硫酸镍斑贴试验前后经皮水分丢失的测定与分析

杨素莲,尹颂超,张云青,谢淑霞,易金玲,叶聪秀,赖 维

(中山大学附属第三医院皮肤性病科,广州 510630)

硫酸镍斑贴试验前后经皮水分丢失的测定与分析

杨素莲,尹颂超,张云青,谢淑霞△,易金玲,叶聪秀,赖 维

(中山大学附属第三医院皮肤性病科,广州 510630)

目的 通过检测硫酸镍斑贴试验受试部位经皮水分丢失(TEWL)变化情况，探讨TEWL测定在接触性皮炎诊断中应用的可能性。方法 对38例健康志愿者进行人体皮肤封闭型硫酸镍斑贴试验。将2.5%硫酸镍斑试器用胶带贴敷在受试者上背部，同时设空白对照组(空白斑试器贴于受试者上背部的不同区域)38例，封包24 h后揭去斑试物。分别于试验前(D0)，揭去斑试物后0.5 h(D1)、24 h(D2)对皮肤反应结果进行临床评估及TEWL测定。结果 38例受试者中8例临床评估为阳性。D1时试验组中镍斑贴试验阴性组、阳性组及空白对照组TEWL值分别为20.04±5.14、18.40±4.46及17.76±4.23，均明显高于D0时的12.35±3.84、13.30±5.12及12.26±4.28(P<0.05)。D2时斑贴试验阳性组TEWL值为17.01±5.19，较阴性组TEWL值12.75±3.58明显升高(P=0.013)，阴性组D2、D0比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 硫酸镍斑贴诱发的接触性皮炎模型中，斑贴封包及皮肤的阳性结果对TEWL值有一定程度的影响。

硫酸镍;斑贴试验;经皮水分丢失;接触性皮炎

人体皮肤封闭型斑贴试验是诊断接触性皮炎的金标准[1]，其结果的判断是以临床肉眼观察为主，但易受观察者的光感差异和主观感觉影响。非创伤性皮肤检测技术经皮水分丢失(transepidermal water loss,TEWL)具有无创、客观性等特点，有利于评价各种化学物质对皮肤屏障的影响，国外已广泛用于接触性皮炎、口周皮炎等疾病的临床研究与病情评价[2-4]。目前国内对此方面研究较少，本文对38例健康志愿者进行人体皮肤封闭型硫酸镍斑贴试验，并在斑贴试验前后检测局部皮肤的TEWL值，研究TEWL值在皮肤受到化学刺激后的情况变化，探讨TEWL测定在接触性皮炎诊断中应用的可能。

1 资料和方法

1.1 一般资料 选择自愿受试者38例，其中男7例，女31例；年龄20～59岁，平均(41.21±8.87)岁。排除标准：(1)近1周使用抗组胺药或近1个月内使用免疫抑制剂者；(2)近两个月内受试部位应用任何抗炎药物者或患有炎症性皮肤病临床未愈者；(3)胰岛素依赖性糖尿病患者；(4)正在接受治疗的哮喘或其他慢性呼吸系统疾病患者；(5)在近6个月内接受抗癌化学治疗者及免疫缺陷或自身免疫性疾病患者；(6)哺乳期或妊娠妇女；(7)双侧乳房切除及双侧腋下淋巴结切除者；(8)在皮肤受试部位由于瘢痕、色素、萎缩、鲜红斑痣或其他瑕疵而影响试验结果的判断者；(9)参加其他临床试验或体质高度敏感者；(10)非自愿参加者或不能按试验要求完成规定内容者。所有自愿受试者认真阅读知情同意书并签字。

1.2 试验材料 试验物为2.5%硫酸镍，由上海市皮肤病医院研制。斑试器：为贴附于封闭式胶带上内径为8 mm的塑料制小碟，上海卫生材料厂研制。TEWL检测仪：德国CK公司生产，型号为TM300，检测经表皮水分丢失。

1.3 方法

1.3.1 编号分组 对符合入组标准进入研究的受试者，按入组先后顺序给受试者编号(01、02、03…)，以此作为受试者身份识别号码，整个试验过程严格按照药品临床试验管理规范(GCP)标准操作。

