鼻咽癌组织中多聚免疫球蛋白受体的表达及意义

黎骋，郑裕明 ，郭俊宇，马丽萍，陆爱英，汤敏中，吴惠惠，蔡永林

(1梧州市红十字会医院，广西梧州543002；2 梧州市卫生系统鼻咽癌病因学及分子机理重点实验室)



鼻咽癌组织中多聚免疫球蛋白受体的表达及意义

黎骋1，郑裕明2，郭俊宇1，马丽萍1，陆爱英2，汤敏中2，吴惠惠3，蔡永林2

(1梧州市红十字会医院，广西梧州543002；2 梧州市卫生系统鼻咽癌病因学及分子机理重点实验室)

摘要：目的观察多聚免疫球蛋白受体(pIgR)在鼻咽癌组织中的表达变化，并探讨其意义。方法采用免疫组化法检测279例鼻咽癌患者(鼻咽癌组)和30例慢性鼻炎患者(对照组)组织中的pIgR，并分析其与临床病理特征的关系。结果观察组和对照组的pIgR阳性表达率分别为15.8%(44/279)、90.0%(27/30)，P<0.05。pIgR表达与鼻咽癌患者年龄、性别、吸烟史、肿瘤病理类型和临床分期无关(P均>0.05)，与血清EB病毒壳抗原免疫球蛋白A(VCA/IgA)、EB病毒早期抗原免疫球蛋白A有关(P均<0.05)。鼻咽癌组5年总生存率为64.6%，pIgR表达阳性者5年总生存率明显低于pIgR表达阴性者(χ2=4.714，P=0.030)。多因素分析显示，仅T分期和N分期与总生存期相关。结论 pIgR在鼻咽癌组织中呈低表达，可能参与鼻咽癌的发生、发展，可作为鼻咽癌患者生存期的预测指标。

关键词：鼻咽癌；多聚免疫球蛋白受体；EB病毒；慢性鼻炎

鼻咽癌是鼻咽部上皮性恶性肿瘤，转移率较高，EB病毒(EBV)感染、遗传因素和环境暴露是其主要病因[1]。EBV进入鼻咽上皮的具体机制至今尚未明确，但研究发现多聚免疫球蛋白受体(pIgR)在其中起重要作用[2～5]。pIgR是免疫球蛋白超家族的一员，在机体免疫过程中发挥重要作用。近年来，pIgR在判断肿瘤临床分型和患者预后方面的作用成为研究热点[6, 7]，但在鼻咽癌中少见报道。2013年3月～2014年3月，我们检测了279例鼻咽癌患者肿瘤组织中pIgR的表达水平，并探讨其在鼻咽癌发生、发展中的作用。现报告如下。

1资料与方法

1.1临床资料选取2001年1月～2005年5月我院保留的临床资料完整的无远处转移鼻咽癌患者的组织石蜡标本279例份(鼻咽癌组)，患者中男199例，女80例；年龄21～73岁，平均47岁；均经活检病理证实为鼻咽癌，取活检前均未接受放化疗等肿瘤专科治疗；其中角化性鳞状细胞癌(KSCC) 30例、非角化性癌(NC) 245例、未分化癌(UC) 4例；T1期30例、T2期146例，T3期46例，T4期57例；N0期77例，N1期104例，N2期77例，N3期21例；临床总分期为Ⅰ期10例、Ⅱ期101例、Ⅲ期97例，Ⅳa期71例；血清EBV壳抗原免疫球蛋白A(VCA-IgA)滴度≥1∶80者108例、EBV早期抗原免疫球蛋白A (EA-IgA)滴度≥1∶40者67例。另取30例份慢性鼻炎患者组织石蜡标本为对照组，其中男21例，女9例；年龄21～73岁，平均46岁。本研究经梧州市红十字会医院伦理委员会批准同意。两组年龄、性别具有可比性。

1.2鼻咽癌组织中pIgR表达检测采用免疫组化法。切片用二甲苯进行常规脱蜡，梯度乙醇和蒸馏水水化。0.5%H2O2封闭内源性过氧化酶10 min，自来水冲洗接着用蒸馏水冲洗，0.01 mol/L、pH 6.0柠檬酸缓冲液进行高温修复抗原2 min，冷水降温后自然冷却，PBS冲洗。滴加阻断过氧化物酶RE7102抑制内源性过氧化物酶5 min，PBS冲洗3次，一抗工作液室温孵育60 min，PBS洗3次；滴加二抗，室温孵育30 min，PBS洗3次，二氨基联苯胺显色5 min，自来水洗，蒸馏水洗，苏木精复染2 min，自来水洗。脱水，透明，封片。以PBS代替一抗作空白对照。pIgR阳性表达主要定位于细胞质。在高倍镜下(×400)随机选取5个阳性细胞数多的视野，计数阳性细胞及总细胞数。阳性细胞百分比≤5%为阴性，6%～25%为弱阳性，26%～50%为中度阳性，≥51%为强阳性。弱阳性、中度阳性、强阳均视为pIgR阳性表达。

