现代色谱技术在中药检验中的运用研究

赵杰 辽宁省 鞍山市肿瘤医院 （鞍山 114033）



现代色谱技术在中药检验中的运用研究

赵杰 辽宁省 鞍山市肿瘤医院 （鞍山 114033）

色谱分析技术是中药检验时主要技术手段，用于分离、分析中药中各类、各种有效成分。我国药典中收录记载的中药材和制剂中，60%以上的药物是使用色谱法检验，色谱技术是中药检验的主要方法［1］。随着色谱仪器的更新、技术提高和分离、分析系统的精密度增强，现代色谱分析具有高效、快速、微量检测和自动化分析等优势。现代色谱技术应用于中药以及制剂的分析、检验中，应用价值高，需要继续发展和推广。本文搜集中药检验中有关色谱技术的发展和前景，总结报道如下：

1.气相色谱技术应用于中药检验

气相色谱法是重要的挥发性中药成分检测方法和技术。直接蒸发气相色谱技术是检测样本中挥发性组分。检查时，通过加热等方法使待测物质中挥发性物质在短时间内蒸发，蒸发的气体进入气相色谱柱进行分离和分析。直接蒸发气相色谱法能够使用少量样本，仅需1～2mg，待测样本处理时间短，在蒸发容器内加热数分钟即可蒸发成气体，避免中药中含量低的成分所需大量样本的浪费［2］。有机溶剂提取或蒸馏搜集样本过程，操作复杂、过程繁琐和提取不充分等不足，不适合用于珍贵药材或药材中微量成分的搜集和分析。

气相色谱法弥补了有机溶剂抽提和蒸馏的不足，适用于珍贵药材和微量成分的提取和分析。如使用SE-3-熔融石英毛细管柱联合FID检测系统测定六味地黄丸中丹皮酚的量，使用OV-17弹性石英毛细管柱以及不锈钢柱测定牛黄解毒片中冰片的量［3］。

毛细石英柱分离效果好，联合FID检测系统，可以对中药中多种成分进行分组分离和分析鉴定。在检测中药油脂组分挥发实验时能够代替填充柱进行检测成分的分离和搜集。毛细管分离牛黄解毒丸中冰片成分时，可以使用升温毛细管分析多个产地、来源的药材中可挥发油组分。毛细管柱法联合质谱分析结合了毛细管柱高效分离、搜集能力，以及质朴分析高效的鉴别能力，应用计算机数据库进行数据分析，快速分离和鉴别中药材挥发油组分。又比如使用SE-54石英毛细管联用DS分离新疆阿魏挥发油的挥发物质，挥发气体中测出23种化合物，并且可以进行定量分析［4］。

气相色谱联合傅里叶变换红外检测仪对顺反异构体检测具有高度敏感性和准确性，是中药挥发油组分检测、分析的有一种有效手段。中药油组分挥发、使用毛细管分离后，分离到的组分进入气体收集光管中，将各组分的气相红外光图谱作为数据搜集、整理，变换傅里叶干涉图谱后，将采集到的数据与数据库内红外光谱图进行比对和鉴定［5］。

大口径厚液膜毛细管柱结合填充柱以及毛细管柱的优势，其容量大、分离柱分离效率高、分析组分时间短、分离柱吸附作用有限等优势。比如，二甲基聚硅氧烷交联毛细管柱定量分析风油精成分，其检测结果精确度明显高于填充柱。

2.高效液相色谱分析法应用于中药检验

高效液相色谱分析法分析速度快、精确度高、重复性好的优势。随着对中药新药材研发、质量控制的要求越来越严格，紫外检测仪器只能检测具有吸收紫外线的物质成分，检测范围受限制。所以，研发并应用一种通用型检测器-蒸发光散射检测器，可用于所有非挥发性中药组份的检测，其分离速度快、工作效率高、检测范围广泛，与高效液相色谱联用，可测定多种有机大分子物质。

