高剂量二甲基甘氨酸钠对肉鸡生产性能、血常规和血液生理生化指标的影响

杨敏馨，寇 涛，张莉莉，何进田，李 博，王 恬

（南京农业大学动物科技学院，江苏 南京 210095）

高剂量二甲基甘氨酸钠对肉鸡生产性能、血常规和血液生理生化指标的影响

杨敏馨，寇 涛，张莉莉，何进田，李 博，王 恬*

（南京农业大学动物科技学院，江苏 南京 210095）

研究日粮中添加高剂量食品添加剂二甲基甘氨酸钠对肉鸡生产性能、血常规和血液生理生化指标的影响。实验选择1 日龄爱拔益加（Arbor Acres，AA）肉鸡480 只，随机分为4 个处理组，每组6 个重复，每个重复20 只肉鸡，实验期分为1～21 d（前期）和22～42 d（后期）。对照组饲喂基础日粮，实验组为在基础日粮中分别添加1 500、7 500、15 000 mg/kg的二甲基甘氨酸钠。结果表明：1）日粮中添加1 500 mg/kg的二甲基甘氨酸钠显著降低了肉鸡前期耗料与体质量增加量比（P＜0.05）；实验后期，15 000 mg/kg组肉鸡的耗料与体质量增加量比显著高于1 500 mg/kg组和7 500 mg/kg组（P＜0.05）。从全期来看，7 500 mg/kg组和15 000 mg/kg组肉鸡的平均体质量日增加量与对照组相比差异均不显著（P＞0.05）。2）不同添加剂量的二甲基甘氨酸钠对21 日龄和42 日龄肉鸡的血常规指标较对照组均没有显著差异（P＞0.05）。3）前期15 000 mg/kg组肉鸡的总蛋白含量和白蛋白含量显著低于对照组（P＜0.05）。后期15 000 mg/kg组肉鸡血液中的总胆红素极显著高于对照组、1 500 mg/kg组和7 500 mg/kg组（P＜0.01）。综上所述，15 000 mg/kg的二甲基甘氨酸钠可对肉鸡的消化吸收和肝功能造成一定的损伤，应用时应严格按规定控制用量。

二甲基甘氨酸钠；肉鸡；生产性能；血常规；血液生理生化水平

二甲基甘氨酸是一种氨基酸的衍生物，其在机体内是胆碱向甘氨酸代谢的中间产物。作为一种食品添加剂，二甲基甘氨酸具有提高机体免疫力及抗氧化能力等生理生化作用[1-3]。研究表明在肉鸡日粮中添加1 500 mg/kg的二甲基甘氨酸钠能有效促进肉鸡胰腺的发育，改善屠宰性能和肉品质，并可显著提高血液及肝脏中的总抗氧化能力[4-5]。而又有研究发现，人和动物体若摄入二甲基甘氨酸代谢产物甘氨酸的量过多，不仅不能被机体吸收利用，还会打破机体对氨基酸的吸收平衡而影响其他氨基酸的吸收，导致营养失衡而影响生长[6-7]。Meduski等[8]报道给小鼠饲喂二甲基甘氨酸，其LD50（半数致死量）达到7 400 mg/kg。由于肉鸡对于外界的不良因素反应更加敏感，本实验选用爱拔益加（Arbor Acres，AA）肉鸡为研究模型，对二甲基甘氨酸钠在肉鸡上的耐受剂量进行评价，为二甲基甘氨酸钠作为食品添加剂在食品科学领域的应用提供一定的参考依据。

1 材料与方法

1.1 材料

实验用添加剂为二甲基甘氨酸钠盐（C4H10NNaO2），由齐鲁晟华制药有限公司提供。有效成分为二甲基甘氨酸，纯度为99.0%。

1.2 方法

1.2.1 动物实验设计

采用随机单因子实验进行设计，选择体质量相近、1 日龄的AA肉鸡480 只，随机分为4 个处理组，即对照组、有效剂量组、两个多倍剂量组，多倍剂量组的剂量分别选用有效剂量的5 倍和10 倍，每组6 个重复，每个重复20 只肉鸡，雌雄各半，实验期分为1～21 d（前期）和22～42 d（后期）。实验在同一鸡舍同一饲养管理条件下进行。

