低氧诱导因子-1α与卵巢上皮癌临床病理关系的Meta分析

孙彩霞，景绍武，王 军，*，许英杰

（1. 河 北省唐山市丰南区中医院妇产科，河北 唐山 063300；2. 河 北医科大学第四医院放疗科，河北 石家庄 050011；3. 河 北大学附属医院眼科，河北 保定 071000）

低氧诱导因子-1α与卵巢上皮癌临床病理关系的Meta分析

孙彩霞1，景绍武2，王 军2，*，许英杰3

（1. 河 北省唐山市丰南区中医院妇产科，河北 唐山 063300；2. 河 北医科大学第四医院放疗科，河北 石家庄 050011；3. 河 北大学附属医院眼科，河北 保定 071000）

卵巢上皮癌是女性常见的恶性肿瘤，难以早期发现，临床预后差。如何提高其早期诊断率及改善预后已成为研究的重点和难点。已证实实体肿瘤的生长和转移依赖于肿瘤细胞对低氧环境的适应，在这一过程中低氧诱导因子-1α（hypoxia inducible factor-1α， HIF-1α） 起中枢纽带作用［1］。有多项研究分析了HIF-1α 蛋白在卵巢上皮癌组织中的表达及其与卵巢上皮癌临床病理的关系，但结果报道不一［2-4］，目前尚无循证医学证据。本研究通过检索相关文献，运用Meta分析探讨了HIF-1α蛋白在卵巢上皮癌组织中的表达及其与患者年龄、病理分级等的关联，旨在明确HIF-1α与卵巢上皮癌的关系，为寻找新的治疗方法提供参考和思路。

1 材料与方法

1.1 文献来源

通过计算机检索从建库至2014-03-10中国学术期刊全文数据库、中国生物医学文献数据库等国内数据库收录的文献，使用的关键词为卵巢上皮癌和HIF-1α 或低氧诱导因子-1α，同时以ovarian epithelial carcinoma、HIF-1α或hypoxia inducible factor-1α为英文关键词，从Cochrane Library、EMbase、Pubmed等外文数据库检索相关文献，随后对检索到的文献通过阅读摘要和全文进行人工筛选。最后一次检索日期为2014-03-10。

1.2 纳入与剔除标准

①国内文献须发表于核心期刊（被2013年版《中国科技核心期刊目录》收录的期刊），国外文献采用英文全文发表，剔除仅有摘要的文献；②HIF-1α蛋白检测采用免疫组化法，检测物为术后组织标本，剔除免疫印迹法或检测物为血浆；③临床分期采用国际妇产科联盟（FIGO）分期标准；④包含统计需要的原始数据；⑤统计方法应用恰当，数据可靠，结果表达明确，有或可计算出优势比（odds ratio， OR）值及相应的95%可信区间（confidence interval，CI）。

1.3 质量评估

对各独立研究从以下几方面进行质量评估，以考察各个研究是否存在偏倚及偏倚的影响程度：①研究对象纳入标准及其基本构成是否明确；②试验设计是否科学；③统计方法运用是否恰当；④是否为病例对照研究；⑤是否就本研究存在的偏倚进行了讨论。以上5项，每满足一项为1分，总分≥3者，视为质量可靠。由2名评价员（孙彩霞和景绍武）根据统一的质量标准独立进行评估，提取文献数据，而后交叉核对，如遇分歧通过讨论解决或由第3位研究者（王军）协助解决。

1.4 统计学方法

采用Cochrane协作网提供的STATA 11.0统计软件进行Meta分析。计算OR及95%CI作为效应量表示结果。应用χ2检验对各研究结果进行异质性检验（以α=0.05为检验水平）。若各研究间无异质性即P＞0.05，采用固定效应模型进行效应量合并，反之则采用随机效应模型。进行合并效应值的显著性检验采用z检验。剔除文献中大样本研究进行敏感性分析，重新估计效应量，并与排除前的效应量进行比较。应用Begg test绘制漏斗图，并进行线性回归模型（Egger’s z 检验，α=0.05为检验水准）分析，检验倒漏斗图的对称性来识别纳入文献是否存在发表偏倚。

