GC-MS外标法分析椰子果肉中的脂肪酸含量

耿薇，郑敏燕，魏永生，张君才

（咸阳师范学院化学与化工学院，陕西咸阳712000）

GC-MS外标法分析椰子果肉中的脂肪酸含量

耿薇，郑敏燕，魏永生，张君才

（咸阳师范学院化学与化工学院，陕西咸阳712000）

通过气相色谱-质谱联用（GC-MS）测定椰子果肉中的脂肪酸含量，用外标法进行定量分析。椰子果肉脂肪酸种类丰富，选取常见的4种脂肪酸，在椰子果肉中的含量：棕榈酸＞油酸＞硬脂酸，亚油酸未检出。相对标准偏差RSD（n=5）在2.03%～10.25%之间，样品回收率测定在77.0%～110.0%之间。

外标法；气质联用；椰子果肉；脂肪酸

椰子（Cocosnucifera L.）是棕榈科植物椰子树的果实，为古老的栽培作物，中国种植椰子主要集中分布于海南省。椰子的营养价值很高，中医认为，椰肉味甘，性平，具有补益脾胃、杀虫消疳的功效，椰汁及椰肉中含有蛋白质、糖类、油脂类、维生素类以及钙、磷、铁等微量元素及矿物质，是药食两用的佳品，脂肪酸就是其中之一。脂肪酸是人体不可缺少的营养成分之一，与健康密切相关[1-3]。已有报道用气相色谱-质谱联用（GC-MS）的峰面积归一法分析椰子果肉中的脂肪酸含量[3-4]，本文通过GC-MS的外标法测定椰子果肉中的脂肪酸含量。

1 材料与方法

1.1 仪器和试剂

GCMS-QP2010气相色谱-质谱联用仪：日本岛津SHIMADZU制作所；RE-52AA旋转蒸发器：上海嘉鹏科技有限公司；10μL微量进样器：澳大利亚SGE；SartoriusCP124S电子天平：Max120 g，d=0.1mg；20μL～200μL移液器：Thermo Finnpipette；SB4200DTD超声波清洗机：宁波新芝生物科技股份有限公司；SHB-IIIA循环水式多用真空泵：郑州长城科工贸有限公司；DF-101S集热式恒温加热磁力搅拌器：河南省予华仪器有限公司；HR7625飞利浦食品加工机；101型电热鼓风干燥箱：北京科伟永兴仪器有限公司；标准检验筛（40目，孔径0.45mm）；索氏提取器。

椰子果肉；硫酸；乙醚；棕榈酸（分析纯）：西安化学试剂厂；硬脂酸（分析纯）：天津化学试剂厂；油酸（分析纯）：天津化学试剂厂；亚油酸（99%）：百灵威科技有限公司。

所用试剂均为分析纯，水为二次蒸馏水。

1.2 分析条件

气相色谱条件：J&W DB–WAX弹性石英毛细管色谱柱（30m×0.25mm×0.25μm）；载气为高纯氦He，纯度≥99.999%；柱温：130～240。柱初温130℃，保持1min，以20℃/min升温至230℃，保持5min，再以20℃/min升温至240℃，保持6.5min，共18.00min。进样口温度250℃；柱前压84.6 kPa，柱流量1.00mL/min，分流比1∶30；用微量进样器进样1.0μL。

质谱条件：EI离子源，离子源温度200℃，GC-MS接口温度200℃，电子能量70 eV，电子倍增器电压0.97 kV[3]，质量扫描范围29m/z～450m/z，溶剂峰切除时间1.6min，质谱检测起测时间1.7min。

1.3 椰子油的提取

将椰子果肉烘干，粉碎，过40目筛。称取一定质量的样品，移入滤纸筒内，以乙醚作溶剂，采用索式提取器，30℃恒温水浴回流3 h。倒出上清液，抽滤，用旋转蒸发仪蒸去乙醚后，得到椰子油样品。

1.4 脂肪酸的甲酯化

准确称量脂肪酸或样品于25mL比色管中，准确加入1%硫酸-甲醇溶液2.0mL，于70℃水浴加热60min。再加正己烷定容至10mL，振荡，加水至25mL，振荡，静置24 h，吸取上层脂肪酸甲酯，进行GC-MS分析。

