生脉注射液与常用输液配伍稳定性研究

冯 珺 曹佳薇 姚 君 周 峰 蔡鑫君 倪坚军

生脉注射液与常用输液配伍稳定性研究

冯 珺 曹佳薇 姚 君 周 峰 蔡鑫君 倪坚军

生脉注射液；输液配伍；稳定性

生脉注射液是由红参、麦冬、五味子3种中药经提取制成的制剂，具有益气养阴、复脉固脱的功效，广泛用于冠状动脉粥样硬化性心脏病、心力衰竭、休克、病毒性心肌炎、急性心肌梗死、脑梗死、脑出血、新生儿缺氧缺血性脑病等的治疗及辅助治疗[1]。按生脉注射液说明书要求，其临床应用时须与5%葡萄糖注射液（GS）250mL稀释后静脉给药。考虑到与5%葡萄糖配伍不适用于糖尿病患者，因此我们从临床实际出发，模拟临床用药情况，考察生脉注射液在5%GS和0.9%氯化钠注射液（NS）中的配伍稳定性，主要观察其澄明度、微粒及含量变化，为临床安全、合理应用本品配伍提供依据。生脉注射液中含有8种皂苷和1种木脂素，由于人参皂苷Rg1属于原人参三醇型，是生脉注射液中含量最高、活性最确切的主要药效成分[2]。因此，本实验选择人参皂苷Rg1为生脉注射液研究的标志物。

1 仪器与试剂

Agilent1100液相色谱仪；分析天平（赛多利斯科学仪器北京有限公司）；KQ-50E型超声清洗器（昆山市超声仪器有限公司）；gwf-5型微粒分析仪（天津天河仪器有限公司）。人参皂苷Rg1对照品（中国药品生物制品检定所，批号110703-201128）；生脉注射液（江苏苏中药业集团股份有限公司，批号13100904）。

2 方法与结果

2.1 色谱条件[3]色谱柱：Agilent zorbax SB-C18柱（250mm×4.6mm，5μm)；流动相：V乙腈:V水=23:77；检测波长：203nm；柱温：40℃；流速：1.0mL/min；进样量：20μL。在此色谱条件下，空白样品和人参皂苷Rg1对照品及含药样品色谱图见图1。

图1 人参皂苷Rg1的HPLC色谱图

2.2 对照品溶液制备 精密称取人参皂苷Rg1对照品适量，置于10mL容量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度,摇匀，即得。

2.3 标准曲线制备 精密吸取对照品溶液适量，置10mL量瓶中，用甲醇稀释至刻度，配制成系列标准溶液，按“2.1”项下色谱条件进行测定，以峰面积（A）为纵坐标，以药物质量浓度（C）为横坐标，得线性回归方程：A=2682.0C+211.64，r=0.999。结果表明，人参皂苷Rg1质量浓度在0.0519～0.9264mg/mL内与峰面积之间线性关系良好。

2.4 精密度试验 取对照品溶液按“2.1”项下色谱条件连续进样5次，计算峰面积RSD为2.7%，表明精密度良好。

2.5 回收率试验 采用加样回收法。精密量取样品2mL，置5mL量瓶中，分别加入对照品溶液1.5mL、2.0mL和2.5mL，加甲醇至刻度，摇匀，即得。分别取20μL注入液相色谱仪，测定，计算人参皂苷Rg1的回收率，平均回收率为99.3%，RSD为0.92。

2.6 配伍溶媒对含量测定的影响 由于对照品溶液采用甲醇作为溶剂，而样品中人参皂苷Rg1含量测定时，采用配伍液过滤后直接进样，因此需比较两种不同溶媒对人参皂苷Rg1含量的影响。精密称取三份人参皂苷Rg1对照品，置于10mL容量瓶中，分别加入甲醇、0.9%NS、5%GS溶解并稀释至刻度,摇匀，分别取20μL注入液相色谱仪，平行测定3次。结果显示，采用注射液溶媒作为人参皂苷Rg1的溶剂对含量测定基本没有影响，见表1。

表1 人参皂苷Rg1在不同溶剂中的平均峰面积（±s）

表1 人参皂苷Rg1在不同溶剂中的平均峰面积（±s）

?

2.7 配伍稳定性考察

2.7.1 配伍溶液制备 操作人员在超洁净台将50mL生脉注射液分别加入到0.9%氯化钠注射液250mL和500mL，以及5%葡萄糖注射液250mL和500mL中，摇匀，分别于室温下不避光放置。

2.7.2 外观性状和不溶性微粒测定 由于本实验需要考察生脉注射液在各种输液中配伍后的不溶性微粒变化，因此需排除输液本身及注射器对微粒数的影响。微粒测定见表2～3。

表2 4种输液和生脉注射液微粒检测结果（个/mL）

表3 4种输液用注射器抽取后微粒检测结果（个/mL）

按“2.7.1”制备的配伍溶液在5h内，无沉淀及混浊出现，也无明显颜色变化。用微粒分析仪分别在1、3、5h测定配伍溶液后的不溶性微粒数，见表4。

表4 生脉注射液与两种输液配伍后不溶性微粒变化（个/mL）

依据2010年版《中国药典》（一部）附录中有关微粒的规定，每毫升中含10μm以上的微粒不得超过20粒，含25μm以上的微粒不得超过2粒。表2中数据表明，大输液及生脉注射液的不溶性微粒数量均符合规定。而表3数据表明，注射器的应用对于输液的不溶性微粒几乎没有影响。