1.2.2 日粮设计

基础日粮以玉米-豆粕为主，实验日粮配制参照NRC1994《家禽的营养需要量》，基础日粮组成及营养水平见表1。各实验组分别为：CON组为对照组，T1组、T2组及T3组分别为在基础日粮中添加1 500、7 500、15 000 mg/kg的二甲基甘氨酸钠的实验组。

表1 基础日粮组成及营养水平Table 1 Composition and nutrient levels of diets %

1.2.3 饲养管理

实验前对雏舍及器具进行消毒，实验鸡采用笼养方式。实验期内肉鸡自由饮水和采食，每天冲刷洗引水管1 次，日喂料2 次。定期清理粪便，持续光照。饲养期间1 周2 次带鸡消毒，并进行一次鸡舍外的环境消毒；肉鸡的免疫程序按常规进行。

1.2.4 样品采集与制备

分别于第21、42天08：00开始采样，以重复为单位，每组每重复选取1 只平均体质量接近的肉鸡，雌雄各半，称质量后颈静脉放血屠宰，采集血样待测。

1.2.5 指标测定及方法

1.2.5.1 生产性能测定

1 日龄实验肉鸡体质量于进鸡栏当日以重复为单位称量，于21、42 d早晨称质量（此前停饲12 h，自由饮水）。每天记录肉仔鸡的采食量，以重复为单位分别计算平均日采食量（average daily feed intake，ADFI）、平均体质量日增加量（average daily gain，ADG）和耗料与体质量增加量比（F/G）。

1.2.5.2 血常规指标测定

在实验期的21 d和42 d时，每个重复随机选取实验肉鸡1 只，静脉采集全血1 mL，迅速注入乙二胺四乙酸二钠（ethylenediaminetetraacetic acid disodium salt，EDTA-2Na）抗凝管，混匀后，将抗凝血样品送至南京市军区总医院，使用全自动血细胞分析仪对血液常规指标进行分析，主要包括白细胞计数（white blood cell count，WBC）、红细胞计数（red blood cell count，RBC）、血红蛋白浓度（hemoglobin，HGB）、红细胞压积（red blood cell specific volume，HCT）、血小板计数（blood platelet，PLT）。

1.2.5.3 血液生理生化指标测定

在实验期的21 d和42 d时，每个重复随机选取1 只肉鸡进行静脉采血，4 ℃、3 000 r/min离心15 min制备血清，使用上海科华生物提供的试剂盒，经VITALAB Selectra E全自动生化分析仪测定，包括谷丙转氨酶（alanine aminotransferase，ALT）、天冬氨酸基转移酶（aspartate transaminase，AST）、碱性磷酸酶（alkaline phosphatase，ALP）、总蛋白（total protein，TPRO）、白蛋白（albumin，ALB）、尿素氮（urea nitrogen，UN）、肌酐（creatinine，CRE）、血糖（glucose，GLU）、总胆红素（total bilirubin，TBILI）含量。

1.3 数据处理与分析

实验数据采用Excel 2010进行初步整理，用SPSS 20.0软件进行统计分析，采用单因素方差分析（one-way analysis of variance）进行差异显著性检验，并采用邓肯氏（Duncan’s）法进行多重比较。结果以±s表示。

2 结果与分析

2.1 不同添加剂量二甲基甘氨酸钠对AA肉鸡生产性能的影响

表2 不同添加剂量二甲基甘氨酸钠对AA肉鸡生产性能的影响Table 2 Effect of different dose levels of dietary supplementation with Na-DMG on growth performance of AA broilers

由表2可知，就前期来看，1 500 mg/kg组肉鸡的平均体质量日增加量和平均日采食量与CON组相比均有提高的趋势，但F/G比对照组降低4.0%（P＜0.05）；7 500 mg/kg组和15 000 mg/kg组肉鸡的平均体质量日增加量、平均日采食量及F/G较对照组无显著差异（P＞0.05）。

