杜仲叶萃取物对精炼菜籽油抗氧化活性的研究

郑国栋 谢小俊 曾茹佚 黎冬明

（江西农业大学江西省天然产物与功能食品重点实验室，南昌 330045）

杜仲叶萃取物对精炼菜籽油抗氧化活性的研究

郑国栋 谢小俊 曾茹佚 黎冬明

（江西农业大学江西省天然产物与功能食品重点实验室，南昌 330045）

研究杜仲叶萃取物对精炼菜籽油抗氧化的影响，采用乙醇－超声波提取法提取杜仲叶粗提物，分别用氯仿、正丁醇进行萃取，收集各萃取相。分离得到萃取物添加到精炼菜籽油中，在25℃下测定不同萃取物对油脂过氧化值和酸价的影响。结果表明，0.04%正丁醇萃取物有很好抗氧化作用，其抗氧化效果与VE、BHA相当，并且和VE组合有明显协同作用。正丁醇萃取物对精炼菜籽油的抗氧化效果最好，可作为天然抗氧化剂。

杜仲叶萃取物 精炼菜籽油 过氧化值 酸价 抗氧化

食品工业为延长食品货架期，需要添加抗氧化剂，主要是人工合成抗氧化剂，由于人工合成抗氧化剂用量不当或本身对食品安全存在危害，研究天然植物抗氧化剂替代品成为食品工业的发展趋势。油脂是易氧化的食品，通常用人工合成抗氧化剂如BHT、BHA、TBHQ等，而研究表明这些抗氧化剂长期使用会对人类健康造成一定伤害，目前美国已禁止使用 BHT，日本在食用油中已禁止添加 BHT、BHA、TBHQ。因此，天然无毒抗氧化剂的研究开发越来越受到人们重视，许多植物萃取物对油脂有一定的抗氧化作用，如总皂苷［1］、黄酮［2－3］有较好效果。

杜仲是我国特有的树种，分布在我国中南部地区。杜仲皮作为我国传统中药材，广泛用于护肝、强筋、防止流产等［4］。杜仲叶与杜仲皮有相似的功能成分，如京尼平苷酸、松脂醇二葡萄糖苷、绿原酸等［5］，在日本作为功能茶广为流传［6］。杜仲叶萃取物有明显降糖和降脂［7］、降压［8］等作用。研究显示杜仲还能促进高脂血症大鼠的脂肪酸氧化等功效［9］。

我国杜仲叶产量大来源充足，其萃取物含有多种活性成分，包括绿原酸、多酚类、黄酮等都有明显抗氧化作用。试验将杜仲叶萃取物添加到精炼菜籽油中，研究其不同萃取物、不同浓度以及与VE组合对油脂氧化的影响。本研究的开展为杜仲叶综合开发和利用提供试验基础，也为天然植物萃取物对油脂抗氧化作用提供参考。

1 材料与方法

1.1 材料和试剂

杜仲叶：江西银河杜仲有限公司；未含任何添加剂的精炼菜籽油：江西绿源油脂实业有限公司。

没食子酸标准品、芦丁标准品、绿原酸标准品：中国药品生物制品检定所；其他试剂均为分析纯。

1.2 试验方法

1.2.1 杜仲叶萃取物的制备及成分测定

取一定量干燥杜仲叶粉碎过40目筛，用70%乙醇浸泡杜仲粉末（用量1 kg，料液比1∶15，m／V），12 h后，采用超声辅助提取，对提取液进行过滤，收集滤液，50℃真空浓缩制得浓缩液，用氯仿、正丁醇对浓缩液进行萃取，得到萃取物进行真空冷冻干燥，所得干燥物采用 GB／T 8313—2008［10］，GB／T 20574—2006［11］，紫外分光光度法［12］分别对不同萃取物中的多酚、黄酮和绿原酸进行测定，测定结果见表1。

