急性心肌梗死伴血小板计数减少患者血小板表面膜糖蛋白Ⅱb/Ⅲa复合物表达观察

王文龙,黄潇慧,张金盈

(郑州大学第一附属医院,郑州450052)

急性心肌梗死伴血小板计数减少患者血小板表面膜糖蛋白Ⅱb/Ⅲa复合物表达观察

王文龙,黄潇慧,张金盈

(郑州大学第一附属医院,郑州450052)

目的 观察急性心肌梗死伴血小板减少患者血小板表面糖蛋白(GP)Ⅱb/Ⅲa复合物表达变化并探讨其临床意义。方法 选择急性心肌梗死伴血小板减少患者50例为急性心肌梗死伴血小板减少组，急性心肌梗死血小板正常或增多患者52例为急性心肌梗死伴血小板正常或增多组，健康人20例为对照组。用流式细胞术检测血小板表面CD41和CD61，二者其中之一阳性或者均阳性视为GPⅡb/Ⅲa复合物表达阳性。计算各组血小板表面GPⅡb/Ⅲa复合物阳性表达率。结果 急性心肌梗死伴血小板减少组、急性心肌梗死伴血小板正常或增多组、对照组患者血小板表面GPⅡb/Ⅲa复合物阳性表达率分别89.0%±7.4%、97.0%±10.9%、79.0%±4.2%。急性心肌梗死伴血小板减少组、急性心肌梗死伴血小板正常或增多组患者血小板表面GPⅡb/Ⅲa复合物阳性表达率均高于与对照组，P均<0.05。按照血小板计数对急性心肌梗死伴血小板减少组患者进行分层，结果血小板计数80×109/L～<100×109/L者、50×109/L～<80×109/L者、30×109/L～<50×109/L者血小板表面GPⅡb/Ⅲa复合物阳性表达率分别为96.5%±18.9%、92.4%±8.0%、50.1%±4.1%。与对照组相比，血小板计数80×109/L～<100×109/L、50×109/L～<80×109/L的急性心肌梗死患者血小板表面GPⅡb/Ⅲa复合物阳性表达率升高(P均<0.05)，血小板计数30×109/L～<50×109/L的急性心肌梗死患者血小板表面GPⅡb/Ⅲa复合物阳性表达率降低(P<0.05)。结论 急性心肌梗死伴血小板减少患者血小板表面GPⅡb/Ⅲa复合物阳性表达率高于健康人，血小板50×109/L～<100×109/L的急性心肌梗死患者有必要进行抗血小板聚集治疗。

急性心肌梗死；血小板减少症；糖蛋白Ⅱ b/Ⅲa复合物

急性心肌梗死是指冠状动脉某支严重狭窄或完全闭塞而致部分心肌缺血性坏死。90%的急性心肌梗死患者有斑块血栓形成。血小板在血栓形成过程中发挥着重要的作用。血小板膜糖蛋白(GP)Ⅱb/Ⅲa在血小板黏附、聚集和血栓形成过程中发挥重要作用,也是抗血小板聚集药的靶点。急性心肌梗死患者血小板表面GPⅡb/Ⅲa复合物表达升高，但是急性心肌梗死伴血小板减少患者血小板表面GPⅡb/Ⅲa复合物表达情况并不明确。临床上抗血小板聚集药物只用于血小板数值正常及偏高的患者，急性心肌梗死伴血小板减少患者是否应该应用抗血小板聚集药物并不明确。本研究观察了急性心肌梗死伴血小板减少患者血小板表面GPⅡb/Ⅲa复合物表达变化，探讨急性心肌梗死伴血小板减少患者是否应该抗血小板聚集。

1 资料与方法

1．1 临床资料 选择2015年7月～2016年7月收治的急性心肌梗死伴血小板减少患者50例为急性心肌梗死伴血小板减少组，其中男25例、女25例，年龄42～65岁。血小板计数(72±11)×109/L，其中血小板计数80×109/L～<100×109/L者20例，50×109/L～<80×109/L者15例，30×109/L～<50×109/L者15例。选择同期收治的急性心肌梗死血小板正常或增多患者52例为急性心肌梗死伴血小板正常或增多组，其中男30例、女22例，年龄41～66岁，血小板计数(382±29)×109/L。同期接受体检的健康人20例为对照组，其中男14例、女6例，年龄45～65岁,血小板计数(194±27)×109/L。均排除心、 肝、 肾及血液系统疾患。所有受试者近 1周均未使用影响血小板活性的药物。均无特殊疾病史。三组患者性别、年龄分布相比,P均>0.05。

1．2 血小板表面GPⅡb/Ⅲa复合物检测方法 采集三组患者空腹静脉血2 mL，乙二胺四乙酸(EDTA)抗凝，1 000 r/min离心5 min，制备富血小板血浆。取富血小板血浆200 μL，加等量0.1%多聚甲醛固定30 min。用于流式细胞仪和流式细胞术检测血小板表面CD41和CD61，操作按试剂盒说明书进行。二者其中之一阳性或者均阳性视为GPⅡb/Ⅲa复合物表达阳性。计算各组血小板表面GPⅡb/Ⅲa复合物阳性表达率。

