刘 宁崔桂山杨 玲杨在宾∗∗杨维仁姜淑贞张桂国(.山东农业大学动物科技学院,泰安2708;2.潍坊亨懋动物保健品有限公司,潍坊2604;.山东省畜牧总站,济南250022)
冬季条件下维生素A水平对蛋鸡抗氧化能力及血清、肝脏和鸡蛋维生素A含量的影响
刘 宁1崔桂山2∗杨 玲3杨在宾1∗∗杨维仁1姜淑贞1张桂国1
(1.山东农业大学动物科技学院,泰安271018;2.潍坊亨懋动物保健品有限公司,潍坊261041;3.山东省畜牧总站,济南250022)
摘 要:本试验旨在研究冬季条件下维生素A水平对蛋鸡抗氧化能力及血清、肝脏和鸡蛋中维生素A含量的影响。选取525只43周龄健康海兰褐蛋鸡,随机分为5个组,每个组5个重复,每个重复21只鸡。对照组饲喂基础饲粮(维生素A水平为8 000 IU/kg),试验组饲粮维生素A水平分别为10 500、13 000、15 500和18 000 IU/kg,其他维生素水平与对照组饲粮保持相同,试验期42 d。结果表明:随维生素A水平的增加,血清总抗氧化能力和超氧化物歧化酶的活性呈先升后降趋势,血清丙二醛含量降低,肝脏中维生素A含量升高,且肝脏中维生素A含量与饲粮维生素A水平显著线性相关(P<0.05);第21和42天时,维生素A水平为8 000~15 500 IU/kg时,随维生素A水平的增加,鸡蛋中的维生素A含量显著增加(P<0.05),而维生素A水平为15 500~18 000 IU/kg时,随维生素A水平的增加,鸡蛋中维生素A含量反而显著降低(P<0.05)。由此可知,在本试验条件下,饲粮维生素A水平为10 500~13 000 IU/kg时,蛋鸡可以获得较强的血清抗氧化能力;维生素A水平为15 500 IU/kg时,蛋鸡血清、肝脏和鸡蛋中可获得较高的维生素A沉积量。
关键词:维生素A;抗氧化能力;血清维生素A;肝脏维生素A;鸡蛋维生素A
∗∗通信作者:杨在宾,教授,博士生导师,E⁃mail:zbyang204@163.com
维生素A是蛋鸡生产需要的重要脂溶性维生素之一,在体外试验中被证实是一种有效的抗氧化剂[1-2],体内试验中也被证实为一种有效的抗氧化和清除自由基物质[3]。肝脏和血清中维生素A水平是评定饲粮维生素A水平是否满足需要的敏感指标[4],而鸡蛋中维生素A含量分析是一项估测产蛋鸡维生素A营养状况的诊断技术,通过对鸡蛋中维生素A含量的分析测定可以估测饲粮最适维生素A水平,还可以直接用于测定维生素A的生物学效价[5]。目前关于适宜条件以及热应激下蛋鸡维生素A的适宜添加水平的研究较多[6],但冬季条件下维生素A适宜添加水平却鲜有报道,北方冬季温度较低(一般在4℃以下),而当外界温度降到或低于4℃时,即可引起家禽发生冷应激[7],但对于冬季条件下维生素A水平对海兰褐产蛋鸡血清抗氧化以及血清、肝脏和蛋中维生素A沉积量的研究国内未见报道。因此,本试验从以上4个方面探讨冬季条件下蛋鸡饲粮适宜维生素A水平。
1.1 试验材料
维生素A由潍坊亨懋动物保健品有限公司提供。
1.2 试验设计及饲粮
选525只43周龄健康海蓝兰蛋鸡,随机分成5个组,每组5个重复,每个重复21只。对照组饲喂基础饲粮,按我国《鸡饲养标准》维生素A推荐量(8 000 IU/kg)供给;试验组饲粮在基础饲粮中依次增加2 500 IU/kg,即维生素A水平分别为10 500、13 000、15 500和18 000 IU/kg,其他维生素水平与对照组饲粮相同。基础饲粮参照NRC (1994)蛋鸡标准配制,其组成及营养水见表1。
表1 基础饲粮组成及营养水平(干物质基础)Table 1 Composition and nutrient levels of the basal diet(DM basis) %
1.3 饲养管理
试验前,饲喂鸡场饲粮,收集2周的基础数据,然后换试验饲粮。试验期42 d,冬季(外界气温变动范围为-15~2℃,鸡舍内温度变动范围为5~12℃)进行试验。试验鸡采用2层阶梯式笼养,自由采食与饮水,自然光和人工光照相结合,光照时间为16 h。按蛋鸡饲养管理要求进行免疫和消毒。
1.4 试样采集
于试验的第1、21、42天,每个重复取2枚鸡蛋,每个组共10枚鸡蛋用于测定鸡蛋维生素A的含量。
试验结束时每个重复选2只鸡,每个组共10只,翅静脉采血10 mL,以3 000 r/min离心10 min,分离血清,放入-20℃保存待测抗氧化及维生素A含量。采血后屠宰,取肝脏并迅速液氮冻存,待测肝脏维生素A含量。
1.5 检测指标及方法
1.5.1 抗氧化能力指标
