自体富血小板血浆凝胶促深Ⅱ度烧伤创面组织修复和再生的效果观察

许贤君

(广西梧州市红十字会医院整形外科，梧州市 543002，E-mail：hhxxj120@163.com)

临床创新

自体富血小板血浆凝胶促深Ⅱ度烧伤创面组织修复和再生的效果观察

许贤君

(广西梧州市红十字会医院整形外科，梧州市 543002，E-mail：hhxxj120@163.com)

目的 观察自体富血小板血浆凝胶促深Ⅱ度烧伤创面组织修复再生的作用。方法 68例深Ⅱ度烧伤患者随机分为两组，每组34例，两组患者均给予抗感染、活血、营养、对症、支持等常规治疗及局部清创，对照组局部清创后用含生理盐水纱布包扎覆盖创面，观察组给予适量自体富血小板凝胶涂于创面，然后用凡士林纱布包扎创面，直至创面完全愈合。观察两组治疗前后创面疼痛视觉模拟评分(VAS)、温哥华瘢痕量表(VSS)评分、创面愈合率及愈合时间。结果 治疗后2周，两组VAS均降低，并且观察组VAS低于对照组(P<0.05)。随访1个月、2个月时，观察组VSS均低于对照组(P<0.05)。治疗后7、14 d观察组创面愈合率均高于对照组(P<0.05) ，观察组完全愈合时间短于对照组(P<0.05)。结论 自体富血小板血浆凝胶能够促进深Ⅱ度烧伤创面愈合，减轻疼痛及瘢痕增生，有利于创面组织修复和再生。

烧伤；深Ⅱ度烧伤；自体富血小板血浆凝胶；疼痛

近年来烧伤创面修复新方法不断出现，其中自体富血小板凝胶(autologous platelet-rich gel，APG)被广泛用于临床。APG是采集患者外周静脉血，并经过一系列方法处理后得出富血小板血浆(platelet-rich plasma，PRP)，然后与凝血酶-钙剂按照10 ∶1的比例混合、凝固制成的凝胶状物质[1-2]。APG中的生长因子浓度较高，因而对于组织的修复及再生具有促进作用，利于烧伤创面的早期愈合[3-4]。本研究采用APG治疗深Ⅱ度烧伤患者，观察其对创面组织修复与再生的作用。

1 资料与方法

1.1 临床资料 选择2014年1月至2015年1月在我院治疗的深Ⅱ度烧伤患者68例，均符合深Ⅱ度烧伤的相关诊断标准[5]，男33例，女35例，年龄10～63(34.4±4.9)岁。入选标准：(1)重要器官无严重器质性疾病；(2)无严重感染及其他严重并发症；(3)患者及家属对本研究知情同意。 排除标准：(1)昏迷患者；(2)既往有心功能障碍的患者；(3)文字听、读、写障碍者；(4)既往有精神疾病史的患者。按随机数字表法将患者分为对照组和观察组，每组34例，对照组男18例，女16例，年龄(35.3±9.3)岁，烧伤面积<5% 19例，6%～10% 8例，11%～20% 5例，>20% 2例。观察组男15例，女19例，年龄(33.7±9.7)岁，烧伤面积<5% 16例，6%～10% 7例，11%～20% 8例，>20% 3例。两组患者年龄、性别、烧伤面积等资料比较，差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。

1.2 方法

1.2.1 APG的制备：严格无菌操作。清晨收集患者静脉血10 ml，加入枸橼酸钠1 ml，2 000 r/min离心15 min，取新的离心管，将上部血浆和部分临近界面处红细胞转移至其中，3 500 r/min离心10 min，即可获得富血小板血浆。以10 ∶1的比例将富血小板血浆与氯化钙溶液(10%，添加凝血酶)混合，得到的APG置于-20℃保存备用。

1.2.2 治疗方法：两组患者均按常规方法清洗创面，洗净脓痂及表面分泌物；常规给予抗感染、活血、营养、对症、支持等治疗。观察组34例患者给予自体富血小板凝胶治疗：根据烧伤创面面积，给予适量的自体富血小板凝胶涂于创面，然后用单层凡士林纱布包扎创面，每天换药1次，直至创面完全愈合。对照组患者清理创面后，用含生理盐水纱布包扎覆盖，每天换药1次，直至创面愈合。

1.3 观察指标 观察治疗前后两组创面疼痛程度；随访2个月，对比两组的瘢痕增生情况；统计两组的创面愈合率及愈合时间。创面疼痛评价采用疼痛视觉模拟评分(Visual Analogue Scale，VAS)评定[6]，0 分为无痛，10 分为极痛，评分越高，疼痛越剧烈。瘢痕增生情况采用温哥华瘢痕量表(Vancouver Scar Scale，VSS)评定[7]，总分15 分，评分越高，瘢痕越重。

