超声引导下细针穿刺组织学检查联合细胞块免疫组织化学与粗针组织学检查在浅表淋巴结病变诊断中的对比研究

戴维德,吴明晓,陈秀华,王川予,陈岚,马卫华,韩秀婕,郭发金

(北京医院,a 超声科,b 病理科,北京 100730)



·论著·

超声引导下细针穿刺组织学检查联合细胞块免疫组织化学与粗针组织学检查在浅表淋巴结病变诊断中的对比研究

戴维德a,吴明晓a,陈秀华a,王川予a,陈岚b,马卫华a,韩秀婕a,郭发金a

(北京医院,a 超声科,b 病理科,北京 100730)

[摘要]目的对比分析超声引导下细针穿刺组织学检查联合细胞块免疫组织化学与粗针组织学检查对于诊断浅表淋巴结疾病的临床应用价值。方法选取淋巴结病变患者75例，超声引导下分别采用25G细针及18G活检针穿刺取材，所获得标本分别送细胞学检查结合细胞块免疫组织化学以及组织学检查结合免疫组织化学检测。对两者的诊断结论并结合随访结果进行回顾性分析及对比。结果本组病例细针穿刺取材成功率为93.3%(70/75)，粗针穿刺取材成功率为96.0%(72/75)。70例细针穿刺患者中，64例细胞学检查与细胞块免疫组织化学联合诊断结果与随访结果相符，临床诊断符合率为91.4%(64/70)。72例粗针穿刺患者中，67例组织学检查结合免疫组织化学联合诊断结果与随访结果相符，临床诊断符合率为93.1%(67/72)。两种不同方法检测结果比较，其穿刺取材成功率及临床诊断符合率差异无统计学意义(P>0.05)。结论超声引导细针抽吸细胞学检查联合细胞块免疫组织化学诊断浅表淋巴结病变简便实用、安全可靠，与粗针组织学检查的临床诊断符合率无差异。

[关键词]淋巴系统疾病;活组织检查,针吸;超声检查

超声引导淋巴结粗针穿刺组织学检查(CNB)已广泛应用于临床浅表肿大淋巴结病变的鉴别诊断。粗针穿刺活检能获得较多的组织，对病理诊断极为重要[1-2]。但对于一些高龄体弱、凝血机制差的患者则不适用，为相对或绝对禁忌证。而细针抽吸(FNA)细胞学检查由于所获得的细胞样本量有限、病理要求高等使其结果有一定的局限性[3-4]。本研究应用超声引导FNA细胞学检查结合细胞块免疫组织化学诊断淋巴结病变，并与CNB进行对比研究，旨在探讨前者对于诊断浅表淋巴结疾病的临床应用价值。

1对象和方法

1.1研究对象2014年1月至2015年10月在我院门诊及病房就诊的淋巴结肿大病因待查的患者75例，其中男45例，女30例；年龄19～95岁，平均年龄(51.9±7.3)岁；其中颈部及锁骨上淋巴结48例，腋窝淋巴结19例，腹股沟淋巴结6例，其他部位淋巴结2例。在行淋巴结穿刺前常规检测凝血功能、血常规；医生向患者或其家属详细交代超声引导穿刺的方法、目的、注意事项及可能出现的并发症，并签署知情同意书。

1.2方法

1.2.1设备器材百胜Mylab90型彩色多普勒超声成像系统，探头频率5～12 MHz。穿刺器材：10 mL一次性注射器和25 G空针各3支；美国产BARD全自动活检枪，配18GTru-cut活检针(切槽长17 mm，弹射距离15 mm和22 mm两档)。

1.2.2操作方法患者取仰卧位或侧卧位，充分显露穿刺部位，先进行常规淋巴结超声检查，选择最佳穿刺点、测量进针深度并完成体表定位。穿刺部位常规消毒铺巾，2%利多卡因局部麻醉。(1)FNA：手持10 mL注射器接25 G针头，在彩色多普勒超声引导下避开大血管、神经及气管等重要组织和脏器，进针到达肿块边缘。沿淋巴结长轴进入淋巴结皮质内，确定已刺入淋巴结内后，提拉注射器针芯至2 mL刻度处，使注射器保持负压状态，反复旋转抽吸3～5次后改变进针方向，使针头在淋巴结内呈扇形朝不同方向抽吸，当注射器乳头内出现吸取物后，去负压退针。一部分吸取物常规涂片2～3张，置入95%乙醇固定液中；一部分注入液基薄层细胞学检测(TCT)小瓶中并送病检。穿刺部位无菌纱布覆盖并以适当力量压迫穿刺点10 min。观察20 min无不良反应方可离开。(2) CNB：粗针尖刺破穿刺点皮肤，术者将18G针从穿刺点刺入，按超声提示避开大血管、神经及气管进针到达淋巴结边缘。迅速按压活检枪扳机，随即退针完成活检，检查标本量是否足够并迅速用甲醛液固定并送病检。穿刺部位予无菌纱布覆盖并以适当力量压迫穿刺点20 min。并观察30 min无不良反应方可离开。

