AEG-1在膀胱腺癌中的表达及临床意义

赵丽芳崔东涛程琦顾国建徐松涛



AEG-1在膀胱腺癌中的表达及临床意义

赵丽芳1崔东涛2程琦2顾国建3徐松涛2

【摘要】目的 探讨星形胶质细胞上调基因-1（AEG-1）在膀胱腺癌组织中的表达及其临床病理意义。方法 采用免疫组化方法检测AEG-1 在19例膀胱腺癌，16例癌旁组织中的表达。结果 膀胱腺癌中AEG-1蛋白阳性率为63.2%，高于癌旁组织。结论 AEG-1与膀胱腺癌的临床分期密切相关，AEG-1有助于了解膀胱腺癌的生物学行为及早期诊断。

【关键词】膀胱癌；星形胶质细胞上调基因-1；免疫组织化学

膀胱癌是泌尿外科最常见的恶性肿瘤，其中腺癌因其病情隐匿，部分患者发现时已是肿瘤晚期，丧失了手术机会，因此寻找一些可以有效提示肿瘤发生发展的指标，对于肿瘤的诊断及治疗至关重要。AEG-1是由582个氨基酸组成的单次跨膜蛋白质，它有12个外显子及11个内含子。近来研究表明，该基因在多种恶性肿瘤中高表达，具有原癌基因的特性，与恶性肿瘤的发生、发展密切相关［1-5］。但其在膀胱癌中具体的表达情况尚不明确，我们采用免疫组化SP法检测了19例膀胱腺癌和16例癌旁组织中AEG-1的表达，旨在探讨其临床、病理意义。

1 资料与方法

1.1 临床资料

选取太仓市及常熟市第一人民医院泌尿外科1996年1月～2016年1月经手术切除，病理诊断明确的原发性膀胱腺癌19例石蜡标本。所选患者手术前未接受放疗、免疫或化疗。病理分级：GⅠ期3例，GⅡ期6例，GⅢ期10例。临床分期：浅表性癌（Ta、T1）7例，浸润性癌（T2、T3、T4）12例。另各取距肿瘤3 cm处的膀胱组织16例作为对照研究。

1.2 方法

采用S-P免疫组化染色法，一抗鼠抗人AEG-1购自美国Zymed公司，工作浓度为1：200。DAB显色试剂盒、SP免疫组化试剂盒，购自武汉博士德生物工程有限公司。用已知乳腺癌标本作为阳性对照，PBS代替一抗制成阴性对照切片。将组织石蜡切片置于65℃烤箱中烤1 h，脱蜡，用蒸馏水冲洗，3% H2O2室温孵育10 min，蒸馏水冲洗，PBS浸泡后，将切片浸泡在枸橼酸盐缓冲液的不锈钢压力锅中，待压力锅喷气时，计时3 min，然后待室温下缓慢冷却，PBS冲洗，滴加AEG-1单克隆抗体（1 : 200），4℃孵育过夜，PBS冲洗，滴加生物素标记二抗工作液，孵育20 min，添加DAB显色，显微镜下观察显色反应。苏木精复染，脱水、透明、封片。先按阳性细胞着色程度计分，无着色记0分，淡黄色记1分，棕黄色记2分，褐黄色记3分；再按阳性细胞所占的百分比：无着色记0分，＜10%记1分；10%～50%记2分；51%～75%为3分；＞75%为4分。将两者乘积＜4分为阴性表达，≥4为阳性。

1.3 统计学分析

采用SAS 9.2软件包进行统计分析，采用χ2检验进行各组间的阳性率比较，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

AEG-1定位于细胞浆，细胞浆中出现棕黄色、棕褐色颗粒为阳性细胞。AEG-1表达在膀胱癌组织中占63.2%（12/19），高于癌旁组织18.8%（3/16）（P＜0.05）。浸润性癌阳性率为83.3% （10/12），高于浅表性癌的28.6%（2/7）（P＜0.05）。GⅠ+GⅡ期阳性率为55.6%（5/4），与GⅢ期阳性率70.0%（7/10），差异无统计学意义（P＞0.05）。

3 讨论

研究表明，AEG-1可通过多种途径促进肿瘤发生发展。首先它和Ras基因可以协同作用，共同调节磷脂酰肌醇激酶-3/蛋白激酶B信号途径的下游基因如P53、AP-1等的表达，从而导致肿瘤细胞增殖和抗凋亡能力明显增强［6］。此外，AEG-1的高表达还能激活NF-JB信号通路。NF-JB作为细胞核内重要的转录因子可以调节细胞黏附分子、基质金属蛋白-9、环加氧酶-2等蛋白或基因的表达，进而调控肿瘤细胞的增殖、凋亡、转移等［7］。另外，研究表明AEG-1还有介导的肿瘤血管生成作用。