1.4 统计学分析 应用SPSS 18.0统计学软件进行统计分析，计量资料以(x±s)表示，采用t检验，计数资料采用χ2检验，以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 两组治疗前后VAS、VSS评分比较 治疗前两组VAS比较，差异无统计学意义(P>0.05)，治疗后2周，两组VAS均降低，并且观察组VAS低于对照组(P<0.05)。随访1个月、2个月时，观察组VSS 评分均低于对照组(P<0.05)，见表1。

表1 两组治疗前后VAS、VSS评分比较(x±s，分)

2.2 两组创面愈合率、愈合时间比较 治疗后，观察组的完全愈合时间为(22.65±2.34)d，明显短于对照组的(27.23±3.19)d(t=6.750，P=0.001)。治疗后7 d、14 d，观察组创面愈合率均高于对照组(P<0.05)，见表2。

表2 两组创面愈合情况对比(n，%)

3 讨 论

深Ⅱ度烧伤常涉及真皮层乳头层以下损伤，由于皮肤受热、散热不均以及不同基质成分热变阈值不同，因此在烧伤组织中或多或少会留下一定的间生态组织，在一定条件下可以恢复受损功能，能对抗组织缺血缺氧、炎症反应以及自由基损伤等不良反应[8]。

传统方法治疗Ⅱ度烫伤创面，尤其是深Ⅱ度，主要采用单纯包扎或暴露疗法，但其治愈时间较长，并且会留下瘢痕。目前，随着医疗技术的进步，治疗方法也趋于多样化，干细胞治疗法、皮片移植治疗等被应用于临床。1977年Harke等[9]首次分离制备了PRP，并在心脏外科手术患者中应用，有效地避免了体外循环对血小板的损伤作用，并预防术后失血的发生。目前，临床上将PRP技术应用于心脏外科手术、口腔颌面外科、骨组织及软骨组织的修复[4]。PRP修复创面具有多种优势：(1)其血浆为自源性，故无免疫排斥反应，也无感染等其他疾病的传播风险。(2)PRP在凝固成胶冻状后，可以黏合组织缺损处，阻止血小板流失。目前APG方法治疗烧伤的机制仍然不是很明确。本研究观察组用APG方法治疗深Ⅱ度烧伤患者，结果在治疗7 d、14 d时创面愈合率均高于常规治疗的对照组(P<0.05)，创面完全愈合时间短于对照组(P<0.05)，表明APG能促进烧伤创面的修复，其原因可能是APG与各种复杂的因子起协同作用，激活修复机制，促进间充质干细胞分化再生等[8]。与全血相比，APG中的血小板浓度大16倍[10]，其所含的生长因子浓度也很高，常见的生长因子有血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)、转化生长因子(transforming growth factor-β，TGF-β)、血小板源性生长因子(platelet-derived growth factor，PDGF)、胰岛素生长因子及表皮生长因子等，其中PDGF、TGF-β、VEGF、EGF的浓度均为正常浓度的3～8倍[11]。临床实验证明，上述生长因子在诱导组织生长及创伤修复再生中发挥重要作用[12]。PDGF是一种促有丝分裂原，可对成纤维细胞及基质干细胞产生趋化作用，并对成纤维细胞刺激分化，使胶原蛋白加速合成，促进血管再生，进而提高细胞的分化增殖。另外也可以诱导成纤维细胞分泌TGF-β，有利于创面修复和再生[13-14]。TGF-β可以促进表皮及内表皮细胞的生长速度，并对细胞外基质的合成进行调控，因此在组织损伤的修复中具有重要作用[15]。表皮生长因子是一种细胞分裂促进因子，可以刺激胶原细胞增殖分化，加速再上皮化，促进血管形成[16]。VEGF属于血小板衍生因子，可刺激血管内皮再生，并对内皮细胞的趋化及迁移产生诱导作用，进而促使微血管内皮细胞向胶原凝胶侵入，利于细胞外基质合成及软组织缺损部位的血管生成[17]。上述各种因子在烧伤创面修复与再生中起到不可替代的作用。检测P63和β-连环蛋白表达水平可以预测表皮干细胞有无分化[18]。有研究发现，APG方法治疗大鼠深Ⅱ度烧伤后创面组织P63、β-连环蛋白表达水平明显升高，原因在于深Ⅱ度烧伤创面中，仍然保留着部分间充质细胞，在一定程度上APG中的某些因子能够激活并促进表皮干细胞分化，从而促进创面恢复与再生[19]。本研究结果显示：观察组治疗后VAS评分，VSS评分均低于对照组，说明APG中的某些成分在瘢痕的形成中起到了一定作用，并有利于创面表皮干细胞的分化再生。

总之APG外涂治疗深Ⅱ度烧伤可促进创面组织修复、再生，加快创面愈合。

[1] Pallua N,Wolter T,Markowicz M.Platelet-rich plasma in burns[J].Burns,2010,36(1):4-8.