2 结 果

2.1 检索结果及质量评价

初检出文献81篇，通过阅读摘要，剔除非核心期刊文献28篇，再剔除研究对象为卵巢上皮癌细胞或移植瘤模型35篇。进一步阅读全文，剔除综述性文献5篇、重复发表文献2篇、缺乏原始数据文献5篇，最终仅6篇文献纳入本次Meta分析［5-10］，质量评估均为4分，见表1。

2.2 纳入文献的基本数据

入选文献中共257例患者，均为国内病例资料。HIF-1α阳性表达率介于41.9%～90.0%之间。患者病理类型包括浆液性囊腺癌、黏液性囊腺癌、子宫内膜样癌、透明细胞癌4种类型，研究涵盖了年龄、病理类型、淋巴结转移等多个方面，详细资料详见表1。

2.3 HIF-1α在卵巢上皮癌中的表达

6篇文献均比较了HIF-1α蛋白在卵巢上皮癌组织和正常组织中的表达情况，两组间有统计学异质性（P= 0.046），故采用随机效应模型进行效应量合并。结果显示，两组间差异有统计学意义（OR=0.036， 95%CI： 0.010～0.135，P=0.000），HIF-1α在卵巢上皮癌组织中的总体阳性表达率为72.4%（186/257），较正常组织明显增强，Meta分析森林图见图1。

2.4 HIF-1α与卵巢上皮癌各临床病理特征的关系

2.4.1 HIF-1α与淋巴结转移共纳入3篇文献，其中淋巴结转移阴性患者共60例，淋巴结转移阳性患者共83例，经比较两组间无统计学异质性（P=0.760），故采用固定效应模型。结果显示HIF-1α与卵巢上皮癌淋巴结转移存在明显相关（OR=0.080，95%CI：0.029～0.220， P=0.000），提示HIF-1α表达可促进淋巴结转移， Meta分析森林图见图2。

2.4.2 HIF-1α与临床分期6项研究均分析了HIF-1α与卵巢上皮癌临床分期的关系，6项研究中I+II期患者共97例，III+IV期共160例，两组之间无统计学异质性（P=0.566），故采用固定效应模型。结果显示HIF-1α与卵巢上皮癌临床分期存在明显相关（OR=0.258， 95%CI：0.136～0.490，P=0.000），HIF-1α阳性表达患者临床分期偏晚，Meta分析森林图见图3。

2.4.3 HIF-1α与年龄、病理类型及病理分级根据有无统计学异质性，选择相应的效应模型，结果显示HIF-1α与患者年龄、病理类型及病理分级均无明显相关（P均＞0.05），见表2。

2.5 敏感性分析

6项研究纳入病例数均较少，其中文献［5］病例数为62，所占权重最大。在6篇有关HIF-1α蛋白在卵巢上皮癌表达的文献中剔除1篇［5］大样本文献后合并OR为0.046，95%CI：0.022～0.099，P=0.000，与剔除前基本一致。在3篇有关HIF-1α与卵巢上皮癌患者年龄关系研究的文献中剔除1篇［5］大样本文献后合并OR为2.155，95%CI：0.664～6.127，P=0.136，与剔除前基本一致。在4篇有关HIF-1α与病理类型关系研究的文献中剔除1篇［5］大样本文献后合并OR为1.320，95%CI：0.512～3.405，P=0.565，与剔除前基本一致。在6篇有关HIF-1α与病理分级关系的文献中剔除1篇［5］大样本文献后合并OR为0.595，95%CI：0.265～1262，P= 0.078，与剔除前基本一致。在3篇有关HIF-1α与淋巴结转移关系的文献中剔除1篇［5］大样本文献后合并OR为0.080， 95% CI：0.015～0.412，P=0.003，与剔除前基本一致。在6篇有关HIF-1α与临床分期关系的文献中剔除1篇［5］大样本文献后合并OR为0.229，95%CI： 0.102～0.514， P=0.000，与剔除前基本一致。

