蔬菜中农药残留检测方法的质量控制初探

孙建东 黄剑飞 徐培培 曹海燕 李华

X摘 要 《NY/T761-2008蔬菜和水果中有机磷、有机氯、拟除虫菊酯和氨基甲酸酯类农药多种残留的测定》这个检测标准方法在农残检测中是应用最多的，该标准前处理简单，回收率高，准确率高，但检测人员在操作中会出现精密度差，回收率低或高的现象，如果在检测过程中操作人员在关键步骤中得到有效的质量控制，必然会取得满意的检测结果。

关键词 蔬菜；农药残留；检测方法；质量控制

中图分类号：S481.8 文献标志码：B 文章编号：1673-890X（2015）36--03

近年来，蔬菜质量安全越发成为人们关注的焦点。因而蔬菜的农药残留检测工作变得十分重要，从事该工作的人员肩负的责任也变得更加重大，检测过程中，蔬菜的品种和农药残留的品种繁多，有一个严格和科学的检测质量控制程序，是得出准确和可靠农残数据结果的前提和保证。本文已某次人员能力验证为例，介绍江苏省如东县农产品质量检测中心多年来在使用《NY/T761-2008》方法中总结的质量控制方法。

1 材料与方法

1.1 检测样品

本次实验样品为普通白菜样品，由本中心质量负责人加入农药标液，共4个蔬菜样品，1个空白样品，3个平行样品。每个样品均25 g。

1.2 仪器与试剂

气相色谱（安捷伦7890A配备FPD检测器，安捷伦6890N配备ECD检测器，带自动进样器）、HHS421-4电热恒温水浴锅（上海华联环境试验设备公司）、高速匀桨机（IKA T-25）、氮吹仪（Dri-BlockDB-3A）。主要试剂：乙腈（色谱纯）、正已烷（色谱纯）、丙酮（色谱纯）和氯化钠（分析纯）。

1.3 实验方法

采用《蔬菜和水果中有机磷、有机氯、拟除虫菊酯和氨基甲酸酯类农药多残留检测方法》（NY/T 761-2008）进行检测。

1.4 标准溶液的配置

由农业部环境保护科研监测所提供，甲胺磷、甲拌磷、乐果、水胺硫磷、乙酰甲胺磷、氧乐果、毒死蜱、甲基对硫磷、对硫磷 、三唑磷、氯氰菊酯、氰戊菊酯、百菌清、三唑酮、甲氰菊酯、氯氟氰菊酯和异菌脲，质量浓度均为100 ?g/mL，有機磷的标液用丙酮稀释至0.1～0.2 ?g/mL，有机氯的标液用正已烷稀释至0.1～0.2 ?g/mL。

1.5 实验条件

有机磷检测条件色谱柱：DB-1701（30 m×0.32 mm×0.25 ?m）；温度：90℃保持0 min，以20 ℃速度上升到200 ℃，保持4 min，再以25 ℃上升到260 ℃，保持2.1 min。进样体积：1 ?L；不分流进样；检测器200 ℃；进样口温度：200 ℃；氮气流速：60 mL/min；柱压：25 psi；空气流速：100 mL/min；氢气流速75 mL/min。

有机氯的检测条件色谱柱：HP-5（30 m×0.32 mm×0.25 ?m）；温度：90 ℃保持0 min，以15 ℃速度上升到280 ℃，保持10.00 min。进样体积：1 ?L；进样口：250 ℃，不分流进样；检测器300 ℃；进样口温度：250℃，氮气流速：60 mL/min；柱压：25 psi。

2 检测过程及结果

2.1 有机磷农残前处理

准确称取25.0 g样品放人匀浆机中，加入50.0 mL乙腈，在匀浆机中高速匀浆2min后用滤纸过滤，滤液收集到装有5～7 g氯化钠的100 mL具塞量筒中，收集滤液40～50 mL，盖上塞子，剧烈震荡1min，在室温下静止10 min，使乙腈相和水相分层，吸取10.00 mL乙腈溶液，放入烧杯中，在80 ℃水浴锅上加热，并氮吹，蒸发近干。加入2.0 mL丙酮，盖上铝箔，用约3 mL丙酮分3次冲洗烧杯，并转移至离心管。定容至5.0 mL，在旋涡混合器上混匀。过滤膜，移入2 mL样品瓶中，上气相测定。

2.2 有机氯农残前处理

将弗罗里析柱依次用5.0 mL丙酮+正已烷（10+90）、5.0 mL正已烷预淋洗，条件化，倒入上述净化溶液，用15mL刻度离心管接收洗脱液，用5 mL丙酮+正已烷（10+90）冲洗烧杯后淋洗弗罗里析柱，并重复一次，在水浴50 ℃条件下，氮吹至小于5 mL，用正已烷定容至5.0 mL，混匀，移入2 mL进样瓶中，待测。

2.3 色谱图（见图1、图2）

2.4 检测结果

最后在样品中检测到甲拌磷、异菌脲和氰戊菊酯，定性准确，定量回收率在80%～110%，结果满意。

3 检测过程中的质量控制分析探讨

3.1 检测中耗材及标液配制过程中的质量控制

在农残检测准备工作中，要对所用的容量器具进行校验，尽量使用色谱纯试剂，并进行试剂空白试验，确保无杂质峰出现。对于SPE小柱如弗罗里析柱等，要使用同一厂家的同一批次的产品，不同厂家不同批次的柱流速不同，并对于新购小柱进行回收率测定，经确认回收率正常方可使用；标准样品一定要使用有证标准物质，并关注有效期。标准样品储存方法为-18～-20 ℃的冰箱中专人保管，有效期通常为1 a，配置上机使用的标样时，不能直接稀释计算，应先配置中间浓度的储备液，如配成1 mg/L左右的多种农药混合中间标样，这样既方便配置下一级标样，又方便在0～5 ℃冰箱中保存，保存期为2～3周。

