柿炭疽病化学防治药剂的初步筛选

丁向阳，徐建强，邓全恩，郗 慧，杨睿瑞

（1.河南省林业科学研究院，河南 郑州 450008；2.河南科技大学，河南 洛阳 471003；3. 中南林业科技大学，湖南 长沙 410004）

柿炭疽病化学防治药剂的初步筛选

丁向阳1，徐建强2，邓全恩3，郗 慧2，杨睿瑞2

（1.河南省林业科学研究院，河南 郑州 450008；2.河南科技大学，河南 洛阳 471003；3. 中南林业科技大学，湖南 长沙 410004）

柿炭疽病是柿生产中危害最大的一种病害，在全国柿产区普遍发生。为了筛选生产中能应用于柿炭疽病化学防治的杀菌剂，从柿炭疽病标本中分离到27株柿炭疽病菌，从中选取4株进行柿炭疽病化学防治杀菌剂的筛选试验。室内采用菌丝生长速率法测定柿炭疽病菌对7种杀菌剂的敏感性。结果表明：噻菌灵和多菌灵对柿炭疽病菌抑制效果较好，MIC均为1 µg/mL；戊唑醇和苯醚甲环唑次之，MIC为10 µg/mL；速克灵和嘧霉胺较差，在10 µg/mL时抑制率还不到50%；扑海因在5 µg/mL时表现出强烈的抑制作用，但在10 µg/mL时抑制率降低，需通过进一步的毒力测定及田间试验确认杀菌剂对柿炭疽病的防治效果。

柿；炭疽病；防治药剂；筛选

柿是我国重要的木本粮食树种，在我国面积和产量均较大，发展柿产业符合国家发展木本粮油的政策导向[1]。但柿树病害的发生也较为普遍并有加重的趋势，研究和综合防治柿病害就显得尤为重要了。柿炭疽病由哈锐炭疽菌Colleotrichum.horii引起的[2]，是危害柿树生长的最主要的病害之一，在全世界产柿国家均有发生[3]。柿炭疽病主要发生在柿树叶片、枝条、柿果和柿蒂上，不同品种及同一品种的不同部位对该病的敏感性不同[4-5]，叶片侵染症状主要表现为叶柄及叶脉部位，其正面及背面均变黑，形成黑色坏死斑，这是柿炭疽病区别于其它柿树叶部病害的显著标志；枝条上病原菌主要侵染柿树的幼梢，在生长条件适宜的情况下病斑互相融合，环绕幼枝1圈或连成一片，从而引起叶片脱落，导致枝条死亡[6]；在柿蒂上症状表现为柿蒂黑色坏死。柿炭疽病还能侵染柿果，果实感病后病斑由小变大，果实变红变软，提前脱落[7]。在柿树枝条、柿蒂及柿果上发病严重时，会有黄色的分生孢子堆溢出，形成孢子角。

炭疽病对柿树的危害严重，且生产中使用的防治药剂种类繁杂、效果不一，因此对柿炭疽病菌的药剂抑制效果筛选显得格外重要[8-9]。本文中从国内多省份广泛采集柿树炭疽病的典型标本，选择典型菌株测定对7种杀菌剂的敏感性，以期为生产中柿炭疽病的化学防治提供依据。

1 材料与方法

1.1 材 料

1.1.1 供试菌株

从样本中选取4个具有代表性的菌株：SDQZ-1、GXGCLMLL-1、HNLC-1及2SXFPTP-2，各菌株的采集地点及分离部位见表1。

1.1.2 试验药剂

试验中选定的杀菌剂包括苯并咪唑类杀菌剂噻菌灵（特可多）、多菌灵，三唑类杀菌剂戊唑醇（立克锈）、苯醚甲环唑（世高、恶醚唑），二甲酰亚胺类杀菌剂速克灵（腐霉利）、扑海因（异菌脲），苯胺基嘧啶类杀菌剂嘧霉胺（施佳乐）。上述药剂均为原药，用甲醇或丙酮配置成104μg/mL的母液备用。

