苯环喹溴铵药理毒理的研究进展

刘 红王宝辉王 宇张俊毅王祥艳孙艾楠程颜彬赵李宏

（1 白求恩医科大学制药厂，吉林 长春 130012；2 吉林省成大方圆医药连锁有限公司，吉林 长春 130041）



苯环喹溴铵药理毒理的研究进展

刘 红1王宝辉1王 宇1张俊毅1王祥艳1孙艾楠1程颜彬1赵李宏2

（1 白求恩医科大学制药厂，吉林 长春 130012；2 吉林省成大方圆医药连锁有限公司，吉林 长春 130041）

【摘要】变应性鼻炎和慢性阻塞性肺病是当前两种发病率高、发病人群广泛、病程缠绵且危害显著的呼吸系统疾病。作为有针对性的新一代治疗药物，苯环喹溴铵是我国自主研发的具有自主知识产权的国家一类新药，具有广阔的应用前景。

【关键词】苯环喹溴铵；药理；毒理；研究进展

变应性鼻炎（allergic rhinitis，AR）又称为过敏性鼻炎，是特应性个体接触致敏源后导致的，包含IgE介导的炎性介质释放和多种免疫活性细胞因子、细胞因子参与的鼻黏膜慢性反应性疾病。主要临床症状包括流涕、鼻塞、鼻痒和打喷嚏，是全球最常见的慢性疾病之一，既影响患者的生活质量，又增加整个社会的经济负担［1］。慢性阻塞性肺病（chronic obstructive pulmonary disease，COPD）是一以气流受限为特征的疾病，常呈现进行性发展，与肺部对有害气体或有毒颗粒的异常炎性反应有关。根据WHO发布的研究成果表明，到2020年COPD将成为世界慢性疾病致病和死亡原因的第三位［2］。

作为针对上述疾病的、新一代的治疗药物，苯环喹溴铵（bencycloquidium bromide，BCQB）的化学名为3-｛（2-环戊基-2-羟基-2-苯基）乙氧基｝-1-甲基-溴化-1-氮杂双环｛2，2，2｝辛烷［2］。它是北京嘉事联博医药科技有限公司研发的具有自主知识产权的创新型化合物，其临床上可用于慢性阻塞性肺病［3］和变应性鼻炎［1］，属于国家1.1类新药［4］。本文通过查阅相关文献，就新药BCQB药理学和毒理学部分的最新研究情况，进行综述。

1 药理作用

1.1抗超敏性、变应性鼻炎：李娟等以10%的2，4二异氰酸甲苯酯（TDI）橄榄油溶液进行豚鼠双侧鼻腔给药，建立豚鼠超敏性鼻炎的模型组；以橄榄油溶液代替10%的TDI橄榄油溶液进行豚鼠双侧鼻腔给药作为溶媒对照组；再将治疗组分为BCQB大、中、小3个剂量组和硫酸阿托品组，共计6个组。2周后的结果显示，经鼻给予BCQB的治疗组能明显缓解超敏性鼻炎豚鼠鼻痒、喷嚏和清涕等症状，降低豚鼠鼻黏膜中的组胺浓度，减少鼻黏膜中的嗜酸粒细胞，对豚鼠超敏性鼻炎有明显的治疗作用［5］。在另一组实验中，李娟等实验人员以卵清白蛋白（Ova）和Al（OH）3建立大鼠变应性鼻炎模型作为模型组；再将BCQB分为大、中、小3个剂量组，倍氯米松组以及溶媒对照组共计6个组，以大鼠的症状、鼻黏膜组织形态、单侧鼻分泌物重量、血清和鼻分泌物中Ova特异性IgE为考察指标进行分析比较。2周后的结果显示，与模型组相比，给予BCQB的各剂量组大鼠鼻炎症状明显改善，大中剂量组大鼠鼻黏膜的组织形态改变明显减轻，大剂量组大鼠血清和鼻黏膜中的Ova特异性IgE水平及鼻分泌物量均明显降低，治疗作用明显［6］。