采用试剂盒测定血清中总抗氧化能力(T⁃AOC)、超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量,试剂盒均购自南京建成生物工程研究所。
1.5.2 鸡蛋中维生素A含量的测定
测定方法采用GB/T 5009.82—2003《食品中维生素A和维生素E的测定》[8]的方法。
1.5.3 血清及肝脏维生素A含量的测定
血清维生素A含量,采用反相高效液相色谱法测定,波长为325 nm。
肝脏维生素A含量同鸡蛋维生素A含量的测定方法相同。
1.6 数据处理
数据采用SAS 9.2统计软件进行单因素方差分析(one⁃way ANOVA)和LSD,差异显著性采用Duncan氏法进行多重比较,并对维生素A水平的处理效应进行线性和二次回归分析。P<0.05为差异显著。
2.1 维生素A水平对蛋鸡血清抗氧化能力的影响
由表2可知,饲粮维生素A水平显著影响蛋鸡血清抗氧化能力(P<0.05)。随维生素A水平的增加,T⁃AOC呈线性(P<0.05)或二次曲线升高(P<0.05),SOD活性呈二次曲线升高(P<0.05),MDA含量呈线性(P<0.05)或二次曲线降低(P<0.05)。维生素A水平为10 500和13 000 IU/kg时,T⁃AOC和SOD活性显著高于8 000 IU/kg时(P<0.05),而MDA含量显著低于8 000 IU/kg时(P<0.05);与8 000 IU/kg组相比,15 500 IU/kg 组MDA含量显著降低(P<0.05),T⁃AOC和SOD活性差异不显著(P>0.05)。维生素A添加水平达到18 000 IU/kg时,虽然MDA含量显著低于其他水平(P<0.05),但T⁃AOC的活性显著低于8 000 IU/kg时(P<0.05),而SOD活性与其他水平差异不显著(P>0.05)。
表2 维生素A水平对蛋鸡血清抗氧化能力的影响Table 2 Effects of vitamin A level on the serum antioxidant capacity of laying hens
2.2 维生素A水平对蛋鸡血清、肝脏维生素A含量的影响
由表3可知,饲粮维生素A水平显著影响蛋鸡血清和肝脏维生素A含量(P<0.05)。随维生素A水平的增加,血清中维生素A的含量呈二次曲线变化(P<0.05),肝脏中维生素A含量呈线性(P<0.05)或二次曲线升高(P<0.05)。与18 000 IU/kg组相比,15 500 IU/kg组血清维生素A含量差异不显著(P>0.05),但其余组间差异显著(P<0.05)。10 500 IU/kg组肝脏中维生素A含量与13 000 IU/kg组差异不显著(P>0.05),但与其他组间差异显著(P<0.05)。
表3 维生素A水平对血清和肝脏维生素A含量的影响Table 3 Effects of vitamin A level on the content of vitamin A in serum and liver of laying hens
2.3 维生素A水平对鸡蛋维生素A含量的影响
由表4可知,第21和42天时,饲粮维生素A水平显著影响鸡蛋维生素A含量(P<0.05)。试验第21天时,随维生素A水平从8 000 IU/kg增加到18 000 IU/kg,鸡蛋中维生素A含量显著升高(P<0.05),且呈线性(P<0.05)或二次曲线升高(P<0.05)。试验第42天时,随维生素A水平的增加,鸡蛋中维生素A含量显著增加(P<0.05),且呈现线性(P<0.05)或二次曲线升高(P<0.05)。当维生素A水平为18 000 IU/kg时,第21、42天鸡蛋中维生素A含量较15 500 IU/kg时显著降低(P<0.05)。
表4 维生素A水平对鸡蛋维生素A含量的影响Table 4 Effects of vitamin A level on the content of vitamin A in eggs
3.1 维生素A水平对蛋鸡血清抗氧化能力的影响