蒸发光散射检测器使用时，先将色谱分离柱内分离出的组分和流动相进入雾化器，雾化作用生成雾状颗粒进入蒸发器，蒸发器内有溶剂，照射颗粒后光束发生散射，搜集并检测又光信号转变为的电信号。因为在检测过程中，流动相已经在检测前蒸发，不存在溶剂峰对结果的影响，而且对流动相温度没有要求，所以，梯度洗脱时基线平稳，检测结果灵敏度高，可用于一次进样后梯度洗脱的复杂中药组份检测分析。使用蒸发光散射检测器联合高效液相色谱检测西洋参中含有的皂苷元含量，检测结果灵敏度、分离准确性均显著高于紫外检测仪器联合高效液相色谱法。使用蒸发光散射检测器和高效液相色谱分析胆汁中含有胆酸的种类和含量，使用挥发性盐调节流动相pH值、甲醇-水洗脱梯度，检测结果非常准确［6］。所以，高效液相色谱法联合蒸发光散射检测器应用于复杂中药成分分析、含有效成分药物部位等检测分析实验中，该方法结果可靠、操作简便。

3.色谱以及超临界流体萃取法应用于中药检验

超临界流体萃取技术是根据超临界流体的相似液体高密度、相似气体的低粘度特点，从固体待测样本中提取组分。常用CO2作为超临界流体提取介质，对中等级性以及非极性组分萃取效果好。需要萃取不同极性物质时可以通过调节实验压力、温度、改进剂等萃取到中药中有效成分物质。超临界流体萃取技术能够在无氧、低温实验条件下完成，利于萃取挥发性、热不稳定、易被氧化的成分。

使用超临界流体技术能够提取同一样本中性质、结构相似组分，提取效果优于超声波提取法，中药组分提取时可以联合色谱仪进行分离、测定。超临界流体色谱分析是将超临界流体作为流动相的色谱分析方法，分离柱使用交联毛细管柱，对检测器要求较低，检测时待测组分传递时间短，分析时间短，可用于中药组分检测［7］。

毛细管电泳法也是一种液相分离技术，其检测结果灵敏度高、柱效高、分析速度快、应用范围广，可联合各种检测仪器、设置各种分离模式，广泛应用于国内外中药以及天然药物组分采集和分析中。其中，毛细管区带电泳是最基本、应用最广泛的分离模式，在高压电作用下，各种分子颗粒在毛细管电解质中因为移动速度不同所以达到区分的目的。随着技术发展，毛细管电泳分离速率提高、定量检测物质种类增多、所需样本量少、可以联合质谱分析，可以用于中药组分分析。

胶束电动毛细管色谱是毛细管电泳法的一个重要分支手段，将离子型表面活性剂中加入缓冲液，化学反应后生成内核疏水胶束，用于分离离子型化合物的同时分离中性物质。毛细管凝胶电泳根据不同分子大小、凝胶介质达到分离物质的能力，用于分离、分析核酸和蛋白质［8］。

综上所述，气象色谱法、高效液相色谱法、超临界流体萃取法以及毛细管电泳都可以用于中药检验中，可根据实验目的进行选择和设计实验。

参考文献

［1］ 聂平，肖炳燚，罗晖明，等.超高效液相色谱-质谱联用技术在中药指纹图谱中的应用［J］.中南药学，2013，11（7）:524-527.

［2］ 关瑾，许文雅，阎峰，等.液相色谱-质谱联用技术在药物代谢组学研究中的应用进展［J］.药物分析杂志，2016，36（1）: 9-16.

［3］ 陈建琴.液相色谱-质谱联用技术在违法添加物检测的应用进展［J］，广西中医药大学学报， 2014，17（1）: 119-121.

［4］ 吴春艳，耿姝，伊晓娇，等.中药质量分析与评价的研究进展［J］.理化检验-化学分册，2015，51（7）:1035.

［5］ 陈士林，郭宝林，张贵君.中药鉴定学新技术新方法研究进展［J］，中国中药杂志，2012，37（8）:1043-1055.

［6］ 李佩，李银峰，王杰晶，等.固相萃取技术在药物分析中的应用［J］，现代药物与临床， 2013，28（2）:261-264.

［7］ 李婷菲，叶斌.生物技术在中药及天然药物研究中的应用进展［J］.海峡药学，2015，27（9）: 9-11.

［8］ 李德强，肖媛媛，戴荣源，等.靶分子亲和-质谱联用技术在中药活性成分筛选中的应用进展［J］.中国临床药理学杂志， 2015，31（21）: 2164-2169.

文章编号：1006-6586（2016）01-0022-02 中图分类号：R286.0

文献标识码：A