与疾病相关的EPCR基因多态性研究进展

梁燕冰，覃月秋，廖品琥△

与疾病相关的EPCR基因多态性研究进展

梁燕冰1，覃月秋2，廖品琥1△

内皮细胞蛋白C受体（EPCR）是新发现的蛋白C抗凝系统中的重要一员，在抗凝、抗炎过程中发挥作用。由于EPCR单核苷酸多态性（SNP）的存在，引起可溶性内皮细胞蛋白C受体（sEPCR）表达水平的改变，影响多种疾病的易感性。本文就EPCR基因多态性与血栓性疾病、疟疾、脓毒症及其他疾病的关系进行综述。

疟疾；脓毒症；肿瘤；内皮细胞蛋白C受体；多态性，单核苷酸；血栓性疾病；综述

内皮细胞蛋白C受体（endothelial protein C receptor，EPCR）是蛋白C系统中蛋白C（protein C，PC）及活化蛋白C（actived protein C，APC）的受体，通过PC途径发挥细胞保护、抗炎、抗凝等作用。PC在凝血酶-血栓调节蛋白复合物存在的条件下，在血管内皮细胞表面被激活形成APC，APC则抑制活化的凝血因子Ⅴ和Ⅷ（FⅤa和FⅧa），从而下调凝血酶的生成。正常情况下，APC的生成与EPCR、凝血酶、血栓调节蛋白、PC等密切相关。任一环节的改变均会引起APC的生成增加或减少，从而引发各种疾病。随着人类全基因组计划的完成，学者们逐渐认识到单核苷酸多态性（SNP）对疾病的表型、易感性以及药物敏感性等的重要影响。近年研究发现，EPCR基因多态性与血栓性疾病、疟疾、脓毒症、肿瘤、不良妊娠等有关。深入研究EPCR基因多态性将有助于筛查疾病易感的患者，从而实施真正意义上的“个体化”治疗。本文简述了EPCR基因多态性与多种疾病的关系，为从遗传学方面探讨疾病的发生、发展提供理论基础。

1 EPCR的一般性质

1.1 EPCR基因（PROCR）EPCR位于20号染色体q11.2，全长约8 kb，包含4个外显子和3个内含子［1］。外显子1编码5′-非编码区（UTR）和信号肽，外显子2和3编码大部分的细胞外结构域，外显子4则编码蛋白质其余部分和3′-UTR［2］。目前已有多项关于EPCR基因变异从而影响EPCR分子表达及功能的研究，这些基因改变主要包括外显子3（6367位点）23 bp嵌入［3］，内含子2 6333C/T的多态性，5′-UTR 1651C/G的多态性［4］，外显子4 6936A/G的多态性（内皮细胞受体跨膜区域Ser219Gly的转变）［5］等。基于这些发现，人类EPCR基因型可分为4种，即H1、H2、H3和极其罕见的H4，其中H1、H3、H4包含1个或多个特殊单体型单核苷酸多态性（htSNPs），H2则包含所有SNPs常见的等位基因［6-7］。

1.2 EPCR蛋白由PROCR编码的EPCR蛋白与CD1/主要组织相容性复合物（MHC）Ⅰ蛋白家族受体具有同源性［2］，EPCR对PC/APC具有高亲和力，参与PC的活化，并通过谷氨酸（Glutamic acid，GLA）结构域与APC结合，促发细胞内抗炎和细胞信号的传导［8-10］。在金属蛋白酶的作用下，EPCR从内皮细胞表面脱落，形成可溶性EPCR（sEPCR），脱落后形成的sEPCR仍保持与PC/APC相结合的能力，但与膜型EPCR（mEPCR）作用相反，sEPCR则抑制APC的作用［11］。

2 EPCR基因多态性与血栓形成

研究表明，EPCR基因多态性与血栓形成有关，EPCR基因变异使PC与EPCR之间的相互作用发生改变，从而增加或降低静脉血栓形成的风险［12］。一项对下肢静脉血栓患者的研究发现，EPCR rs86718的基因多态性与下肢静脉血栓风险相关［13］。EPCR rs867186 A/G（H3基因型）位点AG、GG基因型和G等位基因携带者可通过升高血浆sEPCR水平，进而增加静脉血栓栓塞症（VTE）发病风险；而rs9574 C/G（H1基因型）位点CC基因型及C等位基因却是VTE的保护因素，并不影响血浆sEPCR水平［14-15］。在人脐静脉内皮细胞，H1基因型能提高mEPCR水平，促进PC的活化，但对EPCR mRNA的表达水平没有影响；H3基因型能降低mEPCR水平，降低PC活化率，并增加培养基中sEPCR的水平［16］。在儿童卒中风险的研究中也发现，无论患儿携带的是纯合子或是杂合子型的EPCR H3单倍体（rs2069940C/G），他们的sEPCR水平均大于100 ng/mL，说明了H3单倍体与sEPCR水平具有强相关性，并可以增加儿童卒中的风险［17］，与Pintao等［18］研究结果一致，其他的研究也表明了EPCR基因多态性与血栓形成的易感性有关［14，19-20］。但也有学者认为sEPCR的水平和（或）EPCR基因多态性与VTE易感性无关［21-22］。

