VEGF和Ki-67在子宫内膜癌中的表达及临床意义

2016-01-25 03:21康彩梅王振芬杨改中王菊荣牛建清
河北医药 2015年17期
关键词:组织学肌层宫颈

康彩梅 王振芬 杨改中 王菊荣 牛建清

VEGF和Ki-67在子宫内膜癌中的表达及临床意义

康彩梅王振芬杨改中王菊荣牛建清

【摘要】目的探讨血管内皮生长因子(VEGF)和Ki-67在子宫内膜癌的表达及临床意义。方法选取84例子宫内膜癌组织作为观察组,另选取45例正常子宫内膜组织作为对照组。应用免疫组织化通用型二步法检测子宫内膜癌及正常子宫内膜中VEGF、Ki-67的表达,采用阳性表达率对结果进行判断。结果VEGF和Ki-67在子宫内膜癌组织中均呈现阳性表达,阳性表达率分别为82.1%和76.2%,均高于正常子宫内膜(P<0.01)。子宫内膜癌组织中VEGF及Ki-67的阳性表达与年龄、组织学分级、手术病理分期、病理类型、淋巴结及宫颈是否受累有关(P<0.05)。子宫内膜癌患者年龄越大,组织学分化程度越低,手术病理分期级别越高,非子宫内膜样腺癌,淋巴结转移及宫颈受累时,VEGF及Ki-67的阳性表达率均增高。VEGF阳性表达与肌层浸润深度有关,肌层浸润越深,其阳性表达率将增高,而Ki-67与肌层浸润深度无关(P>0.05)。VEGF与Ki-67在子宫内膜癌组织中的表达呈现正相关(r =0.529,P <0.01)。结论VEGF和Ki-67过度表达与子宫内膜癌的发生发展相关。

【关键词】子宫内膜肿瘤;血管内皮生长因子; Ki-67;免疫组织化学

【中图分类号】R 737.33

【文献标识码】A

【文章编号】1002-7386(2015)17-2607-03

doi:10.3969/j.issn.1002-7386.2015.17.014

收稿日期:( 2015-02-11)

作者单位: 056000河北省邯郸市妇幼保健院妇科(康彩梅);河北省邯郸市中心医院妇科(王振芬、王菊荣),病案室(杨改中);开滦总医院妇产科(牛建清)

子宫内膜癌是女性常见恶性肿瘤之一,发病率居我国女性恶性肿瘤第九位,病死率居女性生殖道恶性肿瘤第三位[1]。近年来,子宫内膜癌发病率逐步上升,并且呈现年轻化趋势。本文通过对84例子宫内膜癌血管内皮生长因子(VEGF)和Ki-67进行检测,探讨二者在子宫内膜癌发生、发展中的作用及相关性,报告如下。

1 资料与方法

1.1一般资料选取河北省邯郸市中心医院2010年6月至2013年6月住院手术并经病理证实的84例子宫内膜癌患者为观察组,年龄29~78岁,平均年龄(54 ±9)岁。内膜组织学类型:子宫内膜样腺癌66例,乳头状浆液性癌8例,透明细胞癌6例,鳞癌4例。组织学分级:高分化45例,中分化32例,低分化7例。按照2009年国际妇产科联盟(FIGO)标准分期,Ⅰ、Ⅱ期62例,Ⅲ、Ⅳ期22例。肌层浸润深度:无或浅肌层浸润52例,深肌层浸润32例。宫颈是否受累:未受累60例,受累24例。淋巴结是否受累:未受累67例,受累17例。对照组为因子宫肌瘤在邯郸市中心医院住院手术且病理证实的45例正常子宫内膜组织患者,年龄35~74岁,平均年龄(51±8)岁。2组年龄差异无统计学意义(P>0.05),具有可比性。

1.2主要试剂鼠抗人Ki-67单克隆抗体,鼠抗人VEGF单克隆抗体,超敏型免疫组化检测试剂盒(PV9000 Polymer)及二氨基联苯胺酶底物显色试剂盒,以上试剂均购自北京中杉金桥生物技术有限公司。

1.3实验方法每例标本均经10%中性甲醛固定,石蜡包埋,连续组织切片4 μm厚,采用免疫组化通用型二步法,按照试剂盒说明书操作步骤进行。

1.4结果判断VEGF与Ki-67免疫反应阳性物质分别主要位于细胞质和细胞核,呈现棕黄色至深棕色颗粒为阳性细胞,细胞无阳性反应为阴性。参照Parenti等[2]的标准,采用高倍镜(400×)下对每张切片随机选择5个视野,计数200个细胞/视野,共计1 000个阳性细胞所占百分比,<5%为-,5%~25%为+,26%~50%为+ +,>50%为+ + +,+~+ + +为阳性表达。

1.5统计学分析应用SPSS 17.0统计软件,计量资料以±s表示,彩用t检验,计数资料比较采用χ2检验,相关性采用Spearman等级相关分析,P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 VEGF与Ki-67在子宫内膜癌中的表达

