芒果新病害露水斑病病菌9种单剂间复配增效配比筛选

王赛格　蒲金基　杨永利　张贺　韦运谢　刘晓妹

摘要：为了给芒果新病害露水斑病防治提供药剂复配依据，采用Horsfall法，对初筛获得的9种单剂进行了室内复配筛选。结果表明，在本次测试的33个组合198个配比中，毒力比率大于1.2的配比有26个。其中，吡唑醚菌酯 ∶ 丙环唑以1 ∶ 4，咪酰胺 ∶ 多抗霉素B以2 ∶ 3的毒力比率约为2.0，增效最明显；其次是咪酰胺 ∶ 多抗霉素B以 1 ∶ 4 的配比，毒力比率为1.72；吡唑醚菌酯 ∶ 氟硅唑以1 ∶ 4，吡唑醚菊酯 ∶ 戊唑醇以2 ∶ 3，多抗霉素B ∶ 氟硅唑以 1 ∶ 4 或3 ∶ 2，溴菌腈 ∶ 丙环唑以3 ∶ 2，多抗霉素B ∶ 溴菌腈以2 ∶ 3，吡唑醚菌酯 ∶ 丙环唑以2 ∶ 3配比时，毒力比率介于1.51～1.63之间，也有较好的增效作用。可见，吡唑醚菌酯和丙环唑以1 ∶ 4、咪酰胺和多抗霉素B以2 ∶ 3的配比应用潜力较大，值得进一步研究。

关键词：芒果；露水斑病；杀菌剂；复配；增效；配比

中图分类号： S436.67+9 文献标志码： A 文章编号：1002-1302（2015）10-0191-02

芒果（Mangifera indica Linn.）为漆树科（Anacardiaceae）常绿果树，因营养价值高而享有 “热带果王”之美誉，是世界第二大热带水果。在我国主要栽培于台湾省、海南省、广西壮族自治区、广东省、云南省、四川省、福建省和贵州省等热带、亚热带地区[1]，其中海南省的种植面积和总产量居全国首位[1]。2011年海南芒果的种植面积达4.37万hm2，产量达40.34万t，分别占全国种植面积和总产量的31.15%和40.20%[2]。芒果露水斑病（Cladosporium cladosporioides）为海南省新发生的病害，于2007年始发于海南省昌江市，目前已经蔓延到海南省三亚市、东方市等芒果主产区，且危害日趋势严重。该病主要危害果实，多在采收期显症，病斑呈不规则形的水渍状，湿度大时病斑上常产生墨绿色的霉层，严重影响果实的外观和商品价值[3]。露水斑病一旦发生，3 d左右就会出现大量病斑，若在收果前出现则对价格影响更大，甚至无人收购，严重影响海南芒果种植户生产效益。而针对该病害的防治药剂尚未见报道。笔者所在课题组从市售的30种杀菌剂中，经过室内筛选获得了9种抑菌效果较好的单剂。考虑到合理混配是兼治多种有害生物、扩大使用范围、省工省时，提高药效，延缓抗药性，降低药剂毒性、药害和残留的重要途径[4]，本试验对所获得的单剂进行了复配剂不同配比抑菌效果的测定，以期寻找到增效配比组合，为芒果露水斑病的化学防治提供更多的药剂混配参考。

1 材料与方法

1.1 供试菌株与药剂

芒果露水斑病病原菌[Cladosporium cladosporioides （Fresen） de Vries]，由中国热带农业科学院环境与植物保护研究所果树课题组鉴定提供。供试药剂、生产厂家和药剂浓度设置见表1。

1.2 方法

1.2.1 菌种活化培养 将试管斜面保存的病原菌转接在新的PDA平板。28 ℃培养3～5 d后，用无菌水配成1×106～1×107个/mL孢子悬浮液，取100 μL涂抹于PDA平板上，28 ℃ 培养2 d后打直径9 mm菌饼备用。

1.2.2 复配剂的室内抑菌效果测定 采用Horsfall法[5]进行复配剂增效配比的筛选。根据前期筛选获得的吡唑醚菌酯（凯润）、苯醚甲环唑、咪酰胺、多抗霉素、多菌灵、溴菌腈（炭特灵）、氟硅唑、丙环唑、戊唑醇共9种单剂进行两两复配，共33种复配组合，因试验工作量太大，本试验依据单剂的EC50按照5 ∶ 0、4 ∶ 1、3 ∶ 2、2 ∶ 3、1 ∶ 4、0 ∶ 5共6个浓度配比，198个浓度配比组合。每个配比重复5次，采用含毒介质法制成不同配比的含毒平板，将9 mm的菌饼接于含药平板上，以无药平板为对照，置于28 ℃恒温培养箱中培养，8 d后测量菌落直径，计算各配比的实际抑菌率。若毒力比率明显大于1，为增效作用；若毒力比率明显小于1，为拮抗作用；若毒力比率为1左右，则为相加作用。

实际抑菌率=（对照的菌落直径-处理的菌落直径）/（对照菌落直径-9 mm）×100%；理论抑菌率=（单剂A实际EC50抑菌率×配比中的百分比）+（单剂B实际EC50抑菌率×配比中的百分率）；毒力比率=实际抑菌率（%）/理论抑菌率（%）。

