献血者血液核酸检测的关键及控制点思考

吕 萍，阿不都外力阿巴拜克力

（新疆喀什地区中心血站检验科，新疆 喀什 844000）

献血者血液核酸检测的关键及控制点思考

吕 萍，阿不都外力阿巴拜克力

（新疆喀什地区中心血站检验科，新疆 喀什 844000）

随着我国无偿献血事业的迅速发展，群众的思想觉悟越来越高，越来越多献血者自愿献血，这对临床抢救和治疗具有重大意义。献血者血液核酸检测对控制血液质量起到关键的把关作用，测得值应在试剂说明书规定范围之内。检测的过程中，必须核对可疑标本，对标本进行复查，必要时进行双孔复查，检测质量控制是保证检测质量的关键所在。为了确保血站实验室的检测结果能够记录完整并得到妥善的保留，提高血液标本检测过程中的规范性，卫生部颁发了相关质量管理制度，明确了质量控制的主要范围，明确了用血的规范，为了保证血液的质量，必须对检验过程的关键控制点进行检查，确保批号和有效期限的准确性。为此本文重点探讨献血者血液核酸检测的关键及控制。

血液核酸检测；关键及控制点

开展血站核酸检测是保证血液安全的重要举措。按照《血站技术操作规程》的要求，对所有无偿献血者捐献的血液都要经过至少两次或者两次以上输血传播疾病指标（抗原或抗体）的检测，包括HIV（艾滋病病毒）、HBV（乙肝病毒）、HCV（丙肝）和梅毒，结果均为阴性，就可以在临床给患者使用[1-2]。之前献血中心血站一直采用免疫学方法检测血液中的抗体[3]。虽然免疫学方法的灵敏度和特异性在不断改进和提高，但由于方法本身的局限性，“窗口期”献血、病毒变异等因素仍然可能引起输血后疾病的感染，而核酸检测技术通过检测抗原的方式，可大大降低输血性感染的几率，进一步保障血液安全。现将检测过程如下阐述。

1 检测前的控制点

1.1 在献血前，血站工作人员要对献血者进行健康征询、量血压、称体重等检查，并对血型、血红蛋白、谷丙转氨酶、乙型肝炎表面抗原、梅毒快检等项目进行血液快速筛查，经综合评估，合格者才能献血。同时，对于献血者来说，快速筛查和采血时使用的穿刺针、采血袋等所有器材都是从具有国家规定资质并验收合格的生产厂家采购的。每一位献血者都使用一套新的采血器材，用后集中销毁[4]。

1.2 采血管应使用一次性无菌的真空采血管。分离胶是由疏水有机化合物和硅石粉组成的，结构中含有大量氢键，其比重介于血浆和细胞成分之间，可形成隔离层。离心时，惰性分离胶能够将血液中的液体成分（血清或血浆）和固体成分（红细胞，白细胞，血小板，纤维蛋白等）彻底分开并完全积聚在试管中央而形成屏障，标本在48 h内保持稳定。当失去离心力后，分离胶中链状结构再次变成网状结构，恢复初始高黏度凝胶状态，在血浆和细胞成分间形成隔离层[5]。

1.3 标本与血液同源

在采取血液过后，护士应在每个采血管上做标示，防止贴错标识，防止留错血液标本，并认真核对体检表标签、血袋标签、标本标签。

1.4 防止标本溶血

标本溶血后，红细胞破坏所释放的血红蛋白（Hb），其组分亚铁血红素具有过氧化物酶样作用，可能造成ELISA假阳性；进而抑制Taq酶的活性，使PCR扩增效率明显降低，导致结果偏低（甚至假阴性）[6]。

1.5 处理与保存要求

血液是一种特殊物质，由不同的血液成分组成，不同血液成分的储存条件也存在一定差异，血液必须在规定的条件下保存。如红细胞在2～6℃冷藏环境中可储存35天，血小板可在20～24℃振荡条件下保存5天，新鲜冰冻血浆在-18℃以下的低温冰箱中可储存1年，等等。超出血液储存条件和期限，血液就会失去应有的作用。

1.6 仪器设备的控制

仪器设备应有标识和校正验证的标识，使用和维护记录填写相关数据的完整与保存，定期给仪器维护与维修。如使用全自动扩增检测设备，可根据仪器的特点适当分区，应能有效防止PCR产物污染。实验室的分区原则是各区独立、注意流向、因地制宜、方便工作，同时各工作区应有明确标识[7]。

