蒙药材悬钩子木黄酮类成分的研究

朝木日丽格阿拉坦敖日格乐吉日木巴图张　屏包保全*.内蒙古医科大学蒙医药研究院，内蒙古　呼和浩特　000; .内蒙古医科大学药学院，内蒙古　呼和浩特　000

蒙药材悬钩子木黄酮类成分的研究

朝木日丽格1阿拉坦敖日格乐1吉日木巴图1张屏2包保全2*
1.内蒙古医科大学蒙医药研究院，内蒙古呼和浩特010110; 2.内蒙古医科大学药学院，内蒙古呼和浩特010110

【摘要】目的:研究库叶悬钩子正丁醇层的化学成分.方法:采用反相HPLC分离纯化，通过核磁共振分析鉴定其化学结构.结果:从库页悬钩子正丁醇层分离得到槲皮素－3－O－β－D－吡喃葡萄糖醛酸甲酯( I)、山柰酚－3－O－β－D－吡喃葡萄糖醛酸甲酯( II)、槲皮素( III)、槲皮素－3－O－β－D－吡喃葡萄糖醛酸丁酯( IV) 4个化合物.结论:以上化合物均首次从该种植物中分离得到.

【关键词】蒙药材;悬钩子木;正丁醇层;黄酮

蒙药材悬钩子木为蔷薇科悬钩子属植物库叶悬钩子( Rubus sachalinensis Leveille)的去皮去心干燥茎枝，具有促熟疫、清除骚热、止咳、调元之功效[1]，是蒙医基础方四味土木香散组方药材之一，但其化学成分和生物活性未见报导.为探索该植物的有效活性成分，对库叶悬钩子的乙醇提取物正丁醇萃取部位进行化学成分分离研究，薄层结果显示正丁醇部位含有黄酮类化合物，通过进一步的色谱分离，鉴定4个化合物，分别为:槲皮素－3－O－β－D－吡喃葡萄糖醛酸甲酯( I)、山柰酚－3－O－β－D－吡喃葡萄糖醛酸甲酯( II)、槲皮素( III)、槲皮素－3－O－β－D－吡喃葡萄糖醛酸丁酯( IV).

1　仪器与材料

1. 1植物来源蒙药材悬钩子木采自内蒙古通辽市扎旗罕山自然保护区，由内蒙古医科大学药学院包保全教授鉴定为蔷薇科悬钩子属库页悬钩子( R. Sachalinensis Leveille)，除去外皮，切段，晒干.

1. 2仪器半制备HPLC: Shim－pack PRC－ODS、制备柱250mm ( 20mm，15μm )、YMC－pack ODS A 250mm ( 10mm，5μm)、SHIMADZU RID－10A检测器、LC－6AD泵、CTO－20A柱温箱、C－R8A积分仪;高效液相色谱仪: Inertsil ODS－SP柱250mm ( 4. 6mm，5μm)、SHMADZU RID－20A检测器、SIL－20A自动进样器、LC－20AT泵、CTO－10AS柱温箱、CBM－20A控制器) ;核磁共振仪( BRUKER公司AVANCE－600) ; EYELAN－1100旋转蒸发仪(上海爱郎仪器有限公司) ;电子天平(赛多利斯科学仪器有限公司) ; HP－20大孔树脂; Sephadex LH－20羟丙基葡聚糖凝胶.

2　提取分离

取库叶悬钩子干燥茎枝5. 05kg粉碎，用95%乙醇回流提取1次，75%乙醇回流提取3次，每次2h;减压回收乙醇溶剂，得浸膏924g，以上浸膏加水悬浮，依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇等溶剂等比萃取，回收溶剂，得正丁醇提取物224g;取正丁醇提取物经过HP－20柱，依次用水、40%乙醇、55%乙醇、70%乙醇、85%乙醇、95%乙醇洗脱，得到6个洗脱部分;回收洗脱乙醇溶剂，得浸膏分别为90. 6g、121. 7g、48. 2g、4. 3g、3. 2g、3. 6g; 40%乙醇浸膏、55%乙醇浸膏分别取2g，加甲醇溶解，经LH－20柱甲醇洗脱，每5ml为一个流分，点薄层硅胶板，显色，合并相同斑点，回收甲醇，经反相HPLC分离，从40%乙醇流分中分离得到化合物I ( 23mg)、II ( 10. 7mg)、III ( 3mg) ;从55%乙醇流分中分离得到化合物IV ( 10. 93mg).

3　化合物结构解析

Compound 1黄色无定型粉末.1H－NMR给出黄酮母核上的氢信号信号，δ: 6. 18 ( 1H，s)、6. 36 ( 1H，s)、7. 57 ( 2H，d，8. 4)、6. 82 ( 1H，dd，8. 4)，判断是黄酮类化合物，δ: 5. 21 ( 1H，d，7. 8)、3. 47 ( 1H，t，9. 0)、3. 51 ( 1H，t，9. 0)、3. 56 ( 1H，t，9. 0)、3. 76 ( 1H，dd，9. 6)为糖上氢信号，δ5. 21 ( 1H，d，7. 8)表明β糖端基氢信号连在黄酮母核三位上，δ3. 63 ( 3H，s)给出氧甲基氢信号;13C－NMR给出2个羰基碳信号δ: 179. 2和170. 7，糖端基碳信号δ: 104. 8和糖链上的其他碳信号75. 3、77. 0、72. 7、77. 3、170. 7，δ: 52. 8为氧甲基碳信号，故鉴定为槲皮素－3－O－β－D－吡喃葡萄糖醛酸甲酯( quercetin－3－O－β－D－glucuronide methylester).分子式为C22H20O13.其波谱数据与文献[2]中槲皮素－3－O－β－D－吡喃葡萄糖醛酸甲酯，基本一致.