2 结果与分析

将单剂两两复配共测试了33个组合198个配比中，毒力比率大于1的配比有64个，毒力比率大于1.2的配比有26个（表2）。从表2中可见，（1）吡唑醚菌酯 ∶ 丙环唑以1 ∶ 4，咪酰胺 ∶ 多抗霉素B以2 ∶ 3，咪酰胺 ∶ 多抗霉素B以1 ∶ 4，吡唑醚菌酯 ∶ 氟硅唑以1 ∶ 4，唑醚菊酯 ∶ 戊唑醇以2 ∶ 3，多抗霉素B ∶ 氟硅唑以1 ∶ 4，多抗霉素B ∶ 氟硅唑以3 ∶ 2，溴菌腈 ∶ 丙环唑以3 ∶ 2，多抗霉素B ∶ 溴菌腈以2 ∶ 3，吡唑醚菌酯 ∶ 丙环唑以2 ∶ 3配比时增效很明显，毒力比率介于1.5～2之间，其中以前2个复配剂的增效作用最为明显；（2）多抗霉素B ∶ 溴菌腈以4 ∶ 1，多抗霉素B ∶ 氟硅唑以2 ∶ 3，苯醚甲环唑 ∶ 戊唑醇以2 ∶ 3，吡唑醚菌酯 ∶ 戊唑醇以1 ∶ 4，多抗霉素B ∶ 溴菌腈以3 ∶ 2，多抗霉素B ∶ 丙环唑以4 ∶ 1配比时增效作用也较明显，毒力比率介于1.3～1.5之间；（3）溴菌腈 ∶ 丙环唑以2 ∶ 3，苯醚甲环唑 ∶ 丙环唑以4 ∶ 1，吡唑醚菌酯 ∶ 丙环唑以3 ∶ 2，多抗霉素B ∶ 溴菌腈以1 ∶ 4，多菌灵 ∶ 戊唑醇以3 ∶ 2，苯醚甲环唑 ∶ 多菌灵以1 ∶ 4，多抗霉素B ∶ 丙环唑以2 ∶ 3，多抗霉素B ∶ 戊唑醇以2 ∶ 3，苯醚甲环唑 ∶ 戊唑醇以4 ∶ 1，吡唑醚菌酯 ∶ 氟硅唑以 2 ∶ 3配比时也表现出一定的增效作用，毒力比率介于1.2～1.3之间，尤其是多菌灵 ∶ 戊唑醇以3 ∶ 2配比时，尽管毒力比率仅为1.27，但实际抑菌率高达94%。此外，多菌灵 ∶ 戊唑醇以4 ∶ 1，多菌灵 ∶ 丙环唑以4 ∶ 1或3 ∶ 2，多菌灵 ∶ 溴菌腈以4 ∶ 1配比时，虽然毒力比率接近于1，但实际抑菌率也均高于80%。endprint

苯醚甲环唑与咪酰胺、多抗霉素B、吡唑醚菌酯、溴菌腈、氟硅唑，溴菌腈与吡唑醚菌酯、氟硅唑、丙环唑、戊唑醇、咪酰胺，吡唑醚菌酯与多菌灵、多抗霉素B、咪酰胺，多菌灵与多抗霉素B、氟硅唑、咪酰胺，咪酰胺与丙环唑、戊唑醇、氟硅唑的各种配比却表现出相加或拮抗作用。

3 结论与讨论

吡唑醚菌酯毒性低，对非靶标生物安全，对使用者和环境安全友好，已被美国环保局列为“减风险候选药剂”[6]，但是该药剂还具有作用位点单一的缺点，又被国际杀菌剂抗性委员会（fungicide resistance action committee，FRAC）列为高抗性风险药剂[7]。因此将该药剂与其他药剂复配成为解决此矛盾的有效途径，如将它与氟环唑、戊唑醇或叶菌唑复配能更有效地防治亚洲大豆锈病[6]，与氟吡菌胺以4 ∶ 1配比的混合物对黄瓜霜霉病菌的毒力增效明显[8]。考虑到吡唑醚菌酯的作用特点，本试验也将它与其他药剂进行了复配筛选，从结果来看，吡唑醚菌酯与丙环唑、氟硅唑和戊唑醇的各种配比均表现出不同程度的增效作用，但与苯醚甲环唑、咪酰胺、多抗霉素B、多菌灵、溴菌腈的各种配比却表现相加或弱的拮抗作用，可见吡唑醚菌酯更适合与三唑类药剂中的丙环唑、氟硅唑和戊唑醇这几种药剂混配。

多抗霉素B是链霉菌产生的代谢物，是最安全的生物农药之一，对多种作物常见真菌性病害都有显著防效，且比大部分化学杀菌剂成本更低廉[9]。本试验结果表明多抗霉素B与咪酰胺、氟硅唑、溴菌腈的各种配比均表现出不同程度的增效作用，而与丙环唑仅以4 ∶ 1和2 ∶ 3，与戊唑醇仅以2 ∶ 3的配比混配时才表现出一定的增效作用，其余配比却表现出明显的拮抗作用。可见，在生产上使用合适的配比是提高防效的关键，而盲目地混配往往适得其反。此外，多抗霉素B与溴菌腈以2 ∶ 3的配比值得推荐，因为该配比除了对露水斑病菌有增效作用外，还可以发挥多抗霉素B和溴菌腈2种单剂本身对白粉病、炭疽病的特效作用，以及溴菌腈对细菌性黑斑病及藻斑病的兼防作用。

在本次复配剂室内增效配比筛选中，毒力比率大于1.2的配比有26个，其中吡唑醚菌酯和丙环唑以1 ∶ 4配比以及咪酰胺和多抗霉素B以2 ∶ 3配比时增效最明显，毒力比率接近于2.0，应用潜力较大，值得进行大田试验。

参考文献：

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