1.2抗炎止痒：李娟等［7］使用二甲苯诱导小鼠建立耳肿胀模型，使用冰醋酸诱发小鼠建立毛细血管通透性亢进模型，使用磷酸组胺诱导豚鼠建立致痒模型，经鼻给予大、中、小3个剂量的BCQB，以溶媒、阿托品、氯雷他定和强的松龙为对照。结果显示，BCQB能较好地抑制二甲苯所诱发的小鼠耳壳炎性肿胀程度，明显降低冰醋酸诱发的小鼠毛细血管通透性亢进，缓解磷酸组胺的致痒作用，而且表现出一定的量效关系。

1.3对中枢神经系统、心血管系统和呼吸系统的作用：李娟等［8］将BCQB分成大、中、小3个剂量组，经鼻黏膜给药，考察小鼠的精神神经活动、激怒反应、自主活动、支气管分泌和小肠蠕动情况，同时考察记录Beagle犬血压、心电图、心率、心律以及呼吸频率和幅度。结果显示，BCQB对小鼠的中枢神经系统有一定的抑制作用（后可缓解），能减少支气管的腺体分泌，降低小肠的蠕动；而对麻醉的Beagle犬的血压、心电图、心率、心律以及呼吸频率和幅度均无明显的影响。

1.4选择性拮抗乙酰胆碱受体（M受体）亚型中M1、M3受体：李娟等［9］将表达单一的M受体亚型的中国仓鼠卵巢细胞株（CHO）：CHOM1（表达M1受体）、CHOM2（表达M2受体）、CHOM3（表达M3受体），与［3H］-二苯羟乙酸奎宁酯（［3H］-QNB）进行饱和实验，以及竞争性抑制药和［3H］-QNB与M受体亚型的竞争结合实验，计算3株细胞分别与［3H］-QNB的解离平衡常数（Kd值）和抑制常数（Ki值）。再通过离体膀胱肌条实验，评价BCQB干预乙酰胆碱对膀胱肌条作用，计算竞争性拮抗作用强度值（pA2值）。结果显示，BCQB对3种细胞的抑制强度为CHOM3＞CHOM1＞CHOM2，对CHOM3和CHOM1的抑制能力相似，均明显高于对CHOM2的抑制能力，即可选择性拮抗M1和M3受体亚型；此外，BCQB还有拮抗乙酰胆碱对离体膀胱肌条的收缩作用。

1.5对小鼠学习记忆能力的影响：李娟等［10］选取雄性昆明小鼠，随机分为溶媒组，BCQB高、中、低3个剂量组（5.86、2.93、1.47 mg/kg）及戊乙奎醚组（2.25 mg/kg），按5 μL/10 g剂量给药，经鼻，每天1次，持续1个月，采用Morris水迷宫和跳台实验作为评价方法。结果显示，BCQB长期经鼻给药，对小鼠的学习和记忆能力没有影响，原因可能与BCQB不能透过血脑屏障相关。

1.6对大鼠肝微粒体细胞色素P450（CYP450）酶的抑制作用：孙鲁宁等［11］采用探针底物法考察了BCQB对大鼠肝微粒体CYP450酶的抑制作用。具体方法为，将CYP450酶6种亚型的7种特异性探针底物非那西丁（CYP1A2）、S-美芬妥英（CYP2C11）、右美沙芬（CYP2D1/2）、甲苯磺丁脲（CYP2C6）、氯唑沙宗（CYP2E1）、咪达唑仑（CYP3A1/2）和睾酮（CYP3A1/2）分别与大鼠肝微粒体及系列浓度的BCQB溶液进行温孵反应，合并处理后的微粒体溶液，采用LC-MS/MS法同时测定底物代谢产物的含量，计算IC50值，并用探针底物法进行验证。结果显示，BCQB对CYP2D1/2可能有抑制作用，对其他亚型无抑制作用。

1.7对大鼠肝脏CYP450酶的诱导作用：孙鲁宁等［4］将BCQB分为低、中、高3个剂量组（范围1、3、9 mg/kg），对比空白组，对大鼠连续给药后，处死取肝制备微粒体。以大鼠肝脏脏器系数、肝微粒体CYP450蛋白含量和肝微粒体CYP1A1/2、CYP3A1/2酶活性为考察指标，采用HPLC-MS/MS法和底物法进行检测。结果显示，BCQB3个剂量组与空白组在肝脏脏器系数、CYP450蛋白含量和CYP1A1/2酶活性上午明显差异，而且对CYP3A1/2酶的活性也未高于空白组，即对大鼠肝脏CYP450酶均无诱导作用。

