张万林 (陕西省略阳县乐素河镇畜牧兽医站724300)
赵云平 (陕西省略阳县白雀寺镇畜牧兽医站724300)
浅谈鸡血清采集存在问题及对策
张万林 (陕西省略阳县乐素河镇畜牧兽医站724300)
赵云平 (陕西省略阳县白雀寺镇畜牧兽医站724300)
通过近年来在禽类病原学监测及免疫抗体检测时采集鸡血清出现的血清胶冻状现象,分析存在的原因,通过工作实践提出解决办法,供畜牧兽医人员参考。
鸡血清;胶冻状;采血方法;对策
随着畜牧兽医工作的不断发展,动物疫病监测和免疫抗体检测在动物疫病防控工作中起到了重要作用。乐素河镇畜牧兽医站在2010年~2016春季动物防疫结束时多次采集鸡血清,不断摸索,总结出了一种较经济、实用、科学的鸡翅静脉采血方法,为保证各镇以后鸡血清送检质量和抗体检测的准确性,现就鸡血清采集存在问题、采集方法、保存方法及送检过程介绍如下。
按照上级要求,乡镇兽医站防疫工作结束时,要在本镇防疫区域分别采集猪、牛、羊、鸡、犬血清各10头(只)份报送县市省畜牧兽医行政管理部门进行免疫抗体检测。别的动物血清都容易分离,鸡血清每年都出现胶冻状,特别在今年连续3次采血分离失败给我们的工作带来了很大困难,也为免疫抗体检测工作造成障碍。
一般我们采血时间都是下午和晚上,鸡刚进舍休息,农村都是散养鸡,早上给饲喂大量的粮食后就让鸡自行放养,成天都在觅食。因此,下午进舍时正是饱食。但因我们的工作需要,白天去无法抓到鸡,只能等到晚上。
农户零星散养鸡,设备条件都差,基本上没有饮水设施,鸡的饮水靠自己寻觅,多数靠青绿草料中的水分供给,特别是春天,地草正在萌芽阶段,气候又干燥,鸡一天食入大量精料,觅水远远满足不了生理需要,造成体内严重缺水,血液浓稠会影响血清的分离,发生血弥。
采血时血液垂直推入试管是一种错误的方法,很容易造成溶血;采血消毒不严可能造成细菌感染也会影响血清分离,使用抗凝剂也有可能是出现血清胶冻状的主要原因。
分离血清时在离心机上分离受温度影响不太大,但自然分离时,温度的高低很重要,关系到血清分离的成败,温度过低很可能使血液中的纤维蛋白和胶原蛋白凝固,造成血清胶冻状。温度过高时造成血液水分挥发,血清可能因缺水而形成胶冻状。
经调查和亲自实践操作若干年发现,长期饲喂精饲料,购买配合料及颗粒饲料饲养的鸡肥胖,血液都比较浓稠,血清不好分离,甚至分离出来的血清多数是胶冻状。散养在农村的鸡,长期自己觅食青草料和树林里昆虫,血清较好分离。另外和鸡的品种也有关,本地鸡水土气温适应性强,出现的可能性极小。
为了确实解决基层站采集禽类血清普遍存在的问题,使免疫抗体检测和病原学监测数据的准确性、实用性、科学性。
一次性真空采血管或清洗干净并消毒过青霉素小瓶,一次性采血针头或5ml一次性注射器,止血钳,酒精,棉球,试管,试管架,离心机,记号笔,冰箱,采样登记表。
采血鸡不宜过小,以免血管小,血量少,要选择3月龄以上,重量在1kg以上。必须是鸡新城疫、禽流感免疫后21d以后的健康鸡。
由饲养员或采血人员用一只手固定住双脚,另一只手将鸡的双翅膀捏住固定,使鸡翅内侧展露出来,将鸡面对术者卧在地上。
术者正对保定好鸡,用左手拇指压住鸡翅内侧的静脉血管,使血管肿胀,充分暴露,然后用酒精棉球进行消毒,消毒液干后,用采血针头从离血管约0.2cm的肌肉处平行进针,进针部位不要紧靠血管,以免止血困难,引起大失血,顺血管插入0.5cm,刺入血管再进针0.5cm,轻轻拉动注射器活塞,有血液进入注射器,说明注射器进针正确,然后开始抽取血液。用真空管采集血液,只需将另一头插入真空管内,血液便自动流出,每个真空管采集3ml血液,每只鸡采血量不宜过多,一般不超过10ml,以免影响鸡的生长发育。采血时间应在中午12点至下午5点,因此时气温较高,鸡的血管充盈,暴露易找,采血针头宜小不宜大,一般用7~9号针头,以防针头过大止血困难,接试管必须斜45°,让血液缓缓沿试管壁流入试管,达到所需的血量后,用左手拿消毒棉球,压住抽血部位的血管,右手迅速拔出针头,待抽血部位血管完全止血后便可将鸡放开。
刚采集的血液在自然环境温度下倾斜放在试管架上,静置30~60min,此时千万不能震动血液,如果没有试管架放置血液,倾斜40~60°放置,静置1h左右,再移到室内12~20h,取出分离血清。
将已分离的血清用吸管或一次性注射器轻轻吸出,将血清注入干净的小瓶子里,特别注意:千万不要吸入血液,以免影响血清质量和检测效果,每只离心管或小瓶子装血清0.5~1ml。如静置20h后,还没分离出血清的就将装有血液的试管放入离心机内,设置离心机以4000转/min分离血清,离心机启动要由慢到快,结束时要慢慢减速,每次离5~10min,直至达到所需血清的质量和数量,如真空管数量不能放满离心机孔,需配一样大小空管放满孔,偶数对称放置,以免声响过大,激烈震动导致离心机损坏。
每采足一份血液或分离一份血清,要在真空管或离心管上编号,并做详细登记,同一份血液,分离血清的离心管上的编号要与采集血液的真空管上的编号一致。编号的笔需用记号笔。
分离好的血清编号后,若来不及时送检需及时放入冰箱内进行冷冻保存至送检;血清送检时,送检血清应低温运输,血清运输包装内时应放置有冰袋,以免血清变质、腐臭,影响检测效果。
以上鸡血清采集方法浅见,希望工作在乡镇的广大畜牧兽医同事们共同参考研究,提出宝贵意见,以免在今后鸡血清采集过程中再次出现血清胶冻状现象,使我们的免疫抗体检测、病原学监测数据更加准确,才能更好的为动物防疫提供科学依据,消灭或杜绝高致病性禽流感病的发生和流行。保障广大人民群众身体健康,促进农村经济持续、快速、健康、稳定发展。
张万林 (1966-),男,汉族,助理畜牧师,长期从事畜牧兽医技术推广工作。