3 EPCR基因多态性与疟疾

EPCR的表达及其功能的改变，可能影响疟疾的表型及发病易感性［23］。微脉管系统的EPCR可以隔离被恶性疟原虫感染了的红细胞，脑内皮细胞EPCR表达减少可以导致脑型疟疾微血管血栓形成［24-25］。相对于其他表型的重症疟疾，非洲贝宁地区的脑型疟疾患儿sEPCR水平较高［26］；而马拉维地区的脑型疟疾患儿sEPCR水平较低［24］；但坦桑尼亚及加纳的重症疟疾患儿sEPCR水平与重症疟疾无关［27-28］。不同地区EPCR基因变异对疟疾发生、发展的影响不同。来自泰国的一项研究结果认为EPCR rs867186-GG基因型是重症疟疾的保护因素［29］，然而坦桑尼亚地区研究发现EPCR rs867186 A/G和rs2069948 C/T位点虽然可以引起血浆sEPCR水平升高，但不影响疟疾发病的易感性［27］，与加纳地区的研究结果一致［28］。

4 EPCR基因多态性与脓毒症

研究发现，多种炎症因子如白细胞介素（IL）-6［30］、IL-8［31］、IL-10［32］等的基因多态性在不同地区、种族间的分布频率存在差异。脓毒症的临床治疗效果个体差异性较大，可能与遗传因素有关。研究表明基因多态性影响着脓毒症的发生发展过程，如TLR4基因rs11536889位点和CD14基因rs2563298位点均可增加脓毒症发病的易感性［33］；脓毒症患者常合并凝血功能紊乱，PC血清水平显著降低，使用重组人APC（rhAPC）治疗后，患者的预后得到明显改善［9］。一项脓毒症动物模型的研究发现，降低EPCR表达或阻断APC与EPCR的结合可以导致宿主对脂多糖（LPS）的炎症反应过度，导致动物的死亡率增加［34］，提示EPCR通过调节APC及其下游细胞产生细胞保护和抗凝血作用，参与了严重脓毒症和脓毒症休克（SS/SS）的发展［35］。已有研究表明SS/SS患者EPCR基因rs867186 A/G、rs2069940 C/G、rs2069952 C/T位点的多态性与脓毒症相关，同时携带H1和H3的等位基因可能降低危重患者发生SS/SS的风险［36］。EPCR基因多态性可影响儿童脓毒症的发展过程［37-38］。然而国内关于EPCR基因多态性与脓毒症关系的研究鲜有报道。从分子水平深入探讨脓毒症的发病机制，将有助于对疾病的早发现和早治疗。

5 EPCR基因多态性与其他疾病

恶性血液病患者血浆sEPCR水平与血栓形成有关［39］。EPCR rs867186 A/G基因型可作为急性髓性白血病患者发生血栓形成的风险基因型［5］。EPCR rs2069948位点基因多态性增加了乳腺癌发病的易感性［40］。而特定的EPCR基因变异可增加孕期深部静脉血栓的风险或通过改变sEPCR的水平导致不良妊娠结局［3-4，41］。携带EPCR rs867186 A/G变异的脑梗死患者，其血栓形成的风险增高［42］。肺癌患者血浆sEPCR水平升高和（或）rs867186 A/G基因型变异与肿瘤并发血栓事件之间可能相关［43］。但也有研究发现冠心病患者循环sEPCR水平、rs867186 A/G变异均与心血管事件发生易感性无关［44］。

6 结语

EPCR基因多态性与部分疾病的易感性有关，参与了血栓性疾病、疟疾、脓毒症、肿瘤、不良妊娠结局等疾病的发生发展。

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（2016-08-25收稿2016-09-20修回）

（本文编辑李鹏）

Research progress in the disease-related EPCR gene polymorphisms

LIANG Yanbing1,QIN Yueqiu2,LIAO Pinhu1△
1 Department of Critical Medicine,2 Department of Gastroenterology,Affiliated Hospital of Youjiang Medical College for Nationalities,Baise 533000,China△RevisorE-mail：liaopinhu@163.com

As an important part of the protein C anticoagulant system,endothelial protein C receptor(EPCR)plays a critical role in the process of anti-coagulation and anti-inflammation.The presence of EPCR single nucleotide polymorphism(SNP)affects the levels of soluble endothelial protein C receptor(sEPCR),and susceptibility to varieties of diseases.This article reviews the relationship between EPCR gene polymorphisms and thrombotic diseases，malaria，sepsis and other diseases.

malaria;sepsis;neoplasms;endothelial protein C receptor;polymorphism,single nucleotide;thrombotic disease;review

R446

A

10.11958/20160849

国家自然科学基金资助项目（81560321）；2014年广西医学高层次骨干人才培养“139”计划培养人选项目；广西高校急重症分子免疫研究重点实验室项目（yy2015ky002）；广西研究生教育创新计划项目（YCSZ2015222）

1右江民族医学院附属医院重症医学科（邮编533000），2消化内科

梁燕冰（1993），女，研究生在读，主要从事脓毒症基因学机制的研究

△审校者E-mail：liaopinhu@163.com