2 毒理作用

2.1生殖毒性：李练兵等［12］将BCQB分成低中高3个剂量组（范围27、162、972 μg/kg，相当于人临床拟用剂量的6.36和216倍）和1个溶剂对照组，以大鼠一般状况、体质量变化、交配率、受孕率、生育率、出生存活率、着床率、吸收胎率、出生体质量、离乳体质量和生殖系统组织学检查为指标进行考察。结果显示，BCQB在27～162 μg/kg范围内对大鼠无明显生殖毒性作用；但是给予972 μg/kg剂量条件下，对大鼠精子显示出了一定的生殖毒性作用。

2.2急毒作用：李正等［13］采用将BCQB经鼻给药已经禁食12 h的大鼠，给药容量标准为0.1 μg/g，剂量范围为163.84～500.00 mg/kg，组间剂量比为1∶0.8。给药持续14 d，期间观察结果显示，给药后1～30 min，大剂量组大鼠开始出现全身肌肉痉挛、呼吸加快急促、全身无力、运动困难、四肢抽搐以及死亡，而且约80%的大鼠死亡时间在30 min以内，其余存活大鼠在给药8 h后恢复正常，2周内再无死亡现象出现；对死亡大鼠解剖显示，裸眼下心、肝、脾、肺、肾和脑等器官无明显异常。

2.3慢毒作用：李正等［13］采用Bliss法求出急毒试验中大鼠的半数致死量（LD50），并以LD50的1/100、1/200和1/400作为BCQB的大（3.00 mg/kg）、中（1.50 mg/kg）和小（0.75 mg/kg）剂量，另设溶剂对照组，考察BCQB对大鼠的慢性毒性。结果显示，大鼠鼻黏膜给药的LD50为300.38 mg/kg，95%可信限为263.58～342.31 mg/kg。各剂量组连续给药6个月，期间大鼠的一般特征、精神状态、毛发、体质量、脏器系数、肾功能、肝功能、血液生化、血液学、大体解剖和组织病理学检查均未出现明显的毒性作用，仅仅在大、中剂量组有一定的毒性反应，小剂量则无明显改变。因为小剂量已经是临床给药剂量的167倍，所以，BCQB喷鼻剂仍然是安全的。

2.4对血糖、肌酸酐、血尿素氮和肾功能的影响：Li 等［14］选取66只beagle犬（雌雄各半），以考察BCQB的亚慢性毒性及体内毒物代谢。采取经鼻给药途径，给药剂量分为低（2.5 mg/kg）、中（5.0 mg/kg）、高（10.0 mg/kg）3种，持续时间为91 d。结果显示，BCQB的3个给药剂量均能降低雄性、雌性Beagle犬的血糖水平，其中，中、高剂量组在经历91 d的重复给药后，血糖水平降低更为显著。与此相反，BCQB的中、高给药剂量组有升高雌性Beagle犬肌酸酐的趋势，同时，高剂量给药组有升高雄性、雌性Beagle犬血尿素氮的趋势。此外，相对于单剂量给药方式，经历91 d的重复性给药后，BCQB在肾脏中的浓度最高。

2.5皮肤致敏作用：李娟选取健康豚鼠来考察BCQB对局部给药皮肤的致敏作用。将豚鼠于试验前24 h时，剪去背部两侧毛（范围3 cm×3 cm），分成阳性对照组、BCQB空白溶媒对照组和BCQB组，分别涂2% 2，4-二硝基氯苯0.5毫升/只、空白溶媒0.5毫升/只和48 mg/mLBCQB0.5毫升/只，再用油纸和纱布分别覆盖，胶布固定6 h后，去除受试物，同样操作分别于第7天、14天时重复。结果与阳性对照组相比，BCQB组受试豚鼠皮肤并未出现红斑、红肿等过敏性反应［1］。