本试验中的饲粮维生素A水平是在NY/T 33—2004推荐量8 000 IU/kg的基础上继续添加,试验结果表明维生素A添加水平的增加提高了血清T⁃AOC和SOD活性,且具有先升后降的趋势。饲粮维生素A水平为10 500和13 000 IU/kg时,血清T⁃AOC和SOD活性达到最高,但当维生素A水平为15 500和18 000 IU/kg时,T⁃AOC和SOD活性却呈现下降的趋势,这与张养东[9],任国峰等[10]的研究结果一致,原因可能是维生素A水平不同可不同程度的影响机体的抗氧化能力,适宜水平能有效的降低脂质过氧化反应,增强T⁃AOC 和SOD的活性,而水平过高产生反抑制效果,不利于机体的抗氧化能力,导致机体平衡状态破坏,降低血清T⁃AOC和SOD的活性。本试验还发现,维生素A添加水平从8 000 IU/kg增加到18 000 IU/kg,血清MDA含量显著降低,这与谢登玉等[11]的研究结果一致,其原因可能是在冷应激作用下,打破了机体自由基产生与清除的平衡的状态,自由基的大量积累出现脂质过氧化,这就使得动物的饲粮中维生素A及其他抗氧化营养物质除了能满足基本的营养需要外,还要求能维持自由基稳衡状态[12],即机体对维生素A的需要量发生改变。
3.2 维生素A水平对蛋鸡血清、肝脏维生素A含量的影响
一般认为维生素A在血清和肝脏中的含量是评定饲粮维生素A水平是否满足需要的敏感指标[4]。本试验结果表明,维生素A水平为8 000~13 000 IU/kg时,血清维生素A含量随饲粮维生素A水平的升高而显著降低;维生素A水平为15 500~18 000 IU/kg时,血清维生素A含量保持相对稳定,这说明,维生素A水平低于15 500 IU/kg,尚不能满足冬季蛋鸡维持血清维生素A正常含量的需要,而添加15 500~18 000 IU/kg维生素A时血清维生素A含量能够维持相对稳定。该结果可以解释为当饲粮维生素A水平低于某一范围时,血清维生素A含量下降;而高于某一范围时,血清维生素A含量则增加;当超过一定范围时,增加幅度变小,并保持稳定[13]。
本研究发现,肝脏维生素A的含量与饲粮维生素A水平存在显著的线性相关,这与张丽萍等[14]、张春善等[15]研究结果一致,同时Surai等[16]的试验表明,给鸡强制灌入维生素A,能够增加肝脏维生素A的沉积量,这说明肝脏是维生素A的存储器官,其维生素A含量的变化直接反映机体维生素A的摄入情况,同时肝脏具有调节外周维生素A含量的能力,摄入大量维生素A时,肝脏可将其储存,避免血液中维生素A含量过高,而维生素A缺乏时,动员肝脏释放满足组织需要[17]。
3.3 维生素A水平对鸡蛋维生素A含量的影响
鸡蛋中正常维生素A含量的分析测定可以估测饲粮最适的维生素A水平,还可直接用于测定维生素A的生物学利用率。Hill等[18]在研究蛋鸡维生素A需要量时发现,饲粮维生素A的水平从1 980 IU/kg增加到22 000 IU/kg时,鸡蛋中维生素A含量提高了23倍。Surai等[16]在蛋鸡饲粮中添加10 000、20 000、100 000和400 000 IU/kg的维生素A,结果发现在每个添加水平均能使鸡蛋中维生素A的含量增加,在最高水平组中,每克蛋黄中维生素A含量达到85.1 mg。以上研究与本试验得出的结论相似,另外本试验还发现,当维生素A水平从15 500 IU/kg升高至18 000 IU/kg时,鸡蛋中维生素A的含量却显著降低,这可能是因为过高水平的维生素A对机体的正常代谢造成了损害,导致维生素A在鸡蛋中的沉积量减少。
综合考虑国家相关规定和成本因素,冬季条件下海兰褐产蛋鸡维生素A水平为10 500~13 000 IU/kg时可以获得较强的血清抗氧化能力;维生素A水平为15 500 IU/kg时,血清、肝脏和鸡蛋维生素A沉积量较高。
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Effects of Vitamin A Level on Antioxidant Capacity in Serum,Vitamin A Contents in Serum,Liver and Egg of Laying Hens in Winter
LIU Ning
1
CUI Guishan
2∗
YANG Ling
3
YANG Zaibin
1∗∗
YANG Weiren
1
JIANG Shuzhen
1
ZHANG Guiguo
1
(责任编辑 陈 燕)
(1.College of Animal Science and Technology,Shandong Agricultural University,Tai’an 271018,China;2.Weifang Herao Animal Health Products Co.,Ltd.,Weifang 261041,China;3.Shandong Province Animal Husbandry Station,Jinan 250022,China)