1.3免疫组织化学疑诊来源于甲状腺的病例，选用Tg；疑诊来源于肺或胃肠道的病例，选用CK7；疑诊来源于鼻咽部的病例，选择CK14；而疑诊神经内分泌起源的病例，选择TTF-1、CgA及Syn。

1.4诊断标准以细胞学或组织学检查和免疫组织化学结果找到原发病灶或按照细胞学或组织学检查及免疫组织化学结果经相应治疗后好转或痊愈为诊断明确的标准。

1.5统计学处理采用SPSS13.0统计软件，行χ2检验。P<0.05为差异有统计学意义。

2结果

本组75例病例FNA取材成功率为93.3%(70/75)，70例FNA取材成功者中，64例细胞学检查与细胞块免疫组织化学联合诊断结果与随访结果相符，临床诊断符合率为91.4%(64/70)，不能明确诊断6例(8.6%)。本组75例病例CNB取材成功率为96%(72/75)。72例CNB取材成功者中，67例组织学检查结合免疫组织化学联合诊断结果与随访结果相符，临床诊断符合率为93.1%(67/72)。不能明确诊断5例(6.9%)。两种不同方法检测结果比较，其穿刺取材成功率及临床诊断符合率差异均无统计学意义(χ2=0.13，P>0.05)。

3讨论

浅表淋巴结病变病因复杂，细菌、病毒感染或肿瘤细胞浸润等都可引起局部淋巴结肿大或形态改变[5-6]。仅仅依靠临床表现、影像学检查及实验室检查往往难以确诊。病理学检查是对这类疾病诊断的金标准。目前临床多采用外科手术切除、超声引导粗针组织学穿刺检查或细针抽吸细胞学检查来获取淋巴结组织[7]。手术切除活检的优点是取材完整，易于满足病理检查的需要。但对患者来讲，创伤较大，易损伤周围重要脏器及血管和神经，费用且高，患者依从性也较差。超声引导下粗针穿刺淋巴结活检所造成的创伤较手术要小，一般都能够获得充足的结构保存良好的组织，在组织形态学检查的基础上可以进一步进行免疫组织化学检测，具有较高的诊断效能。是鉴别浅表淋巴结良恶性的重要手段之一[8]。但这两项技术都受到患者年龄、活检部位、出凝血状态等多因素影响。对于年老体弱患者应用受限。传统的超声引导下FNA细胞学检查创伤小、操作简单、快捷[9]，患者的依从性很好，极少发生严重并发症。FNA吸出的细胞常规进行细胞学涂片检查，通过对细胞内核膜、核仁及核质比等细胞形态异型性的观察，对淋巴结病变进行鉴别判断。由于细针穿刺获取的是细胞学结构，对肿瘤生长的组织特异性诊断、分型以及判断转移癌的组织来源有一定的局限性，影响了FNA的诊断效能。

本研究将细胞块免疫组织化学检测技术与FNA联合应用。细胞块作为细胞学诊断中重要辅助手段之一，可以连续切片，标本易于保存。与细胞涂片相比，细胞块中的细胞集中，背景清晰。细胞块更有利于做免疫组织化学标记[10]。清除部分血细胞及炎症细胞后，细胞块不会出现细胞学涂片中细胞重叠拥挤、厚薄不一等现象，不仅提高了细胞学诊断的阳性率，而且有助于确定肿瘤的良恶性、组织亚型及组织来源。国外已将其作为常规技术应用于临床[11-12]。本研究在结合临床病史、其他相关检查及细胞学涂片检查的前提下，从CK7、CK14、CK20、TTF-1、CgA、Syn等相关抗体中选取多个组合进行联合检测。91.4%的病例获得了明确诊断，确定了病变性质和组织类型。与CNB组织学检查结合组织免疫组织化学结果比较,临床诊断符合率差异无统计学意义。结合本研究早期结果，两者联合检测临床诊断符合率明显高于单纯FNA细胞学检查诊断符合率，表明细胞块组化免疫技术极大地提高了单纯FNA细胞学检查的诊断效能。

综上所述，超声引导FNA简便实用、安全可靠，患者依从性好，而抽吸出的细胞样本经细胞学检查联合细胞块免疫组织化学诊断淋巴结病变，能显著提高诊断符合率，对于年老体弱或因活检部位、出凝血状态致CNB应用受限的患者具有较高的临床应用价值。

参考文献

[1]Burke C,Thomas R,Inglis C,et al.Ultrasound-guided core biopsy in the diagnosis of lymphoma of the head and neck.A 9 year experience[J].Br J Radiol,2011,84(1004):727-732.