2.6鼻黏膜刺激作用：李娟选取健康家兔来考察BCQB对鼻黏膜局部给药皮肤的刺激作用。将家兔分成生理盐水组、溶媒对照组和BCQB组，连续给药1周，每天分2次给药，确保药物与黏膜接触时间至少达到4 h。结果与生理盐水组相比，BCQB组受试家兔鼻黏膜仅有轻度干燥，无其他明显病理改变，无刺激性作用［1］。

2.7对家兔瞳孔的影响：李娟选取健康的、对光反射呈阳性的家兔来考察BCQB给药后，对瞳孔大小的影响。将已经禁食12 h的家兔分成1%阿托品对照组、溶媒对照组和BCQB大、中、小3个剂量组，给药后分别于15 min、1 h和2 h光照家兔双侧瞳孔，用游标卡尺测量瞳孔大小。结果显示，BCQB经鼻给药对家兔瞳孔大小有明显的影响，但是持续时间较短，中小剂量组2 h后可恢复，对家兔瞳孔的对光反射无影响［1］。

3 小 结

综合上述药理、毒理学研究资料，可以看出苯环喹溴铵对M1、M3受体的拮抗作用具有高度的选择性，能有效降低M1、M3受体密度［1］，发挥抗敏作用，能有效治疗变应性鼻炎和慢性阻塞性肺病，而且不良反应和不良反应少，安全性高。目前，苯环喹溴铵的鼻用喷雾剂正处于Ⅲ期临床研究阶段［11］，未来一定会成为临床的一线用药。

参考文献

［1］ 李娟.苯环喹溴铵的药效学研究与安全性评价［D］.重庆:重庆医科大学，2008.

［2］ 董新威.M3受体阻断药苯环喹溴铵对小鼠气道炎症和重塑的作用［D］.杭州:浙江大学，2011.

［3］ 邓万定，金方，张启明.高效液相色谱法测定苯环喹溴铵在Calu-3细胞中的摄取［J］.中国药学杂志，2013，48（14）:1187-1190.

［4］ 孙鲁宁，丁黎，严拯宇，等.苯环喹溴铵对大鼠肝脏CYP450酶诱导作用的研究［J］.中国药学杂志，2013，48（17）:1262-1267.

［5］ 李娟，周远大.苯环喹溴铵对豚鼠鼻超敏反应的影响［J］.中国医院药学杂志，2007，27（11）:1545-1548.

［6］ 李娟，周远大，陈小平.苯环喹溴铵对大鼠变应性鼻炎的治疗作用［J］.中国新药与临床杂志，2008，27（3）:191-194.

［7］ 李娟，周远大，陈小平.苯环喹溴铵抗炎止痒作用的初步观察［J］.中国新药杂志，2007，16（15）:1182-1184.

［8］ 李娟，周远大.苯环喹溴铵的一般药理学研究［J］.重庆医科大学学报，2007，32（5）:506-510.

［9］ 李娟，何海霞，周远大，等.苯环喹溴铵的毒蕈碱样乙酰胆碱受体亚

中图分类号：R9

文献标识码：A

文章编号：1671-8194（2016）04-0043-02

Research Progress of Pharmacological Effects and T oxicological Information of Bencycloquidium Bromide

LIU Hong1， WANG Bao-hui1， WANG Yu1， ZHANG Jun-yi1， WANG Xiang-yan1， SUN Ai-nan1， CHENG Yan-bin1， ZHAO Li-hong2
（1 Pharmaceutical Factory Norman Bethune University of Medical Science， Changchun 130012， China； 2 Jilin Province Chengda Fangyuan Pharmaceutical Co，Ltd.， Changchun 130041， China）

［Abstract］At present， allergic rhinitis and chronic obstructive pulmonary disease are the two kinds of respiratory diseases， with the features of high incidence， widespread population incidence， long course and remarkable harm. As a new generation of targeted therapeutic drug， bencycloquidium bromide is an independent intellectual property rights and national class of drug that would get broad application prospect.

［Key words］Bencycloquidium bromide； Pharmacological effects； Toxicological information； Research progress