仪器制造厂;超声波清洗机 上海新芝电子有限公司;UV-2102C紫外可见分光光度计 上海尤尼珂仪器有限公司;BS124S天平 赛多利斯科学仪器有限公司;TC-15套式恒温器 海宁新华医疗器械厂;旋转蒸发器 上海亚荣生化仪器厂;XW-80A漩涡混合器 上海青浦沪西仪器厂;DELTA320 pH计 梅特勒-托利多仪器有限公司;冰箱 青岛海尔股份有限公司;EYELA冷冻干燥机 上海爱朗仪器有限公司;SP64色差仪 爱丽色有限公司。

1.2 实验方法

1.2.1 胶原蛋白的提取

1.2.1.1 鱿鱼皮的处理 将鱿鱼皮解冻后,用自来水清洗,并剪成约4 mm×4 mm的小方块,用10%正丁醇在4 ℃搅拌24 h,去除脂类物质,用5倍鱿鱼皮体积的蒸馏水清洗5次;将上述预处理的鱿鱼皮用0.05 mol/L的NaOH(W/V=1∶30)溶液于4 ℃浸泡12 h,每6 h换液一次,浸泡后用蒸馏水清洗鱿鱼皮至中性,沥干水分得到处理好的鱿鱼皮。

1.2.1.2 单酶水解实验 按照1∶10(W/W)的比例将鱿鱼皮与水置于反应器中,加酶量为鱿鱼皮重量的1%(W/W),酶解温度为55 ℃,酶解时间为90 min,胃蛋白酶和酸性蛋白酶酶解pH为3.0,中性蛋白酶酶解pH为7.0,胰蛋白酶酶解pH为8.0;酶解完成后在沸水浴中灭活10 min,冷却后用0.1 mol/L NaOH调pH至7.0,将提取液用双层纱布过滤;滤液冷冻干燥得到未脱色鱿鱼皮胶原蛋白。

1.2.2 胶原蛋白脱色单因素实验

1.2.2.1 H2O2溶液浓度对脱色效果的影响 取6份15 mL酶解液,分别加30% H2O2溶液至H2O2浓度为0.2%、0.4%、0.6%、1.0%、1.5%和2.0%,用1 mol/L NaOH调节pH至7,置于25℃水浴中反应3 h。用色差仪测定色差值ΔE,计算脱色率;用分光光度计测定595 nm处的吸光度A595 nm,计算蛋白提取率。

1.2.2.2 pH对脱色效果的影响 取6份15 mL酶解液,加入30% H2O2溶液至H2O2浓度为0.6%,再分别用1 mol/L NaOH调节pH至4、5、7、8、9、10,置于25 ℃水浴中反应3 h。用色差仪测定色差值ΔE,计算脱色率;用分光光度计测定595 nm处的吸光度A595 nm,计算蛋白提取率。

1.2.2.3 温度对脱色效果的影响 取6份15 mL酶解液,加入30% H2O2溶液至H2O2浓度为0.6%,用1 mol/L NaOH调节pH至8,分别置于25、35、45、50、55和65 ℃水浴中反应3 h。用色差仪测定色差值ΔE,计算脱色率;用分光光度计测定595 nm处的吸光度A595 nm,计算蛋白提取率。

1.2.2.4 时间对脱色效果的影响 取6份15 mL酶解液,加入30% H2O2溶液至H2O2浓度为0.6%,用1 mol/L NaOH调节pH至10,置于55 ℃水浴中分别反应3、4、5、6、7和8 h。用色差仪测定色差值ΔE,计算脱色率;用分光光度计测定595 nm处的吸光度A595 nm,计算蛋白提取率。

1.2.3 正交实验 由于酶解液在300～800 nm波长内无吸收峰,因此无法利用在某一波长处脱色前后的吸光度变化作为脱色的评价标准,为此选取色差变化率为脱色指标。采用最优酶解工艺处理的酶解液进行离心过滤得上清液,利用双氧水脱色时考察双氧水用量、pH、温度、脱色时间4因素,进行正交实验;以色差仪测量脱色前后的色差变化率和多肽损失率为指标确定脱色效果,探究脱色的最优条件,并对最优的条件进行验证。按照正交表L9(34)安排4因素3水平的正交实验,见表1。