本研究中AEG-1蛋白在膀胱癌及肾癌细胞中的阳性率高于癌旁组织，提示AEG-1表达增高在膀胱腺癌发生过程中可能起一定促进作用。另外，AEG-1蛋白表达水平与膀胱癌的临床分期密切相关，提示AEG-1在膀胱癌的进展过程中起一定的作用。AEG-1与膀胱癌病理分级无关，可能我们样本较小，需扩大样本进一步检测。研究发现，AEG-1与患者预后密切相关。王秀梅等［1］研究了87例口腔鳞癌患者AEG-1蛋白的表达，发现AEG-1蛋白增高的患者，预后较差。王伟等［2］在乳腺癌研究中也有类似发现，AEG-1蛋白增高的患者预后不良。随着随着AEG-1与肿瘤的增殖、凋亡及恶性进展等机制研究的深入，以AEG-1为靶点的药物和基因治疗也越来越多地受到重视。有学者利用RNA干扰技术沉默AEG-1 基因后可以降低肿瘤细胞的增殖能力和侵袭能力［7-8］。

总之，笔者认为AEG-1蛋白可考虑用于膀胱腺癌的辅助诊断，及判断患者预后。本实验为后期研究提供了一定的实验基础。但AEG-1促进肿瘤发生发展的确切机制需在分子水平进一步研究，AEG-1有望成为膀胱癌基因治疗的新靶点。

参考文献

［1］ 王秀梅，郭阳，魏圣华，等. AEG-1在口腔鳞状细胞癌中的表达及与预后的关系［J］. 临床肿瘤学杂志，2015，20（5）：422-426.

［2］ 王伟，曹苏生，鹿存涛，等. 星形胶质细胞上调基因-1在乳腺癌中的表达及临床意义［J］. 中国肿瘤外科杂志，2013，5（6）：341-343，351.

［3］ 刘凯军，李勇，王文韬. 胃癌组织中AEG-1的表达及与临床病理特征关系的研究［J］. 河北医药，2012，34（5）：653-655.

［4］ 黄美金，吴雪铭，王春芳，等. AEG-1基因在非小细胞肺癌中的表达及其意义［J］. 重庆医学，2014，43（5）：545-547.

［5］ 罗何三，邹金金，董忠谊，等. 应用组织芯片研究aeg-1基因在多系统肿瘤中的表达［J］. 广东医学，2011，32（4）：440-443.

［6］ 袁相贵，赵小英. 星形胶质细胞上调基因-1在恶性肿瘤中作用的研究进展［J］. 实用肿瘤杂志，2012，27（2）：200-204.

［7］ 刘海燕，张新颖，王立俊. siRNA下调AEG-1表达对神经母细胞瘤细胞MMP-9的表达及侵袭能力的影响［J］. 中华小儿外科杂志，2011，32（6）：456-460.

［8］ 马建，吕国悦，谢淑丽，等. AEG-1-shRNA阻断AEG-1对肝癌细胞BEL-7402侵袭性的影响［J］. 中国老年学杂志，2013（33）：1338-1340.

【中图分类号】R735

【文献标识码】A

【文章编号】1674-9308（2016）15-0049-02

doi：10.3969/j.issn.1674-9308.2016.15.030

基金项目：河南省科技厅基础与前沿资助项目（152300410177） 漯河医学高等专科学校博士基金项目（2013-DL-002） 漯河医学高等专科学校校级项目（2014-S-LMC14）

作者单位：1 漯河医学高等专科学校科研处，河南 漯河 462002；2 漯河医学高等专科学校医疗系，河南 漯河 462002；3 太仓市第一人民医院病理科，江苏 太仓 215400

通讯作者：徐松涛，E-mail：582028819@qq.com

Expression and Clinical Significance of AEG-1 in Bladder Adenocarcinoma

ZHAO Lifang1CUI Dongtao2CHENG Qi2GU Guojian3XU Songtao2
1 Department of Scientific Research， Luohe Medical College， Luohe He’nan 462002， China， 2 Department of Clinical， Luohe Medical College， Luohe He’nan 462002， China， 3 Departments of Pathology， The First People’s Hospital of Taicang， Taicang Jiangsu 215400， China

［Abstract］Objective To investigate the expression of AEG-1 in human bladder adenocarcinoma. Methods The expression of AEG-1 protein was detected in 19 cases of bladder adenocarcinoma and 16 cases of paracancer tissues by immunohistochemical method. Results The positive expression of AEG-1 was 63.2% in bladder adenocarcinoma， which was higher than that in paracancer tissue. Conclusion Increased expression of AEG-1 is markedly correlated with tumor clinical classification. Detection of AEG-1 may be helpful to diagnosis and evaluate infiltrative capability of bladder adenocarcinoma.

［Key words］Bladder adenocarcinoma， AEG-1， Immunohistochemistry