[2]唐丽娜，沈友洪，吴周贵，等.超声引导下粗针穿刺活检在淋巴瘤诊断中的价值[J].中华医学超声杂志(电子版)，2015,12(3):247-250.

[3]Koo V，Lioe TF，Spence RA.Fine needie aspiration cytology in the diagnosis of granulomatous lymphadenitis[J].Ulster Med J,2006,75(1)：59-64.

[4]刘蕾蕾，陈辉，李万春,等.颈部淋巴结细针穿刺误诊原因分析[J].医学研究生学报，2015,28(1):58-60.

[5]Martin BM,Etra JW,Russell MC,et al.Oncologic outcome of patients undergoing videoscopic inguinal lymphadenectomy for metastatic melanoma[J].J Am Coll Surg,2014,218(4):620-626.

[6]Ren G,Cai R,Zhang WJ,et al.Prediction of risk factors for lymph node metastasis in early gastric cancer [J].World J Gastroenterol,2013，19(20): 3096-3107.

[7]陈慰峰.医学免疫学[M].4版.北京：人民卫生出版社，2004:16-18.

[8]韩峰，李安华，邹如海，等.超声引导颈部淋巴结活检的对比研究[J].中国超声医学杂志,2008，24(10)：888-890.

[9]汪宏梅.133例颈部淋巴结细针穿刺细胞学分析[J].西部医学,2012，24(7)：1377-1378.

[10] Kulkarni MB,Prabhudesai NM,Desai SB,et al.Scrape cellblock technique for fine needle aspiration cy tologysmears[J].Cytopathology,2000,11(3):179 -184.

[11] 刘福川，王小兵，陈守菊，等.胸腹水细胞块的免疫组织化学研究[J].中国肿瘤，2004,13(1): 42-44.

[12] Shehnaz K,Tanvier O,Pamela M，et al.Effectiveness of the cell block technique in diagnostic cytopathology[J].J Cytol,2012,29(3): 177-182.

Comparative research of ultrasound-guided fine needle aspiration cytology with cell block immunohistochemistry and coarse needle bioptic histopathology in the diagnosis of superficial lymph node diease

DaiWeide*,WuMingxiao,ChenXiuhua,WangChuanyu,ChenLan，MaWeihua，HanXiujie，GuoFajin

(*DepartmentofUltrasound,BeijingHospital,Beijing100730,China)Correspondingauthor:GuoFajin,Email:guofajinbh@163.com

[Abstract]ObjectiveTo compare the clinical value of cytology with cell block immunohistochemistry from ultrasound-guided fine needle aspiration(FNA) and coarse needle biopsy(CNB) in the diagnosis of superficial lymph node diseases.MethodsSeventy-five cases patients with superficial lymph node disease were collected from January 2014 to October 2015 in our hospital and they were treated by ultrasound-guided FNA and CNB.The cytological samples were detected by cytological examination and cell block immunohistochemistry.The follow-up results were retrospectively analyzed and compared.ResultsThe puncture success rate of FNA group and CNB group were 93.3% (70/75) and 96.0%(72/75) respectively.The results of 64 cases were consistent with follow-up results in 70 patients of ultrasound-guided FNA,the coincidence rate was 91.4% (64/70).The results of 67 cases were consistent with follow-up results in 70 patients of CNB,the coincidence rate was 93.1% (67/72).There was no statistical difference between puncture success rate and coincidence rate of two groups(P>0.05).ConclusionThe method of ultrasound-guided FNA cytology with cell block immunohistochemical is simple,practical,safe,reliable,and has same value as CNB in the diagnosis of lymph node disease.

[Key words]Lymphatic diseases;Biopsy,needle;Ultrasonography

基金项目：国家科技支撑计划课题(2014BAI08B03)

作者简介：戴维德，博士，主任医师，Email：dai.weide@126.com通信作者：郭发金，主任医师，Email：guofajinbh@163.com

中图分类号:R551.2

文献标识码:A

DOI:10.3969/J.issn.1672-6790.2016.02.011

(收稿日期：2016-01-10)