段慧云(牡丹江市第二人民医院,黑龙江 牡丹江 157000)
脑血栓患者治疗前后血小板膜糖蛋白CD62p水平变化的研究
段慧云
(牡丹江市第二人民医院,黑龙江 牡丹江 157000)
【摘要】目的 通过对CD62p的观察研究,判定其对脑血栓疾病的影响。方法 采用流式细胞仪对CD62p水平进行检测。结果 治疗后2、4、8周的血浆CD62p水平逐渐下降,且与治疗前相比差异显著(P<0.05)。结论 脑血栓疾病的发生与发展是受到多种因素综合影响,使得患者脑血管内血液变成固状,血流受到不同程度的阻碍后而形成的一类综合疾病。
【关键词】血小板;CD62p;脑血栓
血小板主要功能为参与血栓形成,主要通过其表面糖蛋白的作用来完成的,通常来说,血小板内的溶酶体膜糖蛋白与α-颗粒膜糖蛋白为静息状态,在各因素作用下,溶酶体膜与Q-颗粒膜和血小板浆膜相互融合,使得血小板表面的CD63与CD62p转变为活化血小板,加强了其聚集、黏附功能[1]。因而,在各种因子作用下使得血小板膜糖蛋白的数量与构型重新发生变化,使得血小板内部发生分泌反应,形成血栓,主要为CD62p、GPⅡb/Ⅲa、CD42b等。本次研究主要对脑血栓的诊疗及预后做出相应分析与判断。
1.1 一般资料:选取我院2013年3月至2014年3月收治的脑血栓患者80例作为本次的额观察对象,设为试验组(男58例,女22例,平均年龄67岁),另取在我院门诊检查为健康人群80例设为常规组(男55例,女25例,平均年龄68岁)。
1.2 方法
1.2.1 所需器材:CD42b抗体(藻红蛋白标记)、CD62p抗体(异硫氰酸荧光素标记);多聚甲醛、磷酸盐缓冲液;需用仪器包括:Falocn上样管、FACSCalibur流式细胞仪、CTAD真空采血管、血细胞分析仪等。
1.2.2 样品的处理:治疗前与治疗后的2、4、8周取1.8 mL的静脉血,置于抗凝剂离心管内(包含枸缘酸钠0.2 mL,3.8%浓度),离心5 min,保持800 r/min的速率,后将富血小板血浆分离出来,并置入等量的多聚甲醛(浓度为2%),并固定15 min,后对悬浮的血小板进行洗涤(15 min,1000 r/min),后用缓冲液将血小板悬浮调节为1×1010/L的浓度。
1.3 荧光染色:将标记的抗体CD62p,20 μL与CD42b,20 μL混合摇匀,置于避光处0.5 h,后进行2次洗涤,并将其转移至流式细胞仪进行检测。
1.4 流式细胞仪的检测与数据分析:前向与侧向角采用对数放大,每个样品收集血小板20000个,并将荧光标记的抗体阳性百分比记录下来,分别计算CD42b与CD62p的阳性表达率。
1.5 统计学处理:本次数据采用SPSS17.0的统计软件,计量资料用均数±标准差(±s)表示,行t检验,当P<0.05时表示差异具有统计学意义。
治疗后的2周血浆CD62p水平为(32.21±8.53)%;4周(24.26± 8.36)%;8周(12.25±6.37)%,与治疗前数据[(50.24±9.81)%]比较差异显著(P<0.05),但是与常规组数据[(3.25±0.55)%]比较均较高(P<0.05)。
大量临床实验证明,脑梗死疾病的发生与发展与多种因素相关,其中起到重要作用的包括活化血小板于脑血栓中的形成、发展等过程,血浆CD62p指的是其特异性标志。
CD62p作为血小板膜糖蛋白中的一种,其分布于静止血小板与巨核细胞内,其中α颗粒(非活化血小板胞质内)包含CD62p,当血小板进行活化时,该颗粒将血小板膜进行融合后释放,CD62p重新在血小板表面排列,且该物质仅仅在活化血小板的表面表达,不随时间变化而消失在血小板表面,CD62p同样也可将血小板活化状态适当反映出来。所以说,血小板活化特异性标志之一是CD62p的表达[2]。
CD62p相对于血小板膜而言,介导血小板与淋巴细胞、中性粒细胞、单核细胞间的黏附,因此CD62p属于活化血小板和白细胞、内皮细胞等互相作用的纽带。临床研究显示,CD62p也可以归属于单核细胞与中性白细胞间的一种受体,该物质在细胞黏附过程中,使得中性白细胞与血小板相互进行黏附、聚集、机化血栓等,除此之外,当内皮细胞或者是血小板进行活化时,CD62p可以释放至血浆内,其中血浆内CD62p的含量可以在一定程度上表现出血小板的活化程度与血栓的形成倾向。近年来相关研究发现[3],CD62p可以作为血小板与血管内皮细胞或者是中性粒细胞间的介导因子,可以使得单核细胞间互相进行黏附并聚集等,可以有效启动并放大血栓形成等效用,对栓塞、相关炎症等方面起着不可忽视的作用。
通过对CD62p的观察研究可以对患者体内的血小板与内皮细胞的激活状态有一定的参考作用,同样对已血栓性、炎症损伤等疾病的诊疗方面意义重大。最初相关研究通过对CD62p的检测,并结合一些自身免疫性的疾病、肾脏疾病、糖尿病等进行观察,研究发现CD62p水平同样会出现不同程度的升高,后来经过更深层次的研究后得出,健康人体的血浆内同样存在可溶性的CD62p,但是其浓度较低。
所以说,脑血栓疾病是受各种因素影响,并使得患者脑血管内血液变成固状,促使血流受到不同程度的阻碍后而形成的一类综合疾病。
参考文献
[1]王朝辉,鞠文博,黄竞妍,等.脑血栓患者治疗前后血小板膜糖蛋白CD62p水平的比较[J].中国老年学杂志,2013,33(5):1152-1153.
[2]许文芳,陈雪芳,尹琪华,等.急性脑梗死患者血小板CD62p和CD63的变化及临床意义[J].检验医学,2010,25(1):78-79.
[3]王朝辉,鞠文博.流式细胞术检测血小板膜糖蛋白与血栓性疾病变化关系研究[J].北华大学学报(自然科学版),2013,14(5): 542-545.
中图分类号:R743
文献标识码:B
文章编号:1671-8194(2016)13-0176-01