1.5 脂肪酸标准溶液的配制

选取常见的4种脂肪酸：棕榈酸，硬脂酸，油酸，亚油酸。准确称量4种脂肪酸的标准系列（7份）于25mL比色管中，按1.4配制成标准溶液，进行GC-MS分析。

2 结果与分析

2.1 4种脂肪酸的标准曲线

图1为4种脂肪酸标准品的GC-MS总离子流图，对GC-MS谱图进行鉴定和定量分析，应用SHIMADZUGCMS solution Release2.10专业分析软件。

图1 4种脂肪酸标准品的GC-MS总离子流图Fig.1 The TIC of GC-MS of the four standard substance of fatty acids

成分鉴定根据GC-MS检测所得到的质谱信息，用质谱图计算机检索数据库NIST 147数据库进行检索，通过与标准谱图对照以及质谱碎片对峰的分析，确定每一个组分的化学结构[3]。采用计算机检索与人工解析各峰相应的质谱图，1-棕榈酸，2-硬脂酸，3-油酸，4-亚油酸。

峰面积为纵坐标，质量为横坐标，绘制四种脂肪酸的标准曲线，得到标准曲线方程及相关系数见表1。

2.2 样品分析结果

图2为椰子果肉中脂肪酸分析的GC-MS总离子流图，通过与标准谱图对照以及质谱碎片对峰的分析，确定1-棕榈酸，2-硬脂酸，3-油酸。

表1 4种脂肪酸的标准曲线方程及相关系数Table1 The calibration curve equation and correlation coefficent of the four fatty acids

图2 椰子果肉中脂肪酸分析的GC-MS总离子流图Fig.2 The TIC of GC-MS of fatty acids from the coconut flesh

根据峰面积及表1的标准曲线方程得到椰子果肉中四种脂肪酸的含量见表2，棕榈酸＞油酸＞硬脂酸，亚油酸未检出。

表2 椰子果肉中4种脂肪酸的含量Table2 The content of four fatty acids from the coconut flesh mg/g

2.3 回收率与精密度

准确称取样品（5份）于25mL比色管中，分别都加入棕榈酸、硬脂酸、油酸和亚油酸标准品，按1.4配制溶液，进行GC-MS分析，得到样品的回收率与精密度见表3。

表3 四种脂肪酸的回收率与精密度Table3 The recovery and precision of four fatty acids

由表3可知，相对标准偏差RSD（n=5）在2.03%～10.25%之间，样品回收率测定在77.0%～110.0%之间。

3 结论

GC-MS外标法分析椰子果肉中的脂肪酸含量，是绝对定量，需要标准样品，做标准曲线，与GC-MS的峰面积归一法相比，准确度较高。

[1]吴惠勤,黄晓兰,林晓珊,等.脂肪酸的色谱保留时间规律与质谱特征研究及其在食品分析中的应用[J].分析化学,2007,35(7)：998-1003

[2]魏永生,郑敏燕,耿薇,等.常用动、植物食用油中脂肪酸组成的分析[J].食品科学,2012,33(16)：188-193

[3]耿薇.新鲜椰子果肉脂肪酸成分的GC-MS分析[J].广东化工, 2010,37(1)：122-123

[4] 杨春英,刘学铭,陈智毅,等.15种食用植物油脂肪酸的气相色谱-质谱分析[J].食品科学,2013,34(6)：211-214

Fatty Acid Analysis of Coconut Flesh by GC-MS External Standard Method

GENG Wei，ZHENG Min-yan，WEI Yong-sheng，ZHANG Jun-cai
（College of Chemistry and Chemical Engineering，Xianyang Normal University，Xianyang712000，Shaanxi，China）

The fatty acid in coconut flesh were analyzed by GC-MS，using the external standard method to analyze quantitatively.There are different kinds of fatty acid in coconut flesh.The content of the four fatty acids in coconut flesh：Palmitic acid＞oleic acid＞stearic acid，Linoleic acid was not checked out.The RSD of results was between 2.03%and 10.25%.The recovery rate of sample was from 77.0%to110.0%.

external standard method；GC-MS；coconut flesh；fatty acid

10.3969/j.issn.1005-6521.2015.06.025

2014-01-10

咸阳师范学院专项科研基金项目（14XSYK017）

耿薇（1982—），女（汉），工程师，硕士，主要从事分析测试方面的研究工作。