2.1.1 VEGF: VEGF在正常子宫内膜、子宫内膜癌的阳性表达率分别为22.2%、82.1%,从正常子宫内膜至子宫内膜癌,VEGF的阳性表达率呈增高的趋势,差异有统计学意义(χ2=46.150,P<0.01)。见表1。

2.1.2 Ki-67: Ki-67在正常子宫内膜、子宫内膜癌的阳性表达率分别为24.2%、76.2%,从正常子宫内膜至子宫内膜癌,Ki-67的阳性表达率呈增高的趋势,差异有统计学意义(χ2=33.061,P<0.01)。见表1。

2.2 VEGF及Ki-67表达与子宫内膜癌临床病理特征

的关系子宫内膜癌组织中VEGF及Ki-67的阳性表达率均与年龄、组织学分级、手术病理分期、病理类型、淋巴结及宫颈是否受累有关(P<0.05)。子宫内膜癌患者年龄越大,组织学分化程度越低,手术病理分期级别越高,非子宫内膜样腺癌,淋巴结转移及宫颈受累者,VEGF及Ki-67的阳性表达率均增高。VEGF阳性表达率与肌层浸润深度有关(P<0.05),肌层浸润越深,其阳性表达率将增高,而Ki-67与肌层浸润深度无关(P>0.05)。见表1。

表1 VEGF与Ki-67在子宫内膜癌中的表达 例

2.3子宫内膜癌组织中VEGF与Ki-67表达的相关性采用Spearman等级相关分析,VEGF与Ki-67在子宫内膜癌组织中的表达呈显著正相关(r = 0.529,P<0.01)。见表2。

表2 84例子宫内膜癌中Ki-67与VEGF表达的关系 例

3 讨论

VEGF是血管内皮细胞特异性的肝素结合生长因子,为一种同源二聚体。二聚体为分子量24 kDa的单链以二硫键组成。VEGF分解的单体无活性,N2糖基去除对生物效应无影响,但可能在细胞分泌中起作用。由于转录后不同加工方式,产生出至少5种蛋白形式,其中VEGF121、VEGF145、VEGF165是分泌型可溶性蛋白,可直接作用于血管内皮细胞,诱导血管增生。

VEGF是目前公认的作用最强,并且在肿瘤中起着最重要作用的促血管生长因子之一,诱导肿瘤血管生长,促进肿瘤生长、浸润及转移。有文献报道,VEGF与结直肠癌、上皮性卵巢癌及乳腺癌的发生及发展密切相关[3-5]。本研究中VEGF在子宫内膜癌的阳性表达率较正常子宫内膜组增高,且组织分化程度越差、手术病理分期期别越高、肌层浸润越深、宫颈及淋巴结受累时,其阳性表达率将增高。有研究报道,VEGF是子宫内膜癌的预后因素之一,与临床病理参数密切相关[6-9],这与本研究结果接近。这提示VEGF促进了子宫内膜癌的血管形成,推进内膜癌的发生,促进其生长、侵袭及转移。

Ki-67是重要的肿瘤增殖标记分子之一,命名是由Gerdes J一项研究而来,其中Ki-67代表研究者所在的城市Kiel,67代表一株抗体(以霍奇金淋巴瘤细胞系L428细胞的细胞核抗原免疫小鼠得的单克隆抗体)的杂交瘤细胞在96孔板上的序号。Ki-67蛋白有2个分子量分别为320 000和359 000的两种体现形式,由人染色体10q25转录后不同加工方式而来。Ki-67是一个细胞增殖相关蛋白,与细胞周期密切相关。Ki-67随细胞周期进展变化: G1期,Ki-67抗原信号定位于此期形成的核仁;细胞进入S期和G2期,Ki-67信号增强,在核仁和核质中均出现强的分布;细胞进入M期,核膜消失,Ki-67浓集于染色体表面,胞质中少量分布[10]。

对于人Ki-67蛋白的单克隆抗体MIB-1产生,极大推进了Ki-67在回顾性病例研究中的应用。有研究报道,Ki-67与恶性间皮增殖、胃肠道间质瘤及乳腺叶状肿瘤的发生存在相关[11-13]。本研究中子宫膜癌Ki-67阳性表达率明显高于正常子宫内膜组,差异有统计学意义(P<0.01),提示Ki-67与子宫内膜癌的发生可能存在相关。近研究报道,Ki-67与淋巴瘤、尤文肉瘤及肾上腺皮质癌的预后密切相关[14-17]。本研究中子宫内膜癌患者年龄增高、组织学分化越低、手术病理分期期别越高、非子宫内膜样腺癌、宫颈及淋巴结受累时,Ki-67的阳性表达率将增高,差异均有统计学意义

(P<0.05),表明Ki-67与子宫内膜癌的预后可能存在相关。有研究发现,Ki-67是子宫内膜癌的增殖标志物,与子宫内膜癌的发生发展相关[18,19],这与本研究结果一致。

研究报道,VEGF及Ki-67与儿科神经系统恶性肿瘤的临床病理指标存在关联,提示VEGF与Ki-67交互作用于肿瘤,促进细胞增殖,诱导血管形成,促进恶性肿瘤生长、侵袭及转移[20]。本研究中VEGF及Ki-67在子宫内膜癌中的表达呈正相关,提示Ki-67在子宫内膜癌中高表达,它可能通过上调VEGF,促进子宫内膜癌血管形成,进而促进肿瘤的生长、浸润及转移。

子宫内膜癌的发生是多基因、多因素、多步骤共同参与的结果,Ki-67、VEGF不仅参与增殖和调亡过程,而且可促进血管形成。深入研究VEGF、Ki-67及其在子宫内膜癌发生、发展中的作用,有可能从另一角度揭示子宫内膜癌的发病机制和生物学行为,为子宫内膜癌的防治提供更可靠的依据。

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