张海艳
摘要:以菘蓝种子为试材,采用培养皿发芽法,研究不同浓度NaCl处理对菘蓝种子萌发及幼苗生长的影响。结果表明,与CK相比,低浓度NaCl(≤20mmool/L)处理下菘蓝种子的发芽率、发芽指数、活力指数、发芽速度指数无显著变化,高浓度NaCl处理(≥60mmol/L)下菘蓝种子各项发芽指标均显著降低;10~20mmol/LNaCl处理能促进菘蓝幼苗生长,叶片MDA含量无显著变化,40~100mmol/LNaCl处理时幼苗生长显著受抑制,叶片MDA含量显著增多。
关键词:菘蓝;NaCl胁迫;种子发芽;幼苗生长;MDA含量
中图分类号:S567.23+9.01文献标识号:A文章编号:1001-4942(2015)04-0056-03
菘蓝(IsatisindigoticaFort.),十字花科二年生草本植物,其干燥根为常用中药板蓝根(IsatidisRadix),具有清热解毒、凉血利咽之功效[1~4],临床用量之大堪称中成药之最。目前,对菘蓝的研究大多集中在板蓝根成分组成和药性、药理作用等方面[5~7],对逆境下菘蓝种子萌发及幼苗生长方面的报道较少。
土壤盐渍化是人类目前面临的重大生态危机之一,已成为影响农业生产最重要的环境胁迫因子[8]。我国有3.47×107hm2盐碱地,占耕地面积的1/3[9]。植物不同生长阶段的耐盐性不同,种子萌发期往往是盐胁迫的敏感期。因此,研究菘蓝种子萌发期的耐盐性对其盐碱地栽培具有重要意义。本试验以菘蓝种子为试材,研究不同浓度NaCl处理对菘蓝种子萌发及幼苗生长的影响,以期为盐碱地区的菘蓝栽培及盐碱地的充分利用提供参考。
收稿日期:2014-12-23
基金项目:山东省旱地作物水分高效利用创新团队(2012);山东省特色名校建设工程课程建设项目(XYX2014035);山东省特色名校建设工程教学研究项目(XJG2013093)
1材料与方法
1.1试验材料
菘蓝种子由山东省长清马山中药材特色品牌基地提供,千粒重为5.2g。
1.2试验方法
种子先用75%乙醇灭菌5min,再用5%次氯酸钠消毒5min,最后用无菌水冲洗3~4次。20℃下无菌蒸馏水浸种24h,无菌滤纸沥干种子表面水分,置于培养皿中培养。温度与光周期为25℃光照培养8h,15℃暗培养16h。共设7个NaCl浓度处理:0(CK)、10、20、40、60、80、100mmol/L,每个处理36粒种子,重复6次。
1.3数据记录与测定
每天记录菘蓝种子的发芽数,当胚轴长度约与种子的长度相等时视为发芽[10]。第4天的种子发芽百分数为发芽势,第7天的种子发芽百分数为发芽率。发芽指数(CI)=∑(Gt/Tt),其中Gt为t天内的发芽数,Tt为对应Gt的发芽天数;活力指数(VI)=GI×苗高;发芽速度指数(GV)=∑Gi/Ti,其中i是芽期数,Gi是第i期的发芽率,Ti是发芽天数。第12天时,每个重复随机选取10株幼苗测量苗高、根长,称量10株的苗鲜重和根鲜重,并测定丙二醛(MDA)含量(采用硫代巴比妥酸法)[11]。
1.4统计分析
采用MicrosoftExcel2003软件进行数据处理及作图,用DPS7.05软件对各处理差异进行多重比较。
2结果与分析
2.1NaCl胁迫对菘蓝种子萌发的影响