表1 正交实验水平因素表

1.2.4 标准曲线的制作 分别取六只试管,其中一只加入1.0 mL蒸馏水做空白,5只分别加入0.125、0.25、0.5、0.75和1 mL浓度为160 μg/mL小牛血清蛋白标准液,补充蒸馏水到1.0 mL。然后每只试管加入5.0 mL考马斯亮蓝G-250试剂,摇匀放置5 min,在595 nm处测定吸光值。以A595 nm吸光值为纵坐标,小牛血清蛋白的浓度为横坐标绘制标准曲线。

回归方程为Y=0.0019X+0.005,相关显著性R2=0.9991。则原液中蛋白含量为a=Aa×0.0019+0.005,处理后溶液中蛋白含量为b=Ab×0.0019+0.005。则蛋白提取率计算公式为:

式中,c-蛋白提取率,%;a-原液中蛋白含量,μg/mL;b-处理后溶液中蛋白含量,μg/mL。

1.2.5 胶原含量、脱色率和分子量测定

1.2.5.1 胶原蛋白含量测定 配制浓度约200μg/mL的待测蛋白质溶液,取一只试管加入1.0mL蒸馏水做空白,一支加入0.5mL待测蛋白质溶液,补充蒸馏水到1.0mL,然后每支试管加入5.0mL考马斯亮蓝G-250试剂,摇匀放置5min后,在595nm处测定吸光值。取经过处理的鱿鱼皮1g,加入6mol/L的盐酸5mL。于沸水浴中加热8h水解后,用蒸馏水补全6mL。吸取溶液1mL,稀释50倍,调节pH=6,取1mL稀释液,测定吸光度。根据标准曲线和稀释倍数,计算含量。

取酶解液上清液5mL,加入6mol/L的盐酸5mL,置于沸水浴中水解4h,蒸馏水补足10mL。取1mL水解液用蒸馏水定容至100mL,取其中1mL溶液于试管中,进行羟脯氨酸含量测定。

胶原蛋白比率(%)=样品中羟脯酸含量×14.1/样品质量×100

胶原蛋白提取率(%)=样品中胶原蛋白质量/样品质量×胶原蛋白比率×100

1.2.5.2 胶原蛋白脱色率测定 用色差仪测定样品脱色率由色差值ΔE来计算,即脱色率计算公式为:

式中,d-脱色率,%;ΔE原-原液色差值;ΔE样-处理后溶液色差值。

1.2.5.3 胶原相对分子量测定 分别进行配制12%的SDS-PAGE分离胶和5%的浓缩胶,等胶凝固后小心取出梳子,滤纸吸干水分。配置好的胶板装进垂直电泳槽中,加入SDS-电极缓冲液,充满整个胶板。取事先用样品缓冲液配置的不同蛋白样品进行不同卡槽加样后,在电极缓冲液中加入几滴溴酚蓝指示剂。接好电源后以20mA进行电泳,进入分离胶后改为25mA电流进行电泳,直至指示染料到达凝胶底部边缘为止。结束电泳后取出胶板于染色液中,染色30～50min。使用脱色液进行脱色,每隔3～5h更换一次脱色液,直至无蛋白处凝胶无色为止。

1.2.6 数据处理 实验结果利用统计分析软件SPSS19.0,采用加权评分法。评分标准为:将各项指标除以该列最大值再乘以100,为该项得分。根据胶原脱色率(x)和多糖含量(y)两项指标权衡,确定二者的权重系数均为0.5,对两项指标进行加权求和,加权平均=0.5x+0.5y。

2 结果与分析

2.1 鱿鱼皮胶原相对分子量测定

从图1中可以发现,对于自制的胶原蛋白,泳道中出现了三条谱带,有两条位于100ku处,一条位于200ku处,分别对应于胶原微结构中的α1链,α2链和β链,β链是α链的二聚体,分子量是其二倍。这说明所提取的胶原三螺旋结构保持完整,纯度较高,接近于天然状态,由于实验过程中所使用的酶具有特异性,即只对胶原大分子链上的非胶原部分及末端肽等特定部位进行切割,不会破坏胶原的天然三螺旋结构。作为生物医用的胶原蛋白,其自身的分子量是一项重要的检测指标,与其他的性质密切相关,如止血性能、力学性能和耐热性能等,作为生物质材料使用的胶原蛋白应不可使其过度降解,应尽量保证其自身的天然状态,实验自制的胶原蛋白分子量300ku,符合胶原大分子的要求。

图1 鱿鱼皮胶原蛋白的SDS-PAGE分析Fig.1 Analysis of Squid skin collagen by SDS-PAGE注:泳道A:蛋白Marker;泳道B:脱色前鱿鱼皮胶原蛋白;泳道C:脱色后鱿鱼皮胶原白。