1.2 方 法

1.2.1 柿炭疽病菌的分离

选取具有典型病斑的柿树叶片，用自来水冲洗干净后用吸水纸吸干；将发病部位的叶脉、枝条或柿蒂剪成3mm左右的小段，放入70%酒精30 s左右；然后放入NaClO溶液中1 min左右，用无菌水冲洗3次，用灭过菌的滤纸吸干，用消毒镊子将叶脉、枝条或柿蒂小段放入含乳酸的PSA培养基上，培养5 d后，观察菌落生长情况，选取类似炭疽病的菌落镜检，将发现炭疽病菌分生孢子的菌落进行保存，每皿保存1个菌落，为1个菌株。

1.2.2 柿炭疽病菌防治药剂的筛选

将供试菌株分别接种在不含药的PSA平板和含1、5、10 µg/mL杀菌剂的PSA平板上，每皿2个菌株，每处理2次重复，25 ℃培养4 d后，测量各处理的菌落直径，求平均值后，计算抑制率，得出药剂对炭疽病菌的最低抑制浓度（Minimum inhibitory concentration，MIC）。

抑制率＝(对照菌落直径－处理菌落直径)/(对照菌落直径－菌饼直径)×100%。

2 结果与分析

2.1 柿树炭疽病菌的菌株分离

于2013年从各地采回的柿炭疽病标本中采用组织分离法分离得到27株柿炭疽病菌，菌株编号、采集地点及分离部位信息如表1所示。

表1 2013年度分离保存的柿炭疽病菌菌株Table 1 Separated and preserved strains of anthracnose pathogens of persimmon in 2013

2.2 柿树炭疽病菌防治药剂的初步筛选

通过室内试验，7种杀菌剂对柿炭疽病菌的抑制结果如表2所示。

由表2可以看出，噻菌灵和多菌灵对炭疽病菌抑制作用较好，MIC均为1 µg/mL，而戊唑醇和苯醚甲环唑对炭疽病菌抑制效果次之，MIC为10 µg/mL；速克灵和嘧霉胺对炭疽病菌几乎无抑制作用，在10 µg/mL时抑制率还不到50%；扑海因在5 µg/mL时表现出强烈的抑制作用，但在10 µg/mL时抑制作用又降低，出现这种现象的原因有待进一步研究。

表2 柿树炭疽病菌对7种杀菌剂的敏感性Table 2 Sensitivities of anthracnose pathogens of persimmon to seven kinds of fungicides

柿树炭疽菌对7种杀菌剂的敏感性如图1所示。

综上所述，苯并咪唑类杀菌剂可以作为生产中防治炭疽病的备选药剂，其它几类杀菌剂对炭疽病菌有无其它作用方式需进一步研究。

3 讨论与小结

（1）柿炭疽病是目前为害最严重的柿病害之一，虽然通过搞好果园卫生、加强栽培管理、苗木检疫等方法可在一定程度上控制炭疽病的危害，但该病在我国主产区生产中仍大量爆发，炭疽病又是多循环病害，因此化学药剂在炭疽病的防治中具有非常重要的作用[7]。

图1 柿树炭疽菌对7种杀菌剂的敏感性Fig. 1 Sensitivities of anthracnose pathogens of persimmon to seven kinds of fungicides

（2）在本研究中，除了选取染病柿树叶脉作为分离材料外，还尝试了从其它组织分离的方法，如直接挑取黄色的分生孢子角，放入加过乳酸的PSA上，也分离到了菌株，而且该方法操作简便，步骤简单，操作迅速，需时很短。但此法要求必须具有典型分生孢子角的材料。从柿树枝条及柿蒂上分离炭疽病菌时，由于柿树枝条及柿蒂较硬，分离成功率低，故不建议采用此法。但由于柿树枝条及柿蒂同柿树叶片相比，保存时间长，故在分离标本较多时可先分离叶脉上的，后分离枝条及柿蒂上的。

