山豆根中总黄酮的含量测定

邹玉龙　张　颖　徐　丹　李海燕

牡丹江医学院红旗医院，黑龙江　牡丹江　157011



山豆根中总黄酮的含量测定

邹玉龙张颖徐丹李海燕*

牡丹江医学院红旗医院，黑龙江牡丹江157011

【摘要】目的:测定山豆根中总黄酮的含量。方法: 采用超声波提取法提取山豆根中的总黄酮，并以A1( NO3)3、NaNO2、及NaOH为显色剂，芦丁为对照品，分光光度法测定其含量。结果：山豆根中总黄酮含量为5.7mg/g 。结论：该方法可用于测定山豆根中的总黄酮。

【关键词】山豆根；总黄酮；超声波提取

山豆根为豆科植物越南槐(VietnamesesophoraRoot)的干燥根及根茎。山豆根味极苦，微有豆腥气，具有清热解毒，消肿止痛的功效，常用于咽喉牙龈肿痛、肺热咳嗽烦渴、热解便秘等症。山豆根含有黄酮类、有机酸、植物色素、脂肪、水分及灰分等成分[1]，而黄酮类化合物具有心血管系统维护、抗菌及抗病毒、抗肿瘤、抗氧化、抗炎、镇痛、保肝等多种生物活性[2-4]。实验采用超声波提取法提取山豆根中的总黄酮，以芦丁为对照品，采用紫外可见分光光度法测定其总黄酮的含量。

1仪器与材料

1.1仪器RE-52A旋转蒸发仪(上海亚荣生化仪器厂)；AS3120B超声波清洗仪(北京卓川电子科技有限公司)；722-型分光光度计(上海光谱仪器有限公司)；BSA223S分析天平(上海赛多利斯仪器系统有限公司)。

1. 2材料乙醇、亚硝酸钠、硝酸铝、氢氧化钠均为分析纯；芦丁标准品(中国药品生物制品检定所)；山豆根为市售。

2方法与结果

2. 1样品溶液的制备山豆根干燥后打粉过40目筛，精确称取5.0000g于锥形瓶中，加入80ml 60%乙醇溶液，超声提取60min，过滤，旋转蒸发浓缩，定容至250ml。

2.2标准溶液的配制精确称取芦丁标准品10mg，用60%的乙醇溶液定容至100ml容量瓶中，冷藏放置于冰箱。

2.3测定波长的选择取标准溶液1ml ，置于25ml容量瓶中，加入0. 6ml5% NaNO2，摇匀，放置6 min后加入 1 ml 10 % A1(NO3)3，放置6 min，再加入10ml 4% NaOH溶液，混匀，用60%乙醇稀释至刻度。同时作空白对照，15min后测定波长420～700nm区段的吸光度，得知最大吸收在510 nm，因此选定波长为510 nm 。

2.4标准曲线的建立分别取0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0ml标准溶液于25ml容量瓶中，各加入0.6ml 5% NaNO2，摇匀，放置6min后加入1ml 10% A1(NO3)3，放置6min，再加入10ml 4 % NaOH溶液，混匀，用60%乙醇稀释至刻度，静置15min，以试剂空白为参比于510nm处测其吸光度，以吸光度A纵坐标，芦丁的浓度c为横坐标，得到回归方程:A=11.83c+0.0169(r=0.9994)，表明样品在4～20μg范围内线性关系良好。

2.5精密度考察精密移取标准溶液5份1ml，按“2.4”测定其吸光度，RSD为0.82 %(n=5)，说明精密度良好。

2. 6重现性考察精密移取样品溶液5份1ml，按“2.4”测定其吸光度，RSD为1.19%(n=5)，说明重现性良好。

2.7回收率实验移取已知总黄酮含量的样品溶液1ml，加入标准溶液，按“2.4”测定吸光度，计算加样回收率。结果平均回收率为101.26%，RSD为2.71%(n=5)。

2.8总黄酮含量测定准确吸取样品溶液1ml，共5份，测定样品溶液中总黄酮的浓度为0.114 mg/ml，RSD为 0.15%(n=5)，并通过计算得出山豆根中总黄酮含量为5.7mg/g 。

3讨论

天然产物有效成分含量较低，难于富集，分离难度大，不同的提取方法对不同药物有效成分的提取率存在差异。黄酮的主要提取方法有：溶剂法(水提法、碱性稀醇和碱性水提、有机溶剂提取法)、超声波提取法 、微波提取法、酶解法、超临界流体萃取法、双水相萃取分离法。实验采用超声波法提取总黄酮，利用分光光度计测定了总黄酮的含量，该工艺简单无污染、成本较低，是一条理想的提取黄酮的途径。

参考文献

[1] 王君明，崔瑛.山豆根化学成分、药理作用及毒性研究进展[J].中国实验方剂学杂志，2011，17(4)：229-232.

[2] 严振宇，张秋菊.黄酮类化合物提取分离方法简介[J].微量元素与健康研究，2012，29(3)：55-57.

[3] 沈广志，郭强，何志鹏.分光光度法测定大枣中总黄酮含量[J].微量元素与健康研究，2011，28(4)：26-27.

[4] 李春华. 山豆根的研究进展[J].中国民族民间医药，2012(19)：26.

The determination of Total flavonoids content of Sophora tonkinensis

ZOU YulongZHANG YingXU DanLI Haiyan

Hongqi Hospital of Mudanjiang medical University ，Mudanjiang 157011，China

Abstract:Objective determination of content of total flavonoids in sophorae tonkinensis.Methods Using ultrasonic extraction method to extract total flavonoids in sophorae tonkinensis， Spectrophotometry was used to determine the content of total flavonoids，A1(NO3)3，NaNO2， and NaOH as chromogenic agent and Rutin as constrast sample. Results the determination of flavonoids content in sophorae tonkinensis is 5.7 mg/g. Conclusion this method can be used to determine of total flavonoids in sophorae tonkinensis

Key words:Sophora tonkinensis ;total flavonoids; ultrasonic extraction

作者简介：邹玉龙(1989-)，男，药师，硕士，主要从事药学研究。通信作者：李海燕(1986-)，女，药师，硕士，主要从事药学研究。

【中图分类号】R284.1

【文献标志码】A

【文章编号】1007-8517(2016)09-0013-01

(收稿日期：2016.03.16)