1.3统计学方法采用SPSS 13.0统计软件。各组阳性率比较采用χ2检验，两组间等级资料比较采用Mann-Whitney U秩和检验，多组间等级资料比较采用Kruskal-Wallis秩和检验；Kaplan-Meier法计算鼻咽癌组5年生存率，用Cox比例风险回归模型做多因素分析。P<0.05为差异有统计学意义。

2结果

2.1 两组pIgR阳性表达率比较观察组和对照组的pIgR阳性表达率分别为15.8%(44/279)、90.0%(27/30)，P<0.05。

2.2 pIgR的表达与鼻咽癌临床病理参数的关系 见表1。

表1　pIgR表达与鼻咽癌临床病理参数的关系

2.3鼻咽癌组pIgR表达与生存期的关系全组中位随访时间为60个月(4～70个月)，5年总生存率为64.6%。pIgR表达阳性者的5年总生存率为51.6%，显著低于pIgR表达阴性者(67.0%)，P=0.030。Cox比例风险回归模型多因素分析显示，仅T分期和N分期与总生存期相关(P均<0.05)，见表2。

表2　Cox比例风险回归模型预后多因素分析结果

3讨论

pIgR是一个跨膜蛋白，在其胞外段有3个互补决定区形成配体结合表面以非共价键连接IgA二聚体。在转运过程中，上皮细胞基侧膜上的pIgR首先与IgA结合，将受体-多聚免疫球蛋白复合物转运穿过胞质在细胞顶端。pIgR胞外段水解形成分泌成分，以保护结合的多聚IgA不被蛋白水解酶降解[8]。Ocak等[9，10]认为，肺癌发生早期pIgR表达就已下调，pIgR通过维持细胞分化来抑制肿瘤发生。本研究发现，观察组和对照组的pIgR阳性表达率分别为15.8%、90.0%，说明鼻咽癌组织中存在pIgR低表达，与Chang等[11]报道一致。有报道称，pIgR高表达是上消化道腺癌有较低复发风险和更长生存期的独立预测因子[3]，且与较低侵袭性亚型的上皮性卵巢癌相关[4]。胰腺癌中，肿瘤特异性的pIgR高表达意味着肿瘤分型较好；pIgR低表达预示患者有预后较差[5]。但也有学者持相反意见，Ai等[6]研究发现起源于乙型肝炎的肝癌中高表达的pIgR与转移潜能大及更差的预后相关。pIgR表达阳性的骨肉瘤总生存时间明显短于比pIgR表达阴性的骨肉瘤[10]。神经胶质瘤中，pIgR表达阳性与更差的预后相关[7]。但本研究Cox多因素分析并未显示其可作为独立预后因素，可能与样本量较小有关。

上皮细胞感染EBV的机理至今仍不清楚，目前研究普遍认为受体学说是EBV感染细胞的主要机制。pIgR蛋白被发现在鼻咽上皮上作为肺炎球菌受体，该受体亦可调理IgA-EBV复合物的细胞内吞作用和转吞作用，递送EBV到腔面[12]。如果上皮细胞丢失极性，或者存在pIgR突变，病毒的转运过程就可能失败从而导致EBV感染[13]。我们前期研究显示，多数鼻咽癌患者中血清EBV-IgA滴度较高，VCA-IgA和EA-IgA检测可作为筛查鼻咽癌高危人群的重要指标[14, 15]。研究发现，pIgR表达与鼻咽癌患者年龄、性别、吸烟史、肿瘤病理类型和临床分期无关，与血清VCA-IgA、EA-IgA有关，也间接提示pIgR在鼻咽癌的发生、发展中起重要作用。几乎所有鼻咽癌活检组织中均包含EBV[16]，但肿瘤细胞中pIgR表达降低，因此鼻咽上皮细胞中pIgR介导的EBV感染可能发生在早期pIgR表达下调之前。分析pIgR与鼻咽癌临床病理特征的关系显示，pIgR表达与患者的年龄、性别及吸烟史无关，与肿瘤病理类型和临床分期亦无相关性；本研究发现，血清VCA-IgA、EA-IgA滴度越高，pIgR阳性表达率越高。综上所述，pIgR在鼻咽癌组织中呈低表达，可能参与鼻咽癌的发生、发展。

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收稿日期：(2015-09-07)

通信作者：蔡永林

基金项目：广西自然科学基金项目(2012GXNSFAA053136)。

中图分类号：R739.6

文献标志码：B

文章编号：1002-266X(2015)46-0072-03

doi：10.3969/j.issn.1002-266X.2015.46.032