1.3.2 斑贴试验 将加有2.5%硫酸镍(用量0.020～0.025 g)的斑试器(试验组)及空白斑试器(空白对照组)贴敷于受试者背部的不同区域，24 h后揭去斑试物。分别于试验前(D0)，揭去斑试物后0.5 h(D1)、24 h(D2)进行临床观察并记录皮肤反应，同时测定皮肤TEWL值(单位：g·m2·h)。

1.4 皮肤反应评定标准[5]0分为无反应；1分为可疑阳性反应，仅有轻度红斑；2分为弱阳性反应，红斑、浸润、可有少量丘疹；3分为强阳性反应，红斑、浸润、丘疹、水疱；4分为极强阳性反应，红斑、浸润明显、出现水疱大疱。

2 结 果

2.1 临床评分 38例受试者全部按照试验要求完成试验。临床评分结果共8例阳性(其中，单独D1阳性1例，D1、D2阳性4例，单独D2阳性3例)，见表1。

表1 硫酸镍斑贴试验不同评分等级受试者分布情况(n=38，分)

2.2 斑贴试验对TEWL的影响 试验组中贴试验阴性组(30例)、阳性组(8例)及空白对照组(38例)在D1时TEWL值均较D0明显升高，差异有统计学意义(P<0.05)。至D2时阴性组及空白对照组TEWL均逐渐下降至D0水平(P=0.717、0.120、0.607)；而阳性组TEWL值较阴性组TEWL值明显升高，差异有统计学意义(P=0.013)，见表2。

表2 硫酸镍斑贴试验前后TEWL值的比较(±s)

a:P<0.05,与D0时比较;b:P<0.0,与阴性组比较。

2.3 斑贴试验临床评估结果与TEWL值的关系 D1时斑贴试验阴性组(33例)和阳性组(5例)的TEWL值差异无统计学意义(P=0.50)，TEWL值与皮肤反应程度(1、2分)无相关关系(r=-0.560，P=0.737)。D2时斑贴试验阳性组(7例)TEWL值明显高于阴性者(31例)，差异有统计学意义(P=0.013)，且TEWL值与斑贴试验阳性皮肤反应程度呈正相关(r=0.380，P=0.019)。

3 讨 论

TEWL、角质层含水量、皮脂水平、皮肤表面pH值、角质层和表皮厚度等是评价皮肤屏障功能客观、量化、便捷的指标；其中TEWL是最主要的指标。TEWL是通过测定皮肤表面的水蒸气压梯度表明水分散失的情况，能够灵敏地反映出角质层的完整性及皮肤的水屏障功能。当皮肤受到外界物理化学因素的刺激和损害时，TEWL值升高、当皮肤屏障功能改善时，TEWL值降低。研究表明，由化学刺激引发的皮肤损伤及炎性反应过程中，皮肤水分屏障功能的异常往往是最早的改变之一[6-7]。硫酸镍是常见的变应原，其作用于皮肤可导致皮肤损伤，诱发炎性反应，致使皮肤水分的屏障功能发生改变，渗出皮肤的水分增加。

本研究发现硫酸镍斑贴试验反应阴性组与空白对照组受试者去斑试物后0.5 h TEWL值均较试验前明显升高，说明进行人体皮肤封闭型斑贴试验即使在未出现皮肤炎症的情况下TEWL值也可增加，可能与封闭型斑贴试验引起局部血流增加，局部温度升高，汗腺分泌增加，代谢加快有关。这种TEWL值的升高是非特异性的，而该两组去除斑试物后24 h的TEWL值与试验前无明显差异，说明封闭型斑贴试验对皮肤TEWL值的影响是暂时的，随着斑贴的去除，TEWL值可在24 h内逐渐恢复。另外，阳性反应的受试者TEWL值较阴性反应者在0.5 h无明显差异，24 h后明显高于阴性反应者，且与皮肤反应程度呈正相关。这说明去除斑贴24 h后出现的TEWL值差异与不同受试者皮肤出现炎性反应有关，而且皮肤炎性反应程度越高，TEWL值越高。总之，硫酸镍斑贴诱发的接触性皮炎模型中，斑试器会影响皮肤TEWL值，去除斑贴24 h后皮肤的阳性结果与皮肤TEWL值有一定关系。

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杨素莲(1963-)，副主任护师，本科，主要从事皮肤病检测与治疗工作。△

，E-mail:doctor_XSX@163.com。

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10.3969/j.issn.1671-8348.2016.10.036

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1671-8348(2016)10-1397-02

2015-12-08

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