表1 不同萃取相多酚、黄酮、绿原酸含量的比较

1.2.2 不同萃取相萃取物对油脂的抗氧化作用

取精炼菜籽油50 g放入锥形瓶内，分别加入不同抗氧化剂（每组做2个平行，空白组不加抗氧化剂），放入25℃恒温箱中。每隔5 d测其过氧化值（POV）和酸价（AV）。过氧化值和酸价均采用GB／T 5009.37—2003［13］进行测定。

1.2.3 不同浓度正丁醇相萃取物的抗氧化效果

取精炼菜籽油50 g放入锥形瓶内，分别添加0.01%～0.08%的正丁醇相研究不同浓度正丁醇相对油脂的抗氧化效果。

1.2.4 正丁醇相与VE的协同抗氧化效果

选取VE为协同剂进行油脂抗氧化效果的研究，并与食品工业中常用的油脂抗氧剂BHT的抗氧化效果进行对比。

2 结果与分析

2.1 不同萃取相萃取物的抗氧化效果

不同萃取相的杜仲叶萃取物对POV变化的影响如图1所示。随着时间延长，精炼菜籽油的POV呈上升趋势，空白组的POV在30 d内迅速增加，之后趋于平缓，而不同萃取相的POV均明显减少，正丁醇相效果尤为明显，说明正丁醇相抗油脂氧化作用较强。图2显示了不同萃取相的杜仲叶萃取物对精炼菜籽油AV变化的影响。水相和正丁醇相具有降低菜籽油AV值的效果。从表1可以看出正丁醇相和水相萃取物中多酚、黄酮和绿原酸含量较高，其中正丁醇相萃取物中多酚和黄酮高于水相萃取物。有关研究表明植物多酚类［14－15］和黄酮类［2－3］对油脂有较强抗氧化作用，所以可以推断出正丁醇相萃取物抗氧化作用主要是由于多酚和黄酮起作用的。

图1 不同萃取相对精炼菜籽油POV变化的影响

图2 不同萃取相对精炼菜籽油AV变化的影响

2.2 不同浓度正丁醇相萃取物的抗氧化效果

测得添加0.01%～0.08%的正丁醇相萃取物的精炼菜籽油中POV值和AV的变化见图3和图4。由图3可知，随着试验时间的延长，菜籽油的POV呈上升趋势，但正丁醇相对菜籽油POV值有抑制作用，其抑制效果随着萃取物添加量的增加而增加，0.04%和0.08%的正丁醇萃取物的效果相当，两者没有明显差异，说明0.04%的添加量较为合适。从图4可知，AV的变化也与POV相似，0.04%以上正丁醇萃取物有较好抑制效果。

图3 不同浓度正丁醇相对精炼菜籽油POV变化的影响

图4 不同浓度正丁醇相对精炼菜籽油AV变化的影响

2.3 正丁醇相萃取物与VE协同的抗氧化效果

正丁醇相与VE协同的抗氧化效果如图5所示。0.04%正丁醇相萃取物对精炼菜籽油的抗氧化效果与相同浓度的VE以及0.02%BHT（油脂中允许最大添加量）的抗氧化效果相当，正丁醇相萃取物与VE具有很好的协同抗氧化作用其POV值只有空白组的25%，有明显增效作用。在AV方面，如图6所示，正丁醇相萃取物和VE组合也有很好的协同增效作用。

图5 正丁醇相与VE组合对精炼菜籽油POV变化的影响

图6 正丁醇相与VE组合对精炼菜籽油AV变化的影响

3 结论

3.1 杜仲叶的萃取物对精炼菜籽油均有抗氧化效果，其中正丁醇相＞水相＞氯仿相，表明正丁醇萃取物有较好抗氧化效果。而抗氧化作用主要物质可能与多酚和黄酮类化合物有关。