2.2 最优酶种类确定

以胶原蛋白提取率作为指标,比较不同蛋白酶的水解效果。四种蛋白酶单酶胶原蛋白提取率结果如图2所示,通过四种蛋白酶进行酶解胶原的提取研究发现,胰蛋白酶对胶原的提取优于胃蛋白酶、中性蛋白酶和酸性蛋白酶。可以看出在最佳酶解条件下,胰蛋白酶更适合胶原蛋白的提取,而且得到的胶原理化性能也好于其他酶类水解的胶原。因此,胰蛋白酶对于鱿鱼皮胶原的提取效果最好,提取率最高,可以作为后期酶解提取的鱿鱼皮胶原蛋白。

图2 不同酶种类对鱿鱼皮胶原蛋白提取的影响Fig.2 Effect of different enzymes on the extraction of squid skin collagen

2.3 单因素实验

2.3.1 H2O2溶液浓度对脱色效果的影响 由图3可以看出,当H2O2溶液浓度从0.2%增至0.6%时,胶原蛋白脱色率和胶原蛋白蛋白提取率显著增加;当H2O2溶液浓度大于0.6%时,胶原蛋白脱色率有所缓慢增加,但胶原蛋白蛋白提取率迅速下降。可能由于双氧水浓度超过阈值后,双氧水对胶原蛋白氧化降解加剧,导致胶原蛋白提取率快速下降。两因素相结合可以得出,双氧水用量不宜过大,H2O2溶液浓度在0.6%时脱色效果最好。

图3 H2O2浓度对脱色率和蛋白提取率的影响Fig.3 Effects of H2O2 concentrations on the decoloring rate and protein extraction rate

2.3.2 pH对脱色效果的影响 由图4可以看出,当脱色液pH从4增至8时,脱色率和蛋白提取率均增大;在脱色液pH为8时,胶原脱色率和提取率达到最大值;随着脱色液pH继续增大,蛋白提取率呈下降趋势,脱色率快速下降。双氧水为弱酸性,在酸性条件下较为稳定,较低脱色液pH不利于双氧水氧化脱色作用,在微酸性或微碱性条有利于双氧水氧化能力强,脱色率效果好,但碱性条件下双氧水快速分解,不能发挥双氧水氧化脱色作用。因此,脱色液pH控制在8左右,脱色效果较好。

图4 pH对脱色率和蛋白提取率的影响Fig.4 Effects of pH values on the decoloring rate and protein extraction rate

2.3.3 温度对脱色效果的影响 由图5可以看出,当温度在25 ℃到55 ℃之间脱色率和蛋白提取率均增加,在55 ℃时出现最大值,随着温度继续升高,脱色率和蛋白提取率呈下降趋势。可能由于温度的升高一定程度后,双氧水分解加速,有效双氧水含量下降,导致胶原蛋白脱色率下降。因此,结合两因素可以得出,脱色温度控制在55 ℃左右。

图5 温度对脱色率和蛋白提取率的影响Fig.5 Effects of temperatures on the decoloring rate and protein extraction rate

图6 时间对脱色率和蛋白提取率的影响Fig.6 Effects of times on the decoloring rate and protein extraction rate

由图5可以看出,当时间在3～7 h时脱色率和蛋白提取率呈增加趋势,在7 h时出现峰值,随着时间继续延长,脱色率变化不大,蛋白提取率有所下降趋势。随着时间延长,由于双氧水氧化作用导致胶原蛋白的降解,使得蛋白提取率下降,结合两因素可以得出,脱色时间控制在7 h内,脱色率和蛋白提取率较理想。

2.4 正交实验

由于各影响因素间的相互交叉影响,为了全面考察双氧水脱色法的工艺参数,根据单因素实验的结果,确定以双氧水浓度(A)、pH(B)、温度(C)、时间(D)4种因素进行正交实验,以脱色率和蛋白提取率为考察指标得到各种条件下鱿鱼皮脱色的最佳条件。正交实验结果与方差分析见表2和表3。

表2 正交实验结果

注:脱色率加权50%,蛋白提取率加权50%。

表3 正交实验结果方差分析

注:*有显著性影响,F0.05(2.2)=19.00;F0.01(2.2)=99。 由表2和表3的实验结果分析得出各条件对鱿鱼皮脱色效果的影响顺序由大到小依次为:pH、双氧水浓度、时间、温度。通过分析得出的最优鱿鱼皮脱色工艺条件水平为:A1B1C3D2,最佳鱿鱼皮脱色工艺条件为:双氧水浓度0.6%、pH8、温度65 ℃、时间7 h。