后期7 500 mg/kg组和15 000 mg/kg组肉鸡的平均体质量日增加量显著低于1 500 mg/kg组（P＜0.05），分别降低了9.72%和10.36%，但与CON组相比差异不显著（P＞0.05）；就F/G而言，处理组与CON组相比差异均不显著（P＞0.05），其中15 000 mg/kg组肉鸡的F/G显著高于1 500 mg/kg组和7 500 mg/kg组（P＜0.05）。

从全期来看，7 500 mg/kg组和15 000 mg/kg组肉鸡的平均体质量日增加量极显著低于1 500 mg/kg组（P＜0.0 1），但与C O N组相比差异均不显著（P＞0.05），1 500 mg/kg组肉鸡的平均体质量日增加量显著高于CON组（P＜0.05）；1 500、7 500、15 000 mg/kg组肉鸡的平均日采食量较C O N组并无显著差异（P＞0.05）。与CON组相比，1 500 mg/kg组肉鸡的F/G显著降低3.22%（P＜0.05），而15 000 mg/kg组肉鸡的F/G较CON组差异不显著（P＞0.05）。

2.2 不同添加剂量二甲基甘氨酸钠对AA肉鸡血常规指标的影响

表3 不同添加剂量二甲基甘氨酸钠对AA肉鸡血液常规指标的影响Table 3 Effect of different dose levels of dietary supplementation with Na-DMG on hematological parameters of AA broilers

由表3可知，与CON组相比，不同添加剂量的二甲基甘氨酸钠对肉鸡前期和后期血液中的红细胞数量、白细胞数量、血红蛋白含量、红细胞压积及其血小板数量的影响差异均不显著（P＞0.05）。

2.3 不同添加剂量二甲基甘氨酸钠对AA肉鸡血液生理生化指标的影响

由表4可知，21 日龄肉鸡二甲基甘氨酸钠组的尿素氮、肌酐、血糖、总胆红素、谷丙转氨酶、谷草转氨酶及碱性磷酸酶含量与CON组相比差异均不显著（P＞0.05）。15 000 mg/kg组肉鸡的总蛋白含量和白蛋白含量显著低于CON组（P＜0.05），而1 500 mg/kg组和7 500 mg/kg组肉鸡的总蛋白和白蛋白含量与CON组相比并无显著差异（P＞0.05）。

表4 不同添加剂量二甲基甘氨酸钠对21 日龄AA肉鸡血液生理生化指标的影响Table 4 Effect of different dose levels of dietary supplementation with Na-DMG on blood biochemical indices of 21-day-old AA broilers

表5 不同添加剂量二甲基甘氨酸钠对42 日龄AA肉鸡血液生理生化指标的影响Table 5 Effect of different dose levels of dietary supplementation with Na-DMG on blood biochemical indices of 42-day-old AA broilers

由表5可知，与CON组相比，42 日龄肉鸡二甲基甘氨酸钠组的尿素氮、肌酐、血糖、总蛋白、白蛋白、谷丙转氨酶、谷草转氨酶及碱性磷酸酶含量均无显著差异（P＞0.05）。1 500 mg/kg组和7 500 mg/kg组肉鸡的总胆红素含量较CON组差异不显著（P＞0.05），但15 000 mg/kg组肉鸡的总胆红素含量极显著高于CON组、1 500 mg/kg组和7 500 mg/kg组（P＜0.01）。

3 讨 论

二甲基甘氨酸是一种氨基酸的衍生物，其在机体内是胆碱向甘氨酸代谢的中间产物，能作为甲基的供体而发挥作用，有研究报道，二甲基甘氨酸能提高运动员和赛马的运动机能[9]。Kalmar等[10]研究发现在家禽日粮中添加二甲基甘氨酸钠能提高肉鸡的生产性能。已有临床实验证明人和新西兰白兔口服二甲基甘氨酸并不会显示出危害作用[11-12]。但目前二甲基甘氨酸钠作为食品添加剂在肉鸡日粮添加的安全性和耐受性的研究报道尚不多见。