3.2 0.01%～0.04%杜仲叶正丁醇萃取物的抗氧化效果随着添加浓度增加而增强，超过0.04%无浓度效应关系。

3.3 杜仲叶正丁醇萃取物的抗氧化效果与VE和BHT效果相当，和VE组合有很好的协同增效作用，50 d后POV值只有对照组的25%，表明有很强的抗氧化效果效果。

［1］曾超珍，刘志祥，李军龙.大孔树脂纯化枸骨叶总皂苷及其油脂抗氧化活性研究［J］.中国粮油学报，2011，26（8）：45－49

［2］李秀信，王荣花，李萍.紫苏黄酮对食用油脂抗氧化作用的研究［J］.中国粮油学报，2007，22（2）：63－65

［3］张蕾，乔旭光.荷叶黄酮对油脂抗氧化作用的研究［J］.现代食品科技，2009，25（10）：1180－1182

［4］中国卫生部药典委员会编.《中国药典》2010年版［M］.北京，中国医药科学出版社，290

［5］Kim HY，Moon BH，Lee HJ，et al.Flavonol glycosides from the leaves ofEucommia ulmoidesO.with glycation inhibitory activity［J］.Journal of Ethnopharmcology，2004，93：227－230

［6］Nakazawa Y.Functional，healthy properties of Du－zhong tea and their utilization［M］.Food Industry，1997，40：P6－15

［7］Choi MS，Jung UJ，Kim HJ，et al.Du－zhong（Eucommia ulmoides Oliver）leaf extract mediates hypolipidemic action in hamsters fed a high－fat diet［J］.The American Journal of Chinese Medicine，2008，36：81－93

［8］Luo L，Wu W，Zhou Y，et al.Antihypertensive effect of Eucommia ulmoides Oliv.extracts in spontaneously hypertensive rats［J］.Journal of Ethnopharmacol，2010，129：238－243

［9］Kobayashi Y，Hiroi T，Araki M，at al.Facilitative effects of Eucommia ulmoides on fatty acid oxidation in hypertriglyceridaemic rats［J］.Journal of the Science of Food and Agriculture，2012，92：358－365

［10］GB／T 8313—2008，茶叶中茶多酚和儿茶素类含量的检测方法［S］

［11］GB／T 20574—2006，蜂胶中总黄酮含量的测定方法分光光度比色法［S］

［12］刘丹赤，杨建华，李鹏.牛蒡叶中绿原酸提取工艺的研究［J］.江苏农业科学，2009，37（4）：305－306

［13］GB／T 5009.37—2003，食用植物油卫生标准的分析方法［S］

［14］古绍彬，吴影，董红敏，等.苹果多酚抗氧化作用及其清除自由基能力的研究［J］.中国粮油学报，2013，28（4）：58－61

［15］曾娟，李会娜.樟树叶多酚对油脂的抗氧化活性研究［J］.现代食品科技，2012，28（8）：949－951，968.

Antioxidant Activities of the Du－zhong（Eucommia ulmoides Oliver）Leaves Extraction on Refined Rapeseed Oil

Zheng Guodong Xie Xiaojun Zeng Ruyi Li Dongming

（Jiangxi Key Laboratory of Natural Product and Functional Food，Jiangxi Agricultural University，Nanchang 330045）

To study antioxidant effects of Du－zhong（Eucommia ulmoidesOliver）leaves extraction on refined rapeseed oil.Methods：Using ethanol－ultrasonic extraction method，Du－zhong leaves were extracted，the extractions were isolated by chloroform，n－butanol alcohol，respectively.The isolated extractions were added in refined rapeseed oil，measured effects of extractions on the peroxide value（POV）and acid value（AV）at temperature of 25℃.The n－butyl alcohol extraction has best antioxidant effect on refined rapeseed oil.0.04%n－butyl alcohol extract had good antioxidant effect，the antioxidant effects is equal to VE and BHA，and had obvious synergy and VE combination.Conclusion：These results showed that n－butyl alcohol extract of Du－zhong leaves has very good antioxidant effect，and can be used as natural antioxidants.

Du－zhong（Eucommia ulmoidesOliver）leaves extraction，refined rapeseed oil，peroxidation value，acid value，antioxidant

TS221

A

1003－0174（2015）04－0076－04

863计划（2013BDA10B04）

2013－12－31

郑国栋，男，1969年出生，博士，副教授，天然产物提取、功能食品

黎冬明，男，1978年出生，讲师，粮油加工