∗Contributed equally
∗∗Corresponding author,professor,E⁃mail:zbyang204@163.com
Abstract:This experiment was conducted to investigate the effects of vitamin A level on antioxidant function and vitamin A contents in serum,liver and egg of laying hens in winter.A total of 525 healthy Hy⁃line laying hens were randomly divided into 5 groups with 5 replicates per group and 21 hens per replicate.Hens in the control group were fed a basal diet(contained 8 000 IU/kg vitamin A),and the others in experimental groups were fed diets which contained 10 500,13 000,15 500 and 18 000 IU/kg vitamin A,respectively.All groups had the same level of other vitamins.The experiment lasted for 42 days.The results showed as follows:the ser⁃um total antioxidant capacity(T⁃AOC)and superoxide dismutase(SOD)activity increased first and then de⁃creased with the level of vitamin A increasing,however,the serum content of methane dicarboxylic aldehyde (MDA)was decreased.The content of vitamin A in liver was increased with the level of vitamin A increasing,moreover,the liver content of vitamin A was increased linearly(P<0.05).The content of vitamin A in eggs increased significantly with the level of vitamin A from 8 000 to 15 500 IU/kg(P<0.05),but the content of vitamin A in eggs decreased significantly with the level of vitamin A from 15 500 to 18 000 IU/kg on days 21 and 42(P<0.05).In conclusion,dietary vitamin A level from 10 500 to 13 000 IU/kg can obtain the better antioxidant capacity,more contents of vitamin A can obtain in serum,liver and eggs with the level of vitamin A on 15 500 IU/kg.[Chinese Journal of Animal Nutrition,2015,27(7):2209⁃2214]
Key words:vitamin A;antioxidant capacity;serum vitamin A;liver vitamin A;egg vitamin A
作者简介:刘 宁(1989—),男,山东泰安人,硕士研究生,从事动物营养与饲料科学的研究。E⁃mail:nuli982390@163.com∗同等贡献作者
收稿日期:2015-01-29
doi:10.3969/j.issn.1006⁃267x.2015.07.027
文章编号:1006⁃267X(2015)07⁃2209⁃06
文献标识码:A
中图分类号:S816.72;S831