染病柿树叶脉仍是分离炭疽病菌的最佳材料，但标本保存时间不宜过长，应尽快分离；对于染病柿蒂或枝干标本，若不能及时分离，可先在室内晾干，然后保存于阴凉处防止受潮，可保存一定时间后再行分离。

（3）本试验中结果表明，噻菌灵和多菌灵对炭疽病菌抑制率较好，MIC均为1 µg/mL，可以作为生产中防治炭疽病的主要备选药剂。

[1]谭晓风,马履一,李芳东,等.我国木本粮油产业发展战略研究[J].经济林研究,2012,30(1)：1－5.

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[3]李明江.胶孢炭疽菌侵染柿树的细胞学研究及CGTA1的基因克隆[D].杭州：浙江大学,2007.

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[5]Geffroy V, Sévignac. Inheritance of partial resistance against Colletotrichum lindemuthianum in Phaseolus vulgaris and colocalization of quantitative trait loci with genes involved in speci fi c resistance[J]. Mol Plant Microbe Interact, 2000, 13(3)：287－296.

[6]张敬泽,徐 同.柿树炭疽病菌在越冬枝条上的菌态及数量[J].植物保护学报,2003,30(4)：438－439.

[7]屈伟良.柿炭疽病发生规律及综合防治技术研究[J].陕西林业科技 ,2009,67(4)：63－ 64.

[8]李石磊,刘君昂,赵 莹,等.6种杀菌剂对油茶主要病害的室内毒力测定[J].中南林业科技大学学报,2013,33(9)：60－62.

[9]宋光桃,周国英.油茶炭疽病拮抗放线菌的筛选及其抑菌谱研究[J].中南林业科技大学学报,2010,30(2)：75－78.

Preliminary selection of fungicides to anthracnose pathogens in persimmon

DING Xiang-yang1, XU Jian-qiang2, DENG Quan-en3, CHI Hui2, YANG Rui-rui2
(1.Henan Academy of Forestry, Zhengzhou 450008, Henan, China; 2. Henan University of Science and Technology,Luoyang 471003, Henan, China; 3. Central South University of Forestry & Technology, Changsha 410004, Hunan, China)

Anthracnose is one of the most harmful diseases on persimmon, which almost happens all over the areas producing persimmon in China. To select fungicides that could be applied in chemical controlling of the disease in production, 27 strains of persimmon anthracnose were separated from anthracnose pathogen samples, and four strains of pathogens of persimmon anthracnose were selected as materials of the fungicides selection experiment to anthracnose pathogens in persimmon. The sensitivities of persimmon anthracnose pathogens to seven fungicides were determined by using the method of mycelium growth rate. The results showed that： Probenazole and Carbendazim had better effects on inhibiting anthracnose pathogens of persimmon, and MIC was 1 μg/mL; Tebuconazole and Difenoconazole following, and MIC was 10 μg/mL; The effect of Procymidone and Pyrimethanil are worse, and inhibition rate was less than 50% when MIC was 10 μg/mL; When MIC was 5 μg/mL, Iprodione showed a strong inhibition effect, while the inhibition rate was decreased when MIC was 10 μg/mL. To con firm the effect of fungicides, further Virulence test and field trials were needed.

persimmon; anthracnose; fungicides; selection

S665.2

A

1003—8981(2015)04—0148—04

10.14067/j.cnki.1003-8981.2015.04.029

2014-12-10

公益性行业（农业）科研专项（201203047）。

丁向阳，研究员，博士。E-mail：dxydd001@163.com

丁向阳,徐建强,邓全恩,等.柿炭疽病化学防治药剂的初步筛选[J].经济林研究,2015,33(4)：148－151, 156.

[本文编校：闻 丽]