2 检测中的控制

2.1 建立标准的血液核酸检测工作程序

保证检测工作流程同一化，标本符合检测项目技术要求，试剂使用符合说明书要求，信息管理系统和设备运行通畅。

2.2 保持环境的清洁

核酸检测过程中敏感性极高，微量的污染很有可能导致实验失败，最终使用血液的浪费。在实验室中具备鞋、工作衣或防护服、鞋套、无粉乳胶手套、一次性口罩、一次性帽子等基本工作用具。各个各实验区的用品应有标识，不得混用；配备有相应防护设备，防止在检测的过程中有细菌感染。引起污染的主要原因有标本污染、设备污染和其它污染。应严格控制进出实验室的人员，尽量减少在实验区内不必要的走动以减少交叉污染的可能性，工作完成后及时对实验室进行有效地清洁去污和消毒，核酸检测实验室要做好日维护、月维护工作[8]。

2.3 做好质量控制及评价工作

室内质控必须保证使用试剂中有内标；必须保证试剂存放符合要求，防止污染；必须采用阴性对照，以判断核酸实验室是否污染；必须每个检测批次都有阳性对照，以监测核酸提取的有效性。同时应参加卫生计生委临床检验中心组织的室间质量评价活动，以评价实验的准确性。

3 检测后控制

3.1 首先看内标，阴阳对照和质控扩增结果，无误方可发放报告。

3.2 核酸单检阳性献血者的追踪应遵循知情同意原则

酶免阴性核酸单检阳性献血者，应进行追踪，不同的实验项目制定相应的追踪方案。献血者的追踪，需要多个科室协同进行，并遵循知情同意原则。

3.3 开展计算机信息管理系统标准化建设

集中化核酸检测实验室必须应用系统化对标本的采集与保存、离心与运输、交接及标签编码，以及检测过程和检测报告的发布等进行信息化管理。委托方和受委托方应统一血液信息管理软件、统一标本编码规则，保证区域内每份血液和其标本的追溯性，保证血液检测信息的准确、及时、安全、有效和完整。

4 结 论

核酸检测可有效地缩短窗口期，降低输血风险，提高血液安全。在献血者核酸检测过程中，应做好实验室管理，制订实验室质量管理体系，严格各项技术操作，熟练掌握仪器设备性能，防止实验室污染，保证检测结果的精密度和准确性，不断提高血液检测质量，确保临床用血安全。

[1] 段 勇,郭 逸,叶世军.病毒核酸检测术在西安地区血液筛查中的应用分析[J].中国输血杂志,2014,03(12):254-255.

[2] 于志军,邓雪莲,高慧卉,藏 亮,梁晓华,安万新.血清学检测与核酸检测在献血者血液筛查中的相关研究[J].实用预防学,2014,03(15):365-366.

[3] 赵红娜,王艺芳,李俊英,葛文超,方建华.核酸检测与酶免检测在郑州地区血液筛查中的联合应用[J].中国输血杂志,2015,11(3):423-424.

[4] 冯 晴,孟中华,吕杭军.浙江省血站血液集中化检测工作实践对于规划全省血液核酸检测的启示[J].中国输血杂志,2014,08(14): 89-90.

[5] 李 薇,温馨娜,郑慧丽.齐齐哈尔市无偿献血者血液HBV、HCV、HIV酶免检测联合核酸检测结果分析[J].中国继续医学教育,2016,07(12):147-148.

[6] 方奎明,孙 昂,吴晓晋,祝 青,黄志翔,鲁红霞,易 玲,符 凯,李 轶.血液核酸检测降低血传播疾病风险的研究[J].实用预防医学,2016,10(15):234-235.

[7] 张 峰,张 琼,林 碧,菜淑峰,林 杰.血清学联合核酸检测在献血者血液筛查中的互补性[J].中国艾滋性病,2016,03(12):523-524.

[8] 田耘博,毛 伟,廖红文.重庆市血液中心血液病毒核酸检测试剂利用率的回顾性分析[J].中国输血杂志,2016,10(11):325-326.

本文编辑：刘欣悦

R446.6

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ISSN.2095-6681.2016.33.29.02