[2] Kazakos K,Lyras DN,Verettas D,et al.The use of autologous PRP gel as an aid in the management of acute trauma wounds[J].Injury,2009,40(8):801-805.

[3] 王正国.创伤修复[J].创伤外科杂志,2002,4(1):1-3.

[4] Kakudo N,Kushida S,Minakata T,et al.Platelet-rich plasma promotes epithelialization and angiogenesis in a splitthickness skin graft donor site[J].Med Mol Morphol,2011,44(4):233-236.

[5] 陈富禄,黎洪棉,韩良枢.自体富血小板血浆凝胶修复儿童面部Ⅱ度烧伤创面[J].中国组织工程研究与临床康复,2011,15(34):6 453-6 456.

[6] Schlegel KA,Zimmermann R,Thorwarth M,et al.Sinus floor elevation using autogenous bone or bone substitute combined with platelet-rich plasma[J].Oral Surg Oral Med Oral Pathol Oral Radiol Endod,2007,104(3):e15-e25.

[7] Bannister SR,Powell CA.Foreign body reaction to anorganic bovine bone and autogenous bone with platelet-rich plasma in guided bone regeneration[J].J Periodontol,2008,79(6):1 116-1 120.

[8] Clover AJ,Kumar AH,Isakson MA,et al.Allogeneic mesenchymal stem cells,but not culture modified monocytes,improve burn wound healing[J].Burns,2015,41(3):548-557.[9] Harke H,Tanger D,Fürst-Denzer S,et al.Effect of a preoperative separation of platelets on the postoperative blood loss subsequent to extracorporeal circulation in open heart surgery(author′s transl)[J].Anaesthesist,1977,26(2):64-71.

[10]Dugrillon A,Eichler H,Kern S,et al.Autologous concentrated platelet-rich plasma(cPRP) for local application in bone regeneration[J].Int J Oral Maxillofac Surg,2002,31(6):615-619.

[11]Eppley BL,Woodell JE,Higgins J.Platelet quantification and growth factor analysis from platelet-rich plasma:implications for wound healing[J].Plast Reconstr Surg,2004,114(6):1 502-1 508.

[12]张晓冬,曲铁兵.自体富血小板凝胶换药辅助治疗难愈合创面初步探讨[J].中华创伤杂志,2012,28(7):658-660.

[13]陈 伟,付小兵,孙同柱,等.血小板源性生长因子和受体在皮肤溃疡中表达特征及其对溃疡形成影响的研究[J].中国危重病急救医学,2002,14(9):515-517.

[14]秦全红,王德文,彭瑞云,等.PDGF- A、PDGFR-α在单纯创伤和照射复合创伤愈合过程中伤口成纤维细胞内的表达与意义[J].中华放射医学与防护杂志,2002,22(6):401-404.

[15]宋庆高,石 冰.转化生长因子β与软组织创面修复的研究进展[J].临床口腔医学杂志,2004,20(2):126-127.

[16]Fu X,Sun X,Li X,et al.Dedifferentiation of epidermal cells to stem cells in vivo[J].Lancet,2001,358(9 287):1 067-1 068.

[17]崔正军,雷万军,陈海州,等.血管内皮生长因子基因感染对大鼠创面移植复合皮的影响[J].中华损伤与修复杂志:电子版,2008,3(1):32-37.

[18]Lin HF,Lai YC,Tai CF,et al.Effects of cultured human adipose-derived stem cells transplantation on rabbit cornea regeneration after alkaline chemical burn[J].Kaohsiung J Med Sci,2013,29(1):14-18.

[19]Kashimata M,Sayeed S,Ka A,et al.The ERK-1/2 signaling pathway is involved in the stimulation of branching morphogenesis of fetal mouse submandibular glands by EGF[J].Dev Biol,2000,220(2):183-196.

许贤君(1982～)，男，本科，主治医师，研究方向：烧伤整形。

R 644

A

0253-4304(2016)07-1015-03

10.11675/j.issn.0253-4304.2016.07.37

2016-02-26

2016-05-10)