2.6 发表偏倚分析

对纳入文献进行漏斗图分析，通过Egger’s z 检验来分析漏斗图对称性，如表3显示所引有关文献均无发表偏倚存在（P均＞0.05）。

3 讨 论

肿瘤体积大于1 mm3时，自身的血液供应就不能满足其快速生长的需要，肿瘤内部处于低氧的环境中［11］。HIF-1α是调节肿瘤细胞适应低氧的核心转录因子，在肿瘤的能量代谢、血管形成、侵袭转移等方面发挥重要作用［12］。近年来已在人体多种恶性肿瘤中检测到HIF-1α的表达，而在正常组织中HIF-1α不表 达［13］。进一步研究发现，用小分子物质抑制HIF-1α的表达后，肿瘤血管的形成能力明显减弱，从而实现抑制肿瘤的生长［14］。因此，HIF-1α有可能成为治疗恶性肿瘤的有效分子靶点。

卵巢癌中以上皮癌最为多见，占卵巢恶性肿瘤的80%～90%。由于其深居盆腔，目前还缺乏有效的早期诊断手段，临床上患者就诊时多已属中晚期，预后较差［15］。提高卵巢上皮癌患者的早期诊断率及改善预后成为亟待解决的问题。检索国内外相关文献，HIF-1α在卵巢上皮癌中的表达及其与临床病理特征关系的研究尚缺乏大样本临床病理资料，且结果不尽一致。根据本研究中纳入与剔除标准，仅有6篇国内文献纳入本次Meta分析。从表1中可以看出，各个研究得分均为4分，说明质量较高。HIF-1α在卵巢上皮癌中的阳性率介于41.9%～90.0%之间，并且研究包括了病理类型、淋巴结转移等多个方面，能提供较为全面的数据来分析HIF-1α与卵巢上皮癌各临床病理的关系。

纳入的6项研究共包括257例卵巢上皮癌术后患者，HIF-1α总体阳性率为72.4%，结果显示HIF-1α在卵巢上皮癌组织中的阳性表达率显著升高（P＜0.05），说明HIF-1α蛋白高表达增加了卵巢上皮癌的发病风险。通过临床病理因素分层分析后发现，HIF-1α与淋巴结转移、临床分期明显有关（P均＜0.05），HIF-1α高表达可促进卵巢上皮癌患者出现淋巴结转移，临床分期偏晚，而HIF-1α与年龄、病理类型及病理分级均无明显相关（P均＞0.05）。HIF-1α可以作为淋巴结转移或临床分期的判断指标。在分析HIF-1α表达及其与卵巢上皮癌各临床病理的关系中分别剔除大样本研究后发现，剔除后所得结果与之前结果基本一致，从而进一步增加了结果的可靠性。

考虑到原始文献的发表偏倚也有可能影响结果的可靠性，本研究对纳入本次Meta分析的文献有无偏倚也进行了统计分析。通过Egger分析各个倒漏斗图可知，本次纳入的文献偏倚性较小（P均＞0.05），见表3，说明潜在的偏倚对最终结论无实质性影响，从而进一步增加了结果的可靠性。然而本次Meta分析还存在着源自发表文献的局限性，如本研究采纳的文献均为公开发表的，文种仅限定为中文，而尚未公开发表文献及可能存在的文种偏倚也可能影响本次Meta分析的结果。尽管纳入的6项研究均采用免疫组化法来检测HIF-1α蛋白的表达，但抗体的生产厂家、稀释浓度、判定标准并不完全一致，也有可能影响本次Meta 分析的结果。此外，由于纳入研究缺少卵巢上皮癌患者生存率的原始数据，有关HIF-1α与卵巢上皮癌预后的关系尚需进一步随访报道。

综上所述，本研究结果提示HIF-1α蛋白高表达增加了卵巢上皮癌的发病风险。HIF-1α可以作为卵巢上皮癌患者淋巴结转移及临床分期的判断指标，值得进一步深入研究。

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Relationship between hypoxia inducible factor -1α and clinicopathology of epithelial ovarian cancer：Meta analysis