2.5 验证实验

取鱿鱼皮酶解液3份各15 mL在上述最佳工艺条件下进行稳定性实验,结果见表3。

由表4可知,在最佳条件下,3次实验胶原蛋白的脱色率和蛋白提取率都达到了较高水平,平均值分别为78.76%和88.29%,并趋向于较强的稳定性。

表4 验证实验结果

这与正交实验分析所得的结果是一致的,说明该正交实验稳定有效。张雪等[24]采用活性炭吸附法脱除鱿鱼皮胶原蛋白提取液中色素,在最优条件下,鱿鱼皮胶原蛋白液的脱色率为45.6%,蛋白质和氨基酸损耗率分别为19.65%和22.93%。刘闪等[25]采用粉状活性炭鲟鱼皮胶原蛋白肽酶解液脱色,在最优条件下,水解产物脱色率为81.58%,蛋白质回收率为82.5%。邓晓龙等[26]采用大孔吸附树脂脱色,对罗非鱼鱼鳞胶原蛋白肽脱色工艺进行研究,在最优条件下,多肽损失率为6.71%,终产物白度62.48%。因此,本研究利用双氧水对鱿鱼皮胶原蛋白脱色工艺,具有胶原蛋白高脱色率和蛋白高回收率的优势,并且利用双氧水脱色成本较低,具有潜在的应用前景。

3 结论

实验探讨了过氧化氢对鱿鱼皮胶原蛋白进行脱色的工艺条件,设置了四个因素:双氧水浓度、pH、温度、时间,分别研究这四个因素对脱色结果的影响,得到最佳脱色工艺条件。经过正交实验结果表明,四个因素的影响程度大小为:pH>双氧水浓度>时间>温度。正交实验的最佳工艺条件:双氧水浓度0.6%、pH8、温度55 ℃和时间7 h。经三次重复最优条件得到脱色率和蛋白提取率平均值分别为78.76%和88.29%。本研究得到实验结果为放大实验或工业化生产提供理论依据,也为扩大鱿鱼皮胶原蛋白的应用领域和提高其产品的附加值提供研究基础。

[1]陈国梁,贺翠莲. 胶原蛋白的研究进展[J].延安大学学报(自然科学版),2000,19(2):78-81.

[2]宋芹,陈封政,颜军,等.胶原蛋白研究进展[J].成都大学学报(自然科学版),2012,31(1):35-38.

[3]王学川,任龙芳,强涛涛.胶原蛋白的研究进展及其在化妆品应用[J].化学工业,2005,35(6):388-392.

[4]周倩,罗志刚,何小维.胶原蛋白的应用研究[J].现代食品科技,2008,24(3):285-289.

[5]Kittiphattanabawona P,Benjakula S,Visessanguanb W,et al. Characterisation of acid-soluble collagen from skin and bone of bigeye snapper(Priacanthustayenus)[J]. Food Chemistry,2005,89(3):363-372.

[6]Zhang Y,Liu WT,Lia GY,et al. Isolation and partial characterization of pepsin-soluble collagen from the skin of grass carp(Ctenopharyngodonidella)[J].Food Chemistry,2007,103(3):906-912.

[7]Gómez-Guillén M C,Montero M P,Alemán A,et al. Contribution of Leu and Hyp residues to antioxidant and ACE-inhibitory activities of peptide sequences isolated from squid gelatin hydrolysate[J]. Food Chemistry,2011,125(2):334-341.

[8]Lin L,Lv Shun,Li BF,et al. Angiotensin-I-converting enzyme(ACE)-inhibitory and antihypertensive properties of squid skin gelatin hydrolysates[J]. Food Chemistry,2012,131(1):225-230.

[9]Alemán A,Gómez-Guillén M C,Montero P,et al. Identification of ACE-inhibitory peptides from squid skin collagen afterinvitrogastrointestinal digestion[J]. Food Research International,2013,54(1):790-795.

[10]Veeruraj A,Arumugam M,Ajithkumar T,et al. Isolation and characterization of collagen from the outer skin of squid(Doryteuthis singhalensis)[J]. Food Hydrocolloids,2015,43:708-716.

