周翔 中南大学肾脏病研究所(肾脏疾病与血液净化学湖南省重点实验室) (湖南 长沙 410011)
BD FACSJazz分选型流式细胞仪操作技巧及维护方法
周翔中南大学肾脏病研究所(肾脏疾病与血液净化学湖南省重点实验室)(湖南 长沙410011)
内容提要: 流式细胞仪是集激光技术、电子物理技术、光电测量技术、电子计算机技术、细胞荧光化学技术为一体的新型高科技仪器,能够同时对细胞多种生物物理、生物化学方面的指标快速、准确定性和定量分析,而分选型流式细胞仪可以在分析的基础上对目的细胞进行分离[1,6]。基于流式细胞仪的强大功能,已被广泛应用于免疫学、血液学、肿瘤学等领域[2]。正因为流式细胞仪是大型高精密仪器,故在操作人员、日常维护以及故障处理方面经验要求较高。[3~4]。
BD FACSJazz分选流式细胞仪操作维护
BD FACSJazz分选型流式细胞仪是美国BD公司于2012年推出的一款空气激发的流式细胞分选仪,实验室购置于2014年。该仪器的电源、电子设备、鞘液和废液桶和主机分开,可放置于实验台下,有效减小了仪器的体积,使其可被安装在生物安全柜中,从而可以方便的进行无菌分选。该仪器配备有三个摄像头,能实时视频监控激光和液路。便于及时调整。运用BDFACS™Accudrop专利技术能准确调节液滴延迟。
BD FACSJazz分选型流式细胞仪的基本结构包括液流系统、光学系统、计算机分析系统、分选系统。在日常操作中,主要分为液路调节、光路调节、分选调节、日常维护。尤其需注意以下事项:
①开启液流前,需将喷嘴超声5min,并用去离子水正反向冲洗。安装后,需将喷嘴上残余液滴用干净无菌纸巾吸干。
②连接鞘液的管路中需安装过滤器,每次使用需排空管路空气,鞘液桶压力需稳定在28psi。
③开启液流后,如喷嘴及液路中有残留空气,需反复冲洗,直至排净。
④侧液流需调节到最亮。 偏转板需擦拭干净,不能有水珠。Accudrop调节液滴延迟时需准确。
①保持鞘液桶和废液桶压力稳定,连接鞘液桶与机器的管路间必须要安装过滤器,去除鞘液中杂质及管路中气泡。
②喷嘴在用之前和用完后都必须超声及用去离子水冲洗,存放在去离子水中,防止杂质或沉淀物堵塞喷嘴。
③每次关机之前需用10%次氯酸钠和去离子水分别冲洗进样针5min,防止杂质或沉淀物堵塞喷嘴。
④进行无菌分选前需用70%酒精和无菌鞘液加入鞘液桶分别冲洗管路30min。
⑤关机后,偏转板需从仪器上取下并搽拭干净。防止残留液体腐蚀偏转板。
⑥关机后,应及时清除废液桶,加入适量次氯酸钠溶液,防止细菌生长。
4.1正常开机顺序,仪器分选收集板无法复位,软件调节失灵。
故障分析及排除:此故障在BD FACSJazz分选型流式细胞仪常见和特有,是软件功能存在缺陷或不完善之处而导致。当联机成功以后,直接关掉操作软件界面,再重新点击图标打开软件重新联机,收集板可复位,软件也可调节。该仪器于2012年面世,上市时间不长,软件不完善之处只能等待系统升级而彻底解决。
4.2液流不稳定,侧液流无法分出。故障分析及排除:液流不稳定,侧液流无法调出直接影响分选效率,或直接导致无法正常分选。导致其产生的原因及解决方法:
①喷嘴堵塞。将喷嘴取下,重新超声,并用注射器反复正反冲洗。可适当延长超声时间及提高水温。
②偏转板沾有水滴。由于偏转板带电,容易使液流偏转溅到偏转板上,而使侧液流无法分出。取下偏转板,用去离子水反复冲洗,再用干净纸巾搽拭干净或用电吹风吹干。[7]
分选型流式细胞仪是大型精密仪器,无法完全避免出现故障。仪器的使用必须配备专业、专职的技术人员,技术人员在提高专业知识的同时,必须耐心、细致的观察观察,充分做好日常维护、严格按标准操作规程执行可以有效降低故障发生频率,延长使用寿命,才能充分发挥临床和科研领域中的作用。
[1] 王淑静,郝建民,毕建杰,等. 流式细胞仪的使用与维护[J].中国现代教育装备, 2011(11):55-56
[2] 李华,常莹.流式细胞仪工作原理与临床应用[J].中国医疗器械信息,2011,17(5):37-39,45.
[3] 赵书涛,武晓东,王策, 等. 流式细胞仪的原理、应用及最新进展[J]. 现代生物医学进展, 2011, 11(22):4378-4381
[4] 刘波.流式细胞仪及其临床应用[J].中国医疗设备,2013,28(7):66-69.
[5] 董荔红.流式细胞仪检测直方图在常见故障维护中的应用[J].中国医疗设备, 2009, 24(10):106-107
[6] 袁红,江素君,尹洪萍. 流式细胞仪在医学实验中的应用[J].健康研究, 2009, 29(4):306-308
[7] 马莉,顾健,吴蔚,等.. BD Calibur流式细胞仪维护方法与技巧[J].中国医学装备, 2013.10(12):128-129
1006-6586(2016)03-0125-02
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