本实验发现在肉鸡日粮中添加1 500 mg/kg的二甲基甘氨酸钠能有效降低肉鸡的耗料与体质量增加量比，增加全期体质量日增加量，而添加7 500 mg/kg和15 000 mg/kg的二甲基甘氨酸钠对肉鸡的生产性能影响不显著。Kalmar等[13]研究表明肉鸡日粮中添加10 000 mg/kg的二甲基甘氨酸对肉鸡的生产性能影响并不显著。这与本实验的研究结果一致，表明肉鸡对高剂量的二甲基甘氨酸钠的耐受性较高，并未对其生产性能造成不利影响。有报道称给动物饲喂1 000 mg/kg的二甲基甘氨酸钠，发现二甲基甘氨酸钠组的粪便中的二甲基甘氨酸钠残留与对照组相比几乎没有差异，这说明低剂量的二甲基甘氨酸钠在肠道中具有很高的吸收效率[9]。而Kalmar等[14]发现在日粮中添加量为10 000 mg/kg的二甲基甘氨酸钠的肉鸡粪便中却显示出很高的二甲基甘氨酸残留，这可能与高剂量的二甲基甘氨酸钠造成的肠道消化吸收功能障碍有关，高剂量的二甲基甘氨酸钠可能在早期肉仔鸡的肠道发育过程中影响了肠绒毛对其他营养物质的吸收，并且对肠绒毛的发育造成损害，才导致肉鸡的生产性能没有提高。

血液常规检查是全身体检中的基本体检项目，它的意义在于可以发现许多全身性疾病的早期迹象，诊断动物是否健康[15-16]。本实验结果表明日粮中添加不同水平的二甲基甘氨酸钠对于肉鸡的健康没有显著影响，肉鸡前期和后期的血液常规指标测定值均在正常参考值范围内。本实验中血液中白细胞数量（WBC）、红细胞数量（RBC）、血红蛋白（HGB）、红细胞压积（RBC）及其血小板数目（PLT）并不受高剂量二甲基甘氨酸钠的添加而变化，都维持在正常的范围内，这说明肉鸡对二甲基甘氨酸钠在代谢过程中并没有危害到血细胞的正常数量，也从一定程度上说明二甲基甘氨酸钠在血液中有很高的代谢和吸收速率。

血液生化指标是指血液中的一些酶和蛋白质，这些小分子酶和蛋白质可以反映机体新陈代谢、免疫调节、能量传递、组织细胞通透性以及生长发育等的改变，从而间接了解动物机体健康状况，并且血液生化指标的变化是机体一些组织和器官将要损害的前导信号[17]。目前，血液生化指标的测定已经广泛地应用到许多研究领域，如动物疾病的诊断、体现受试动物对其所在自然生态环境的适应程度等。本实验发现，与对照组相比，二甲基甘氨酸钠添加剂量为15 000 mg/kg的日粮显著降低了肉鸡前期血液中总蛋白和白蛋白的含量，但添加剂量为1 500 mg/kg和7 500 mg/kg组的肉鸡总蛋白和白蛋白含量较对照组差异不显著。由此可见，高剂量的二甲基甘氨酸钠可能会对营养物质的消化吸收产生一定的影响。研究发现血清蛋白主要由白蛋白和球蛋白组成，而肝脏是合成白蛋白的场所，机体通过从食物中吸收蛋白质等而进行合成白蛋白和总蛋白，当机体出现蛋白质营养不良或吸收不良的时候，肝实质细胞无法获取合成白蛋白所需的营养物质，从而使白蛋白的合成受影响，使白蛋白的含量降低[18]。高剂量的二甲基甘氨酸在机体代谢途径中，可产生代谢产物甘氨酸，Wang Weiwei等[19]研究报道称机体过量摄入甘氨酸可影响中性氨基酸的转运和利用，这可能是总蛋白和白蛋白降低的原因。血液中的谷草转氨酶和谷丙转氨酶是一种对肝脏损伤很敏感的酶，正常情况下分布于肝细胞和其他组织内，在氨基酸的合成和蛋白质分解代谢中起重要的中介作用[20-21]。在实验中，15 000 mg/kg的二甲基甘氨酸钠能够从一定程度上提高谷丙转氨酶含量，这说明高剂量二甲基甘氨酸钠可能对肉鸡肝细胞造成了一定损伤。而胆红素是血液循环中衰老红细胞在肝脏、脾脏及骨髓的单核-吞噬细胞系统中分解和破坏的产物[22]。若机体内生成胆红素过多，超过了肝细胞处理胆红素的能力，或者肝细胞处理胆红素的能力下降，以及胆红素排泄障碍等均可使血液中胆红素水平增高。本实验后期，15 000 mg/kg的二甲基甘氨酸钠与其他组相比显著提高了肉鸡血液中的总胆红素的含量，这可能是由于高剂量的二甲基甘氨酸钠对肉鸡的肝脏细胞造成了损伤，使得肝脏处理胆红素的能力下降，造成血液中胆红素的含量升高。