2 结果

急性心肌梗死伴血小板减少组、急性心肌梗死伴血小板正常或增多组、对照组患者血小板表面GPⅡb/Ⅲa复合物阳性表达率分别为89.0%±7.4%、97.0%±10.9%、79.0%±4.2%。急性心肌梗死伴血小板减少组、急性心肌梗死伴血小板正常或增多组患者血小板表面GPⅡb/Ⅲa复合物阳性表达率均高于与对照组，P均<0.05；急性心肌梗死伴血小板减少组患者血小板表面GPⅡb/Ⅲa复合物阳性表达率与急性心肌梗死伴血小板正常或增多组相比，P>0.05。进一步按照血小板计数对急性心肌梗死伴血小板减少组患者进行分层，结果血小板计数80×109/L～<100×109/L者、50×109/L～<80×109/L者、30×109/L～<50×109/L者血小板表面GPⅡb/Ⅲa复合物阳性表达率分别为96.5%±18.9%、92.4%±8.0%、50.1%±4.1%。与对照组相比，血小板计数80×109/L～<100×109/L、50×109/L～<80×109/L的急性心肌梗死患者血小板表面GPⅡb/Ⅲa复合物阳性表达率升高(P均<0.05)，血小板计数30×109/L～<50×109/L的急性心肌梗死患者血小板表面GPⅡb/Ⅲa复合物阳性表达率降低(P<0.05)。

3 讨论

急性心肌梗死后血浆中含有丰富的促血小板激活物质， 使血小板活性及黏附性明显增高[3]。已证实急性心肌梗死后血小板α-颗粒膜蛋白 (GMP-140) 释放增多[4]。血小板膜表面糖蛋白Ⅳ(GPⅣ) 分布增多及血小板内凝血敏感蛋白 (TSP) 释放是血小板激活敏感指标[5,6]， 其敏感性较血小板膜 GMP-140增多更高[5]， 二者在血小板膜表面的结合， 参与血小板的不可逆聚集。血小板表面主要由糖萼蛋白和细胞膜组成。糖萼蛋白为细胞外衣，由糖蛋白和糖链部分组成。膜蛋白主要为糖蛋白，其中GPΙb参与血小板的黏附，GPⅡb/Ⅲa复合物与血小板聚集有关。GPⅡb/Ⅲa复合物广泛分布于血小板表面,每一细胞上大约有50 000个GPⅡb/Ⅲa复合物。GPⅡb/Ⅲa复合物主要由α和β亚单位两部分组成。GPⅢa即β亚单位，相对分子质量为92 kD，由762个氨基酸组成，包括短胞内区、跨膜区和长胞外区。GPⅡb/Ⅲa复合物是血小板聚集和血栓形成的一个关键因子，是各种血小板激活剂所产生的激活信号的最后传导通路，也是抗血小板聚集药物的主要靶点。本研究结果显示，急性心肌梗死伴血小板减少组、急性心肌梗死伴血小板正常或增多组患者血小板正常或表面GPⅡb/Ⅲa复合物阳性表达率均高于与对照组；急性心肌梗死伴血小板减少组患者血小板表面GPⅡb/Ⅲa复合物阳性表达率与急性心肌梗死伴血小板增多组相比差异无统计学意义。与健康人相比，血小板计数80×109/L～<100×109/L、50×109/L～<80×109/L的急性心肌梗死患者血小板表面GPⅡb/Ⅲa复合物阳性表达率升高，血小板计数30×109/L～<50×109/L的急性心肌梗死患者血小板表面GPⅡb/Ⅲa复合物阳性表达率降低。提示即使是伴血小板减少(50×109/L～<100×109/L)的急性心肌梗死患者，血小板表面GPⅡb/Ⅲa复合物阳性表达率仍高于正常人，应该进行抗血小板聚集治疗。

常规临床医学工作中，血小板减少患者在出现血栓的情况下，是否应行抗血小板聚集抗凝治疗一直不明确。笔者查阅了国内外相关文献，均未明确表述在合并血小板减少的急性心肌梗死患者中抗血小板聚集的方法[8～12]。本研究结果显示，血小板50×109/L～<100×109/L的急性心肌梗死患者血小板表面GPⅡb/Ⅲa复合物的表达仍高于健康人，需要进行抗血小板聚集治疗。笔者推测其原因是血小板存在特殊的膜系统，包括开放管道系统、致密管道系统以及膜复合物。开放管道系统和致密管道系统存在着相互联系，通常在1～2个细胞质区域内可见到两种管道系统构成的复合体(膜复合体)，外形多不规则。在复合物体内，开放管道系统成堆地或成串地在一起，而致密管道系统交错穿插排列在开放管道系统之间[13～17]。血小板减少患者，体内存在的抗凝系统功能反馈性增强，血友病因子升高，血小板GP数量及构象改变。这种构象的改变会使GPⅡb/Ⅲa复合物被更多的暴露于血小板膜[13～16]， 血小板活性增高。但本研究结果显示，血小板数值<30×109/L的急性心肌梗死患者血小板表面GPⅡb/Ⅲa复合物的表达低于正常人,不需要抗血小板聚集治疗。

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张金盈(E-mail: Vellonvon@foxmail.com)

10.3969/j.issn.1002-266X.2016.47.019

文献标志码：B 文章编号：1002-266X(2016)47-0064-03

2016-09-05)