quercetin－3－O－β－D－glucuronide methylester

Compound 2黄色无定型粉末，盐酸－镁粉反应呈阳性.1H－NMR给出黄酮母核上的氢信号δ: 7. 92 ( 2H，d，8. 4)、6. 76 ( 2H，d，8. 4)、6. 10 ( 1H，s)、6. 29 ( 1H，s)，糖端基氢信号δ: 5. 13 ( 1H，d，7. 2).13C－NMR给出2个羰基碳信号δ: 179. 2、179. 2，黄酮母核上的碳信号δ: 159. 4、135. 3、163. 0、100. 2、158. 6、95. 0、161. 6、105. 4、122. 5、132. 3、116. 0、161. 6糖端基碳信号δ: 104. 8和糖上的其它碳信号δ: 75. 3、77. 0、72. 7、77. 3、170. 5，故鉴定为山柰酚－3－O－β－D－吡喃葡萄糖醛酸甲酯( kaempferol－3－O－β－D－glucuronide methylester).该化合物结构式为C22H20O12，其波谱数据与文献[3]中与山柰酚－3－O－β－D－吡喃葡萄糖醛酸甲酯基本一致.

kaempferol－3－O－β－D－glucuronide methylester

Compound 3黄色结晶，盐酸镁粉反应呈阳性，1HNMR给出黄酮类化合物槲皮素母核上的氢信号δ: 6. 08 ( 1H，d，1. 8)、6. 29 ( 1H，d，1. 8)、7. 64 ( 1H，d，8. 4)、6. 78 ( 1H，d，8. 4)、7. 53 ( 1H，d，8. 4).13C－NMR给出槲皮素的碳信号δ: 146. 2、137. 2、177. 3、162. 7、99. 2、165. 7、94. 4、158. 2、104. 4、124. 1、115. 9、147. 9、146. 2、117. 6、121. 6、故鉴定为槲皮素( quercetin)，该化合物化学结构式为C15H10O7，以上数据与文献[3]基本一致.

quercetin

Position　　δH　　δC　Position　　δH　　δC6　 6.08 ( 1H，d，1.8)99.2　 4'　146.2 7 165.7　 5'　 6.78 ( 1H，d，8.4) 117.6 8　 6.29 ( 1H，d，1.8) 94.4　 6'　 7.53 ( 1H，d，8.4) 121.6 9 158.2.

Compound 4棕黄色粉末.1H－NMR给出黄酮母核上的氢信号δ: 6. 10 ( 1H，d，1. 8)、6. 28 ( 1H，d，1. 8)、7. 51 ( 2H，d，8. 4)、6. 83 ( 1H，d，8. 4)，糖端基氢信号δ: 5. 17 ( 1H，d，9. 0)和糖上的其它氢信号δ: 3. 53 ( 1H，dd，6. 0，12. 0)、3. 46 ( 1H，dd，1. 8，12. 0)、3. 58 ( 1H，dd，6. 0，12. 0)、3. 64 ( 1H，d，9. 0)，亚甲基氢信号δ: 4. 05 ( 2H，dd，1. 8，12. 0)、1. 48 ( 2H，d，8. 4)、1. 23 ( 2H，dd，8. 4)，甲基氢信号δ: 0. 73 ( 3H，d，8. 4)，故鉴定为槲皮素－3－O－β－D－吡喃葡萄糖醛酸丁酯( quercetin－3－O－β－D－glucuronide butylester).该化合物化学结构式为C25H26O13，其波谱数据与文献[4]中槲皮素－3 －O－β－D－吡喃葡萄糖醛酸丁酯，基本一致.

quercetin－3－O－β－D－glucuronide butyleste

4　结果与讨论

从库页悬钩子正丁醇层分离得到4个黄酮类化合物，经结构鉴定分别为槲皮素－3－O－β－D－吡喃葡萄糖醛酸甲酯( I)、山柰酚－3－O－β－D－吡喃葡萄糖醛酸甲酯( II)、槲皮素( III)、槲皮素－3－O－β－D－吡喃葡萄糖醛酸丁酯( IV)，以上化合物均首次从本种植物库页悬钩子中分离得到.库页悬钩子临床应用历史悠久，资源丰富，是一个极具开发潜力的蒙药材.以上研究为蒙药材悬钩子木生物活性、质量标准研究提供了科学依据.

参考文献

[1]蒙古学百科全书编辑委员会《医学卷》编辑委员会编．蒙古学百科全书·医学卷[M]．呼和浩特:内蒙古人民出版社，2002，4: 305－306．

[2]高丽梅，吴立军，黄健．板栗花的化学成分[J]．沈阳药科大学学报，2010，27 ( 7) : 544－562．

[3]郭启雷，杨俊山，刘建勋．掌叶覆盆子的化学成分研究[J]．中国药学杂志，2007，42 ( 15) : 1141．

[4]赵超，陈华国，龚小见．杠板归的化学成分研究[J]．中草药，2010，41 ( 3) : 365－367．

收稿日期:( 2014. 11. 19)

通信作者:包保全( 1969－)，博士，教授，主要从事蒙药活性物质基础及资源研究.E－mail baobaoquan@ aliyun. com

作者简介:朝木日丽格( 1987－)，硕士，助理馆员，从事蒙医药文献研究.E－mail cmrlg2006@163. com

基金项目:内蒙古自治区自然科学基金项目(项目编号2011ZD13).

【文章编号】1007－8517 ( 2015) 04－0019－02

【文献标志码】A

【中图分类号】R284. 1