黑果枸杞组织培养技术

胡相伟，马彦军，李毅，罗庆红

（1.兰州市林木种苗繁育中心，甘肃兰州 730085；2.甘肃农业大学林学院，甘肃兰州 730070）

黑果枸杞组织培养技术

胡相伟1，马彦军2，李毅2，罗庆红1

（1.兰州市林木种苗繁育中心，甘肃兰州 730085；2.甘肃农业大学林学院，甘肃兰州 730070）

采用黑果枸杞野生优良单株上一年生休眠枝芽为材料，利用组织培养技术，经消毒灭菌，芽诱导、继代培养、生根培养，进行炼苗移栽，成活率可达80%以上。

黑果枸杞；组织培养；培养基

黑果枸杞（Lycium ruthenicum Murr）是茄科枸杞属多年生耐盐、抗旱植物，分布于我国西部地区，其成熟浆果中富含紫红色色素，属于典型的天然花色苷类植物色素资源，具有重要的药食保健价值［1～2］。为遏制近年来市场需求量猛增、黑果枸杞价格上涨带来的乱挖乱垦乱采局面［3～4］，使这一特色植物资源尽快向生态经济良性发展，我们优选优良株系，采用组培技术生产穴盘苗以期为工厂化育苗提供可能，并保证遗传特性优良。

1 外植体的建立

材料采自青海诺木洪农场野生优良单株，优选结果性好、生长健壮的优良株系一年生休眠枝条，用自来水冲洗20 min，剪成带1个芽的小段。在超净工作台上，用75%酒精浸泡30 s，再置于0.1%升汞溶液（加1～2滴吐温20）中消毒15 min，然后用无菌水冲洗5次，用消毒滤纸吸干茎段表面水分。

2 初代培养

将外植体接种到芽诱导培养基MS+0.5 mg/L 6-BA+30 mg/g蔗糖+6 mg/g琼脂上，培养基pH 6.0，培养温度（22±1）℃、光照12 h/d、光照度40 μmol/（m2·s），培养30 d后可有新茎形成。

3 继代培养

将诱导的新茎剪段转接入继代培养基MS+0.3 mg/L6-BA+0.05 mg/L NAA+30 mg/g蔗糖+6 mg/g琼脂中，培养基pH和培养条件同初代培养，约20 d后丛生芽产生，40 d后有5～6个芽体长至5～6 cm，此时可转瓶剪段在继代培养基中继续扩繁（图1）。

图1 黑果枸杞的组织培养继代苗

4 生根培养

将继代培养出的嫩茎剪成1.5～2.0 cm小段，接入生根培养基1/2MS+0.5 mg/L IAA+15 mg/g蔗糖+6 mg/g琼脂中进行培养，培养基pH和培养条件同初代培养，约20 d长出不定根，30 d后多数试管苗生3～5条根（图2），生根率可达90%以上。

图2 黑果枸杞的组织培养生根苗

5 炼苗及移栽

将高5 cm、具有3～5条根的试管苗，闭瓶逐步移到散射光的自然环境中炼苗7 d，然后从瓶中取出，35℃以下温水洗净根部培养基，用63穴育苗盘、营养钵、花盆装蛭石和珍珠岩（1∶1）基质进行移栽，在智能温室中，将育苗盘放在育苗床上，相对湿度控制在65%，温度控制在25℃进行培养炼苗［5］，成活率可达80%以上。

［1］甘青梅，骆桂法，李普衍，等.藏药黑果枸杞开发利用的研究［J］.青海科技，1997，4（1）：17-19.

［2］王龙强，蔺海明.黑果枸杞苗期耐盐机制研究［J］.科技导报，2011，29（10）：29-33.

［3］王海秀.柴达木黑果枸杞培育技术［J］.防护林科技，2010（2）：121.

［4］李世忠.永靖县黑果枸杞育苗技术［J］.林业实用技术，2011（7）：48-49.

［5］聂玉鸿，储朝霞，任廷贵，等.黑果枸杞塑料大棚育苗技术［J］.甘肃农业科技，2014（1）：64-65.

（本文责编：陈珩）

S567.1

A

1001-1463（2015）05-0073-02

10.3969/j.issn.1001-1463.2015.05.024

2014-12-29

国家国际科技合作计划项目（2012DFR30830）

胡相伟（1975—），男，甘肃榆中人，高级工程师，主要从事林木花卉繁育和育种工作。联系电话：（0931）6262121；（0）13619310667。E-mial：hxw5129@126.com