由表1可以看出,不同浓度NaCl处理对菘蓝种子萌发指标的影响存在差异。与CK相比,10~40mmol/LNaCl处理下种子发芽率无显著变化,60~100mmol/LNaCl处理下发芽率分别降低了10.1%、16.2%,和14.5%,差异显著。10~100mmol/LNaCl处理下发芽势比CK降低16.0%~74.7%,差异显著。不同浓度NaCl处理对种子发芽指数、活力指数和发芽速度指数的影响较为一致,具体表现为:与CK相比,10~20mmol/LNaCl处理下无显著变化,40~100mmol/LNaCl处理下发芽指数、活力指数和发芽速度指数分别降低了26.9%~62.2%、43.7%~73.8%和28.2%~61.5%,差异显著。可见,低浓度NaCl(≤20mmol/L)处理对菘蓝种子萌发无显著抑制作用,高浓度NaCl(60~100mmol/L)处理能显著抑制菘蓝种子萌发。
2.2NaCl胁迫对菘蓝幼苗生长的影响
由表2可以看出,随着NaCl浓度的增加,菘蓝幼苗苗高、根长、苗鲜重、根鲜重和根苗比均呈先增加后减少的变化趋势,且均在20mmol/LNaCl处理下达最大。具体表现为:10mmol/LNaCl处理下苗高、根长、苗鲜重分别比CK增加了5.7%、5.9%和25.0%,差异显著,根鲜重和根苗比维持不变;20mmol/LNaCl处理下苗高、根长、苗鲜重、根鲜重和根苗比分别比CK增加了5.7%、16.6%、45.0%、66.7%和10.2%,差异显著;40mmol/LNaCl处理下苗高、根长、根鲜重分别比CK减少了20.7%、15.2%、33.3%,差异显著,苗鲜重比CK增加了10.0%,差异不显著,根苗比比CK增加了6.8%,差异显著;60~100mmol/LNaCl处理下各项指标分别比CK减少了25.0%~38.0%、41.0%~50.6%、0~10%、33.3%~66.7%和15.0%~27.2%,差异显著。
因此,低浓度NaCl(≤20mmol/L)处理能促进菘蓝幼苗的生长,以20mmol/LNaCl处理时效果最好,高浓度NaCl(60~100mmol/L)处理则抑制其幼苗生长。
2.3NaCl胁迫对菘蓝幼苗叶片MDA含量的影响
逆境诱导活性氧的形成,造成过氧化伤害。MDA是膜脂过氧化产物,其含量高低可用来反映细胞膜的损伤程度。由图1可以看出,不同浓度NaCl处理后,菘蓝幼苗叶片MDA含量的变化不同。与CK相比,10mmol/L和20mmol/LNaCl处理后叶片MDA含量无显著变化,40~100mmol/LNaCl处理后叶片MDA含量显著增加。表明,中、高度浓度NaCl处理可损伤菘蓝叶片细胞结构,加速膜脂过氧化作用,使MDA含量增多。
3结论与讨论
本研究表明,低浓度NaCl(≤20mmol/L)对菘蓝种子的发芽率、发芽指数、活力指数、发芽速度指数无显著抑制作用,但较高浓度NaCl(≥60mmol/L)对发芽指标则表现出显著抑制作用。由此可见,菘蓝种子具有一定的耐盐能力,高盐(≥60mmol/L)胁迫能抑制菘蓝种子的萌发,延长菘蓝种子的发芽时间。
此外,本试验发现,10~20mmol/LNaCl处理能促进菘蓝幼苗生长,40mmol/LNaCl处理时幼苗生长开始受抑制。这可能是由于低浓度盐能够促进植物细胞膜的渗透调节,渗透调节能力越强,越有利于吸水和对抗不良环境;此外Na+对呼吸酶有激活作用[12],进而对幼苗生长起促进作用。高盐浓度下,一方面,为平衡细胞内外渗透势,植株在细胞质中合成过多的有机小分子物质,从而减少细胞生长所需的碳源环境,抑制幼苗生长[13];另一方面,植株因为缺水导致气孔关闭,叶绿体受损,光合相关酶失活或变性,光合速率下降,光合作用的同化产物减少,同时由于盐胁迫下各种拒盐活动增强导致呼吸作用增强,因此高盐胁迫不仅扰乱了植物的光合作用,同时影响了植株的呼吸代谢,造成一系列不正常的连锁反应[14,15]。endprint