[11]Nagai T,Suzuki N. Isolation of collagen from fish waste material-skin,bone and fins[J]. Food Chemistry,2000,68(3):277-281.

[12]陈胜军,曾名勇,董士远.水产胶原蛋白及其活性肽的研究进展[J].水产科学,2004,23(6):44-46.

[13]郭瑶,曾名勇,崔文萱.水产胶原蛋白及胶原多肽的研究进展[J].水产科学,2006,25(2):101-104.

[14]Bae I,Osatomi K,Yoshida A,et al. Biochemical properties of acid-soluble collagens extracted from the skins of under utilised fishes[J]. Food Chemistry,2008,108(1):49-54.

[15]曾庆祝,许庆陵,郭恒斌.鱿鱼皮胶原蛋白的功能特性[J].水产学报,2009,33(1):139-144.

[16]秦玉青,刘承初,王慥.鱿鱼皮胶原蛋白的测定与回收[J].上海水产大学学报,2002,11(2):138-144.

[17]郭无瑕,胡建恩,王秀武,等.鱿鱼副产物的综合利用[J].精细与专用化学品,2006,14(18):6-8.

[18]马永均,秦乾安,陈小娥,等.鱿鱼加工副产物综合利用研究进展[J].渔业现代化,2008,35(4):62-65.

[19]林燕,王鸿飞,李和生,等.酶法水解鱿鱼皮制备多肽工艺的研究[J].食品工业科技,2011,32(3):204-207.

[20]许庆陵,郭恒斌,曾庆祝.鱿鱼皮胶原蛋白制备技术研究[J].科学研究,2008,29(9):59-64.

[21]王燕,付万冬,吴亮亮,等.鱿鱼皮胶原蛋白提取前处理的条件优化[J].饲料工业,2011,32(7):18-20.

[22]宋永相,孙谧,王海英,等.海洋活性胶原肽酶解液的脱色脱腥工艺[J].水产学报,2008,32(5):804-810.

[23]郭玉华,李钰金,吴新颖,等.鳕鱼皮胶原蛋白肽酶解液脱色脱腥工艺的研究[J].中国食品添加剂,2010,4:125-128.

[24]张雪,令狐青青,童晓倩,等.响应面法优化鱿鱼(Ommastrephes bartrami)皮胶原蛋白提取液脱色工艺[J].海洋与湖沼,2015,46(1):221-227.

[25]刘闪,刘培勇,刘良忠,等. 鲟鱼皮胶原蛋白肽酶解液脱色工艺的研究[J]. 食品工业,2013,3(9):120-123.

[26]邓晓龙,高德友,胡建兰,等. 罗非鱼鱼鳞胶原蛋白肽脱色工艺研究[J]. 福建农业科技,2015,11:30-33.

Study on preparation process of high degree transparency decolorization squid skin collagen

LIAO Miao-fei1,FU Wan-dong1,*,YANG Hui-cheng1,ZHANG Wei-jie2,ZHENG Bin1,ZHONG Ming-jie1

(1.Zhejiang Marine Development Research Institute,Zhoushan 316021,China; 2.College of Life Science and Engineering,Lanzhou University of Technology,Lanzhou 730050,China)

In order to improve transparency degree and application value of squid skin collagen,this paper studied the process on using hydrogen peroxide oxidation to decolorize the pigment of squid skin collagen. With one-factor-at-a-time method and orthogonal experiment of the squid skin collagen obtained by enzymatic hydrolysis,the optimal protein recovery and decolorization process conditions of squid skin collagen were the concentration of hydrogen peroxide of 0.6%,PH value of 8.0,temperature of 50 ℃,and the reaction time of 7 h. Under the optimal protein recovery and decolorization process conditions,the decolorization rate and protein recovery rate of squid skin collagen were 78.76% and 88.29%,respectively. So,the results of this study have better collagen recovery and decolorization effect and have potential application prospects.

Squid skin;collagen;H2O2solution;decolorization rate;protein extraction rate

2016-06-13

廖妙飞(1984-),女,硕士,工程师,研究方向:海洋生物制品制备与利用,E-mail:miaofeiliao@163.com。

*通讯作者:付万冬(1979-),男,博士,高级工程师,研究方向:海洋生物资源综合利用,E-mail:fuwandong@126.com。

浙江省重大科技专项重大社会发展项目(2011C02003);浙江省公益技术研究农业项目(2016C32081)。

TS

A

1002-0306(2016)24-0000-00

10.13386/j.issn1002-0306.2016.24.000