4 结 论

日粮中添加1 500 mg/kg和7 500 mg/kg的二甲基甘氨酸钠并未对AA肉鸡的生产性能和血液生化水平造成不利影响，但高剂量15 000 mg/kg的二甲基甘氨酸钠显著降低了饲养前期AA肉鸡血液中总蛋白、白蛋白的含量，并提高了后期血液中胆红素的含量，对AA肉鸡肝细胞功能造成了一定的损伤。结果提示：在食品中添加高剂量的二甲基甘氨酸钠会对机体代谢产生不良影响，使用时应严格按规定控制剂量。

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Effect of High-Dose N，N-Dimethylglycine Sodium on Growth Performance， Hematological Parameters and Blood Physiobiochemical Indices of Broilers

YANG Minxin， KOU Tao， ZHANG Lili， HE Jintian， LI Bo， WANG Tian*
(College of Animal Science and Technology， Nanjing Agricultural University， Nanjing 210095， China)

The main objective of this study was to evaluate the effect of high-dose N,N-dimethylglycine sodium (Na-DMG) on growth performance, hematological parameters and blood physiobiochemical indices of broilers. Totally 480 one-day-old Arbor Acres (AA) broiler chicks were randomly allocated to four groups with 6 replicates in each group, and fed commercial diet supplemented with N,N-dimethylglycine sodium at doses of 1 500, 7 500 and 15 000 mg/kg, respectively, for 42 days, which was divided into early (1?21 d) and later (22?42 d) stages. The results showed that: 1) the dietary addition of 1 500 mg/kg N,N-dimethylglycine sodium could decrease the feed gain ratio of 21-day-old broilers signifi cantly (P < 0.05). N,N-dimethylglycine sodium at 15 000 mg/kg could result in the increased the feed gain ratio of 42-day-old broilers when compared with 1 500 and 7 500 mg/kg (P < 0.05). Throughout the whole administration period, no signifi cant difference in feed gain ratio among the control group, 7 500 mg/kg and 15 000 mg/kg groups was observed (P > 0.05); (2) different dose levels of dietary supplementation with N,N-dimethylglycine sodium had no significant difference in hematological parameters of broilers when compared with the control group (P > 0.05); 3) feeding with 15 000 mg/kg N,N-dimethylglycine sodium decreased blood total protein and albumin levels of 21-day-old broilers significantly when compared with the control group (P < 0.05), while total bilirubin in the blood from the 15 000 mg/kg group was signifi cantly higher than that from the control, 1 500 mg/kg and 7 500 mg/kg groups (P < 0.01). In conclusion, the dietary addition of 15 000 mg/kg N,N-dimethylglycine sodium can damage digestible absorption and liver function of broilers.

N,N-dimethylglycine sodium; broiler; growth performance; hematological parameters; blood physiochemical indices

TS202.3

A

1002-6630（2015）09-0185-05

10.7506/spkx1002-6630-201509034

2014-07-02

江苏省科技支撑计划（农业）项目（BE2010356）

杨敏馨（1991—），女，硕士研究生，研究方向为动物营养与饲料科学。E-mail：yangminxin1991@163.com

*通信作者：王恬（1958—），男，教授，博士，研究方向为动物营养与饲料科学。E-mail：twang18@163.com