3.2 前处理过程中的质量控制

3.2.1 前处理提取过程中的质量控制

样品称样进应先用样品匙混匀样品再称样，匀浆时匀浆机从低速中速到高速匀浆，并且每个速度时间一致，匀浆后过滤时，滤液倒入滤纸时要低于滤纸边沿2 cm，防止滤液倒得太多，溅在外面，滤液要完全收集完。吸取10.00 mL乙腈提取液时，用10 mL大肚吸管，吸液前用该液润洗3次，使液体充满吸管内壁，吸取时刻度要准确。

3.2.2 浓缩净化过程中的质量控制

氮吹時，气体流速快慢要尽量一致，使平行样氮吹浓缩条件一致；氮吹近干的要求是小烧杯内潮潮的一层，但不要吹干，吹干会回收率低，氮吹后加2 mL丙酮，一定要加盖铝箔，这一步在排风橱中操作，如果不加盖铝箔，丙酮散发得快，会引起回收率高。在样品多时，操作速度要快，定容完一个立即进行下一个，为防止时间过长，丙酮挥发。

净化时淋洗弗罗里析柱时，所用淋洗液5 mL要准确，这样可使弗罗里析柱的淋洗条件一致，液面不要干，当溶剂液面到达柱吸附层表面时，立即倒入上述待净化溶液，如果柱子表面干了再倒入溶液，农药会吸附在柱子上，回收率降低。第二次50 ℃氮吹时，要求氮吹至小于5 mL，可吹得小于1 mL，这样做的好处是溶液中丙酮量会减少，用ECD检测时不会对ECD有损害。

3.3 仪器使用过程中的质量控制

3.3.1 气源检查

如载气（氮气）、燃烧气（氢气、空气）用钢瓶，一般要选择纯度达99.99%，如用气源发生器要经常检查、更换干燥剂，注意气源与仪器接口处是否有积水现象。最好配备气体过滤器，避免鬼峰。

3.3.2 进样器检查

进样器和进样针要定期清洁并检查进样器是否灵活，以减少积尘太多造成停止运行或者进样不重复性等。进样针可以选用两种不同的溶剂进行清洗；在进样后增加清洗次数；时间长了可取下用丙酮浸泡清洗进样针尾部等。

3.3.3 衬管检查

衬管对残留分析非常关键，有机磷农药甲胺磷、氧化乐果、乐果等农药的出峰情况受衬管影响非常大。最好选经惰性处理的衬管，当标样峰面积有明显下降时，要及时清洗或更换衬，更换后要获得理想的响应值需要用样品进行饱和。

3.3.4 色谱柱检查

色谱柱是组分分离的重要部分，色谱柱质量如何直接影响检测结果。衡量柱子好坏不仅看柱效、还要考虑其流失和柱寿命等。一般当标样峰面积有明显下降时，可以直接割去进样口0.5～1 m的色谱柱，然后对柱子进行老化。

3.3.5 检测器维护上需要区别对待

ECD的检测池易污染，安捷伦仪器基线一般在500 Hz以下，1 000 Hz以上进需高温过夜进行老化。FPD需调石英管的位置、氢气流量等，安捷伦仪器基线一般在30pA以下，基线高一般要调节氢气和空气的配比。

3.3.6 样品检测前还要进行预实验

气相色谱仪要选择最佳工作条件，使多种农药能良好分离，峰型尖锐。一般还要重复进样6针，计算峰面积，如RSD>10%，初步确定是衬管或柱子受污染，先从衬管排除，更换新衬管、O型圈和进样垫，再次进样品，确保RSD<5%，才可进行正常检测。

3.4 加标回收的过程中的质量控制

大多数农药的回收率会在70%～120%，但是氧化乐果等强极性农药，有较强的基质效应，回收率会达160%以上，解决的办法是同一样品的基质配标液，例如找一空白样品，按方法进行前处理，最后定容至5 mL，用这5 mL配制标液，进气相测得峰面积，用来计算样品回收率，能力验证过程中也可用空白样中多余的丙酮定容液配制标液，这样就大大减少了基质效应。能力验证中还要注意添加回收率试验，在拿到盲样进行前处理时，可自选一蔬菜样品进行加标回收率试验，蔬菜样品尽量选择与盲样样品基质一致的物质，加标后的样品不能马上进行前处理，等到样品充分吸收农药后方可进行，以保证加标回收试验结果的准确性。

3.5 难检组分的质量控制

难检组分指检测过程中添加回收太高或太低或回收率不稳定的一些农药组分。按不同原因可分为以下几类。

3.5.1 甲胺磷、氧化乐果、乐果

这些农药的共同特点是极性相对较强，容易被衬管和玻璃棉吸附，一旦衬管脏了，标样峰面积下降特别明显。通过用样品加标作为标液来计算，可以使它们的回收率变好。

3.5.2 甲拌磷

在做添加回收率时，甲拌磷的回收率不稳定，有时非常好90%左右，但有时会非常低，低于50%，而甲拌磷标样出峰情况非常稳定，经过多次试验发现是氮吹环节的问题，如果吹的太干，甲拌磷回收率肯定低，一定要近干，或者用旋转蒸发仪进行浓缩就不会出现这个问题。

3.5.3 氰戊菊酯、氯氰菊酯

氰戊菊酯、氯氰菊酯也存在回收率不稳定情况，但往往回收率偏高，高到140%左右，这与基质效应有关，通过用样品加标作为标液和自行加标回收来计算，可以使它们的回收率变高。

（责任编辑：刘昀）