胶体金免疫层析法在检测乙肝表面抗原方面的临床价值

龙 晖 刘永兰

在临床上，进行乙肝病毒抗原抗体检测是筛查乙肝的主要方法。乙肝表面抗原（Hepatitis B surface antigens,HBsAg）是筛查乙肝的重要指标。酶联免疫吸附法（Enzyme-linked immunosorbent Assay ,ELISA） 在 检 测HBsAg方面具有高度的灵敏度和特异性[1]。目前，此法是进行HbsAg 检测最准确的方法。胶体金免疫层析法（Gold ImmunochromatographyAssay , GICA）在检测HBsAg方面具有检测时间短、不需使用特殊设备等优势，近年来在临床上得到了推广应用。为了分析GICA法在检测HBsAg方面的临床价值，我院对186 例患者的血清标本及HBsAg 定值血清分别采用GICA法、ELISA法进行HBsAg 检测，并对比分析其检测结果，现报告如下：

1 资料与方法

1.1 试剂与仪器

本研究所用的3种HBsAg 定值血清均购自卫生部临床检验中心，其中HBsAg的含量分别为0.5ng/ml、1.0ng/ml和2.0 ng/ml。本研究中采用GICA 法检测HBsAg所用的GICA试纸条由杭州艾博生物医药有限公司生产，采用ELISA法检测HBsAg所用的ELISA 试剂盒由上海英科新创科技有限公司生产。本研究选用美国伯乐公司生产的CODA型全自动酶免分析仪对患者进行相关的检验。

1.2 血清标本

本研究中的患者均为2013年6 月-2014年12 月我院收治的186 例患者。在这些患者中，有男性98例，女性92例，其年龄为18 -72 岁，平均年龄为（50.38±9.16）岁。在早晨这些患者空腹时抽取其4ml的外周静脉血，置于离心机中以3000r/min的速度进行高速离心操作，在10min后分离出血清待测。

1.3 方法

分别采用GICA 法和ELISA 法检测HBsAg 定值血清和本组患者的待测血清。在采用GICA 法进行HBsAg检测时将试纸条固定在操作卡上，用一次性微量吸管吸取20μl以上的待测血清，滴于试纸条的加样区内，在10 -30 分钟内判读检测结果。在采用ELISA 法进行HBsAg检测时，用CODA 型全自动酶免分析仪分别对定值血清与患者待测血清的标本进行检测，并严格按照试剂盒的说明书进行相关的操作。参照Jiang 等[2]的方法判读检测结果。采用GICA法进行HBsAg检测的阳性判定标准是：在完成检测操作后，检测带呈红色。采用ELISA 法进行HBsAg检测的阳性判定标准是：S/CO≥1.0。将为本组患者采用ELISA 法进行HBsAg检测获得的结果作为金标准，分析对其采用GICA法进行检测的灵敏度。

1.4 统计学方法

采用SPSS19.0统计学软件录入数据并进行统计学分析，用免疫层析法检测HBsAg的符合率与灵敏度采用频数和率（n%）表示，行卡方检验，P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 采用GICA法与ELISA法对HBsAg定值血清进行HBsAg检测结果的分析

在用GICA法对HBsAg定值血清进行HBsAg检测时，最小的HBsAg检出量为1.0ng/ml。 在用ELISA法对HBsAg定值血清进行HBsAg检测时，最小的HBsAg检出量为0.5ng/ml。详情见表1。

表1 采用GICA法与ELISA 法对HBsAg定值血清进行HBsAg检测的结果分析

2.2 对本组患者的血清标本采用GICA法与ELISA法进行HBsAg检测的结果分析

对本组患者的待测血清采用GICA 法进行HBsAg检测的阳性率为20.43%，对其采用ELISA 法进行检测的阳性率为22.58%，二者相比差异无统计学意义（χ²=0.255,P＞0.05）。以对本组患者的血清采用ELISA 法进行检测的结果为准，对本组患者采用GICA法进行检测的符合率为97.30%，敏感度为90.48%。详情见表2。

表2 对本组患者的血清标本采用GICA法与ELISA 法进行HBsAg检测结果的分析[n（%）]

3 讨论

在临床上，乙型肝炎病毒（HBV）血清标志物的免疫学检测法主要有ELISA法、化学发光法及时间分辨免疫荧光法。其中，ELISA 法在检测HBV血清标志物方面具有高度的特异性和灵敏性，是进行HbsAg 检测最准确的方法[3]。但此法的操作程序复杂，获得检测结果的时间较长，不适合对急诊患者进行HbsAg 检测。GICA法是一种操作快速简易的免疫学标记物检测方法，在检测HBsAg方面具有操作简便快速、检测时间短、对样本的污染少、不需使用特殊设备、可进行单份样本测定等优点[4]。

本研究的结果显示，ELISA 法与GICA 法均是检测HBsAg 的理想方法，但采用ELISA 法检测HBsAg 的敏感度高于GICA 法。在用GICA 法对乙肝患者进行HbsAg检测时，其病情有可能被漏诊。这一结果与相关文献报道的研究结果相一致[5]。在临床上，我们应根据患者的具体情况为其合理地选择ELISA 法与GICA 法进行HbsAg 检测[6]。对于急诊患者及进行乙肝初筛的患者，可为其首选GICA 法进行HbsAg 检测。在患者的条件允许时可为其首选敏感度高的ELISA酶免法进行HbsAg检测，以提高其检测结果的准确性。

[1] 张茂海，吴建业，陆玲娜，等. 胶体金与酶联免疫法检测乙肝表面抗原结果分析[J].国际检验医学杂志，2011，32（14）:1625-1626.

[2] Jiang SF, Zhang XP, Li BL, et al. Evaluation of partially purified soluble egg antigens in colloidal gold immunoc hromatography assay card for rapid detection of anti-Schistosoma japonicum antibodies[J]. Southeast Asian J Trop Med Public Health, 2014，45（3）：568-75

[3] 陈佑明, 黄敬, 刘京平,等. 两种方法检测乙型肝炎病毒表面抗原的比较[J]. 检验医学与临床，2009，6（7）：495-496.

[4] 孟峻，张保平，王永祥，等.胶体金免疫层析法检测乙型肝炎表面抗原应用评价[J].中国病案，2013，14（11）：1-2.

[5] 李伶俐，孙俊聪. 400 例乙肝表面抗原胶体金试纸条与ELISA法检测结果分析[J].中国医学创新,2011，8（28）:35-36.

[6] 简敏华，张健，陈慧英，等. 乙型肝炎病毒血清标志物GICA检测性能的比对分析[J].检验医学，2013，11：1040-1043.