李 乐,郝志香
(1.新乡市动物卫生监督所,河南 新乡 453000;2.新乡市动物疫病预防控制中心,河南 新乡 453000)
一起猪伪狂犬病的诊断与防治
李 乐1,郝志香2
(1.新乡市动物卫生监督所,河南 新乡 453000;2.新乡市动物疫病预防控制中心,河南 新乡 453000)
猪伪狂犬病是由猪伪狂犬病毒(Pseudorabiesvirus,PRV)引起的猪的急性传染病。该病在猪呈爆发性流行。引起妊娠母猪流产、死胎,公猪不育,新生仔猪的大量死亡,育肥猪呼吸困难、生长停滞等。本病广泛分布于世界各地。近年来,随着我国集约化、规模化养猪业的发展,从国外引进种猪较多,使我国猪伪狂犬病呈多发趋势,发病区域不断扩大,且病势日益恶化,有多个省市均有报道。它以种猪的严重繁殖障碍、仔猪的脑脊髓炎—腹泻、猪的呼吸道综合征和生长发育受阻等临床形式表现,给养猪业造成了巨大的经济损失。2016年3月新乡县某猪场发生疑似猪伪狂犬病,通过系统的调查诊断,确诊为猪伪狂犬病。
猪伪狂犬病;诊断;防治
发病早期多以怀孕母猪流产和死胎为先兆,近三分之一的妊娠母猪在预产期前两周前发生流产,产出死胎,青年母猪和空怀母猪出现返情而屡配不孕或不发情,饮食欲正常,体温不高;新生仔猪第1 d表现正常,从第2 d开始发病,体温升高41~41.5℃,出生3~5 d是死亡高峰期,死亡率80%以上,同时,发病仔猪表现出共济失调、头颈歪斜、转圈运动等神经症状,怕冷,呼吸困难,呕吐,拉稀,一旦发病,突然死亡;两周龄以内的仔猪感染该病后,病情极严重,发病死亡率100%,仔猪突然发病,体温上升达41℃以上,精神极度委顿,发抖,运动不协调,痉挛,呕吐,腹泻等;断奶后的仔猪主要表现为呼吸困难,体温39~41℃,主要表现为神经症状,拉稀,呕吐等,严重影响猪只的发育生长,发病率在30%以下,死亡率在16%以下,如果拉黄色稀粪时,常以死亡为转归;成年猪一般为隐性感染,出现咳嗽、打喷嚏等呼吸系统症状。
剖解流产胎儿发现全身弥漫性出血,头部水肿,脑膜出血,脾脏出血或坏死,膀胱出血,全身淋巴结肿大,周边出血,肺、心外膜、肾脏有针尖状出血点。死亡仔猪除上述病理变化外,脑脊液、胸腹腔液、心包液显著增多,肝、脾表面可见大量针尖到米粒大小的灰白色病灶,胃肠黏膜卡他性或出血性炎症,扁桃体充血、水肿,有少量出血点,喉头出血,肺淤血、水肿,心肌松软。
3.1 样品采集与处理
采集解剖死亡猪后的组织(脾、肺、肝、肾、扁桃体及腹股沟淋巴结)样品2份,加入少许PBS液稀释研磨,在-70℃反复冻融3次后,4℃ 12 000 rpm离心5 min,取上清置-20℃保存备用。
3.2 核酸提取
核酸提取采用RNA/DAN纯化试剂盒(购自纪元亨),具体操作方法如下:取已处理样品,加入裂解液600 μL,充分颠倒混匀,室温静置3~5 min;将液体吸入吸附柱中,13 000 rpm离心30 s;弃去收集管中的液体,加入600 μL洗液,13 000 rpm离心30 s,重复一次;弃去收集管中液体,13 000 rpm空柱2 min,以除去残留液;将吸附柱移入新的1.5 mL离心管中,向中央加入洗脱液25~50 μL,室温静置1 min,13 000 rpm离心30 s,离心管中的液体即为病毒核酸模板。
3.3 猪伪狂犬病毒荧光PCR鉴定
猪伪狂犬病毒(PRV)荧光PCR鉴定采用猪伪狂犬病毒(PRV)核酸扩增试剂盒(PCR-荧光探针法),购自广州维伯鑫生物科技有限公司,检测方法及判定标准按照试剂说明书进行。对两份病料提取的模板及阳性质控和阴性质控进行荧光PCR扩增后,得到的结果见图1。根据结果(图1)可以看出,两份病料均为猪伪狂犬病毒阳性。
图1 临床组织样品荧光PCR鉴定PRV结果
根据实验室诊断结果,可以确诊该猪场是由猪伪狂犬病毒感染引起的发病和死亡。
5.1 阳性猪场的防治
阳性猪场及时隔离病猪,立即对全场未发病猪只全部进行基因缺失弱毒疫苗的紧急接种,提供保护,3日龄内仔猪每头注射1头份,种猪每头注射2头份,对控制疫情起到了较好效果。
5.2 阴性猪场的防治
阴性猪场调入猪规范检疫方可引入,为避免因引种带入病原的风险,提倡自繁自养;实施封闭式管理,猪场大门口来往人员、车辆的严格控制与消毒,控制生产一线人员外出,严格细化回场后的消毒净化工作,谢绝场外人员进入生产区参观;实行单一性饲养;建立健全符合本场实际的免疫程序,严格本病的免疫接种的操作规程,选用高效优质基因缺失灭活疫苗,使易感猪群始终得到有效保护,后备种猪基础免疫后,于配种前1个月,肌肉注射1头份,妊娠母猪产前4周,肌肉注射1头份,生产公猪每6个月,肌肉注射1头份,;建立健全和贯彻落实兽医防疫规章制度;制度化检测,逐步淘汰,建立无伪狂犬病的种猪群和猪场。
猪伪狂犬病流行呈上升趋势,控制与净化猪伪狂犬病是需要采取综合防制措施,其中正确地进行免疫接种是一个最有效的方式。要规范的引种,严谨的生物安全措施,引种时加强检疫措施,定期血清监测与病猪的果断淘汰,科学的免疫程序,良好的饲养管理以及优质高效的基因缺失疫苗的合理应用等。国内研制成功伪狂犬的常规弱毒疫苗、灭活疫苗以及基因缺失疫苗,能有效地防止狂犬病。目前基层主要注意对高致病性猪蓝耳病、猪瘟、猪丹毒等传染病的防疫,而对猪伪狂犬病的防疫有所松懈。建议根据本地疫情情况,加强防疫。消毒是杀灭病原、防止疫情蔓延的有效手段。
(编辑:李善祥)
S858.28
B
1006-799X(2016)22-0064-02
李 乐(1987-),男,河南新乡人,助理兽医师,主要研究方向为动物及动物产品检疫。