SUN Caixia1，JING Shaowu2，WANG Jun2，*，XU Yingjie3
（1. Department of Gynecology， Traditional Chinese Medicine Hospital of Fengnan District， Tangshan 063300； 2. Department of Radiation Oncology， Fourth Hospital of Hebei Medical University，Shijiazhuang 050011； 3. Department of Ophthalmology， Affiliated Hospital of Hebei University， Baoding 071000， Hebei， China）

目的： 探讨低氧诱导因子-1α（HIF-1α）在卵巢上皮癌中的表达及其与卵巢上皮癌各临床病理指标的关系，明确HIF-1α在卵巢上皮癌恶性生物学行为中的作用。方法：计算机检索Cochrane Library、EMbase、Pubmed数据库以及中国学术期刊全文数据库、中国生物医学文献数据库中有关HIF-1α与卵巢上皮癌研究的文献，采用STATA 11.0软件包分析HIF-1α蛋白表达与患者年龄、病理类型、病理分级、淋巴结转移、临床分期之间的关系，采用合并优势比（OR）及95%可信区间（CI）进行分析。结果：最终入选6篇文献共257例卵巢上皮癌患者，结果显示HIF-1α总体阳性表达率为72.4%（186/257），较正常组织表达明显增加（OR= 0.036， 95%CI：0.010～0.135，P=0.000）。HIF-1α与淋巴结转移、临床分期相关（OR=0.080，95%CI：0.029～0.220， P=0.000； OR= 0.258，95%CI：0.136～0.490，P=0.000）。HIF-1α阳性表达患者易出现淋巴结转移、临床分期偏晚。HIF-1α与年龄、病理类型及病理分级无明显相关（P均＞0.05）。结论：HIF-1α蛋白表达增加了卵巢上皮癌的发病风险，HIF-1α可能作为有无淋巴结转移或临床分期的判断指标。

低氧诱导因子-1α；卵巢肿瘤；低氧；免疫组化

OBJECTIVE:To explore the expression of hypoxia inducible factor-1α （HIF-1α） in epithelial ovarian cancer and its relationship with clinical pathology，in order to understand the effect of HIF-1α in malignant biological behavior of ovarian epithelial carcinoma clear.METHODS：Original foreign literatures on the correlation between HIF-1α and epithelial ovarian cancer were selected from Cochrane Library，EMbase database，Pubmed，and Chinese original literatures were from CNKI，CBM. All analyses were performed by software STATA 11.0. Relationships between HIF-1α expression and age，pathological type，histological grade，lymph node metastasis，clinical stage were analyzed using pooled odds ratio （OR） with 95% confidence interval （CI）.RESULTS：A total of 6 papers including 257 cases of epithelial ovarian cancer were analyzed. Compared with that in normal tissue，total positive rate of HIF-1αin epithelial ovarian cancer was 72.4%，which was increased significantly （OR=0.036，95%CI：0.010-0.135，P=0.000）； HIF-1α was significantly correlated with lymph node metastasis and clinical stage（OR=0.080，95%CI：0.029-0.220，P=0.000； OR=0.258，95%CI：0.136-0.490， P=0.000）. Patients with positive expression of HIF-1α were prone to lymph node metastasis and advanced clinical stage. HIF-1α had no significant relation with age，pathological type and pathological grading （P＞0.05）.CONCLUSION：The expression of HIF-1α protein increased the risk of epithelial ovarian cancer. HIF-1α could be used as indicator of lymph node metastasis and clinical stage.

hypoxia inducible factor-1α；ovarian carcinoma；hypoxia；immunohistochemistry

R730.2

A

1004-616X（2014）01-0049-06

10.3969/j.issn.1004-616x.2014.01.011

2014-06-17；

2014-09-06

作者信息：孙彩霞，E-mail：scx13784095356@126.com。*通信作者：王 军，E-mail：wangjun90@aliyun.com