由表4数据可知：（1）生脉注射液与5%葡萄糖注射液配伍后微粒数明显比与0.9%氯化钠注射液配伍后的微粒数少；（2）生脉注射液与5%葡萄糖注射液配伍3h后微粒数明显增加，5%葡萄糖注射液的溶媒量越大微粒数越少；（3）生脉注射液与0.9%氯化钠注射液配伍3h后微粒数明显增加，0.9%氯化钠注射液的溶媒量越大微粒数越少；（4）只有生脉注射液与5%葡萄糖注射液配伍后含25μm及25μm以上的微粒符合《中国药典》的限量规定。

2.7.3 人参皂苷Rg1含量变化的测定 取“2.7.1”项下用0.9%氯化钠注射液250mL和5%葡萄糖注射液250mL制备的配伍溶液，经0.22μm的水膜过滤后，于1、3、5h后进样测定，平行做3份，分别以1h时的药物含量为100.0%，经回归方程计算出各时间点配伍溶液中人参皂苷Rg1的相对含量。见表5。

由表5可见，（1）生脉注射液与0.9%氯化钠注射液250mL注射液配伍5h内比较稳定，人参皂苷Rg1的含量基本不变；（2）生脉注射液与5%葡萄糖注射液配伍1h后，人参皂苷Rg1的含量明显下降。

表5 生脉注射液与不同输液配伍后各时间点人参皂苷Rg1含量变化（%）

3讨论

根据表2、表3的结果，大输液和生脉注射液其本身的不溶性微粒数是符合药典要求的，而注射器的抽取输液对于不溶性微粒的数目没有影响，说明操作环境及操作过程可能对微粒数造成影响。而表4的研究数据表明，生脉注射液按照临床实际情况配置成输液后，两种输液的微粒均不符合标准。从理论上说，中药注射液简单稀释后在输液中微粒数也应符合标准，但输液中加入生脉注射液后不溶性微粒却大幅增加，这可能的原因是中药注射液的成分比较复杂，一般会含有少量的鞣质。而鞣质在水中成胶体状态，当加入电解质后可能会产生盐析，这些盐类使得输液中的微粒数增加。因此，生脉注射液与0.9%氯化钠注射液配伍后的微粒数会比与5%葡萄糖注射液配伍后的微粒数多。二是输液配伍的操作过程及操作环境，再加上贮藏环境如时间、温度、湿度等原因均可导致微粒增加。

由于中药注射剂存在与溶媒配伍后微粒数不符合《中国药典》的要求以及临床不良反应较多[5-6]，因此生脉注射液应在明确的临床指证下谨慎适用。

本研究结果显示，在5h内不避光的环境下，生脉注射液在0.9%氯化钠注射液和5%葡萄糖注射液中的澄明度、颜色无明显变化，也没有发生浑浊或沉淀。虽然已经有生脉注射液与5%葡萄糖注射液配伍稳定性的考察报道，但是该文献并没有对配伍后的含量变化进行测定[7]。根据表5可知，生脉注射液与0.9%氯化钠注射液配伍后，5h内人参皂苷Rg1含量基本不变；而与5%葡萄糖注射液配伍后，1h后含量开始下降。

生脉注射液中含有9种成分[8]，本研究只是对其中的一种Rg1进行了考察，具有一定的局限性。本研究通过对生脉注射液与两种输液配伍后的澄明度、不溶性微粒以及含量变化的考察，与药品说明书推荐的用法相吻合，建议作为首选配伍方案。生脉注射液与5%葡萄糖注射液250mL配伍1h后，人参皂苷Rg1的含量明显下降，建议配伍后应在1h内输注完毕。

［1］张晓明，刘亚.生脉注射液的药理作用机制及临床应用［J］.医学综述，2013，19（15）：2813-2816.

［2］詹淑玉，邵青，李正，等.生脉注射液中人参皂苷Rg1，Rb1在心肌缺血大鼠体内的药动学-药效学结合研究［J］.中国中药杂志，2014，4（39）：1300-1305.

［3］王海英.生脉注射液不良反应的临床表现及预防措施［J］.中国药房，2010，21（16）：1505-1506.

［4］国家药典委员会.中华人民共和国药典:一部［S］.2010年版.北京：中国医药科技出版社，2010：附录58-59.

［5］田小芹，许群芬，龚亚林.生脉注射液致药物不良反应43例文献分析［J］.中国药业，2004，13（10）：56.

［6］赵洋，赵雪梅，龙扬，等.344例生脉注射液致不良反应/事件分析［J］.中国药房，2013，24（12）：1127-1128.

［7］马玉蓉，许群芬.不同剂量生脉注射液与5%葡萄糖注射液配伍的稳定性研究［J］.中国药业，2007，16（14）：29.

［8］王进，张平.HPLC法同时测定生脉注射液中9种成分［J］.中成药，2013，35（3）：508-512.

（收稿：2015-07-08 修回：2015-08-10）

浙江省中西医结合学会科研项目（No.2012LY017）

浙江省中西医结合医院西药房（杭州 310003）

倪坚军，Tel：（0571）56109701；E-mail：997072943@qq.com