(上海市奉贤区动物疫病预防控制中心,上海 201400)
口腔液在猪病检测上的应用
卫秀余
(上海市奉贤区动物疫病预防控制中心,上海 201400)
血清中抗体的检测在猪病诊断、健康状况调查和免疫效果评估中使用广泛,特别是对养猪业有重大影响的猪瘟、猪蓝耳病、猪口蹄疫和猪伪狂犬病抗体每年都要进行检测,以控制疫病的发生。现有的针对这些病原产生的抗体检测试剂盒都是为了检测血清中的IgG,但血清样品采集费时费力、对猪的应激明显,尤其是对公、母猪采血时还会对采样人员的安全造成一定威胁,经常采血也不符合动物福利的要求。而口腔液的采集比较方便,一般在猪只饲喂前1 h左右、用白色棉纱绳悬挂在猪栏上,让猪自由咀嚼20~30 min后收集吸附在棉纱绳上的口腔液,冷藏保存送检。
口腔液是一种唾液和黏膜渗出液的混合物,其中含有来自血液中的IgG以及黏膜免疫产生的分泌型IgA 和IgG抗体[1]。分泌型 IgA 由唾液腺的浆细胞分泌[2],而唾液中绝大多数的 IgG 来自血清,也有一些IgG 是局部产生的[3]。分泌型抗体的产生对抗原的中和以及感染状态的确定有特别的意义[4]。使用口腔液进行疾病诊断和健康评估在人医上已经得到已经广泛运用,口腔液可以作为麻疹、腮腺炎、肝炎等疾病初步诊断分析的样品[5]。口腔液在动物疾病检测和疫病监测的应用包括病原检测如猪蓝耳病病毒、圆环病毒、伪狂犬病毒等,抗体检测如猪蓝耳病抗体、猪圆环病毒2型抗体、口蹄疫抗体、伪狂犬抗体、非洲猪瘟抗体、猪瘟抗体检测[6-8]等。但是在抗体检测中由于口腔液中抗体的含量显著低于血清中的含量,所以简单地直接使用检测血清样品的ELISA试剂盒检测口腔液中相应的抗体时,往往与血清样品的检测结果符合率较低。我们经过大量的筛选试验,证实了使用口腔液进行猪瘟、猪蓝耳病、猪口蹄疫和猪伪狂犬等抗体检测时,选用的ELISA试剂盒必须匹配是血清稀释倍数在20倍以上的,这样口腔液原液的抗体检测结果与血清抗体检测结果的符合率可以达到96%以上;如果试剂盒的血清稀释倍数要求在40倍以上的,口腔液可以进行2倍稀释后进行检测。
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2016-06-22)